达州地区RhD阳性健康献血者RhCcEe分布频率调查

潘枫，刘娟，熊德琼，张泽君，冯晨程，李维，王春泽，周晓瑜，祝富铭

(达州市中西医结合医院输血科，四川 达州 635000)

Rh血型系统是目前已知的最复杂的、最具多态性的血型系统，与ABO血型系统一样具有重要的临床意义[1]。Rh血型系统拥有丰富的抗原数量，目前已发现的抗原多达55种，但与临床联系最为紧密的抗原主要为RhD、RhE、Rhe、RhC和Rhc[2-3]。当前，临床输血技术规范要求输血前进行RhD、ABO同型检测，但由于Rh血型系统具有很强的免疫原性，临床仍存在输血相关免疫反应、溶血性疾病的发生风险，增加输血安全性事件的发生率[4-5]。因此，了解各地区Rh血型各表型的分布特征，是提高输血安全性、有效性的重要措施。本研究拟调查达州地区RhD阳性健康献血者的RhCcEe分布频率，旨在准确掌握该地区健康献血者的Rh血型表型分布情况，从而更好地保证临床输血安全。

1 资料与方法

1.1 一般资料

采用简单随机抽样法选取2020年7月至2020年12月达州地区1 496例RhD阳性健康献血者的血液样本作为研究对象。纳入标准：(1)血液经Rh血液系统中抗-D检测为RhD阳性；(2)血液样本均符合血液入库标准。其中，男性871例，女性769例；年龄18～55岁，平均(27.85±9.64)岁。

1.2 主要仪器与试剂

微柱凝胶检测卡(含有抗-D、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e单克隆抗体试剂，长春博迅生物技术有限责任公司)、全自动血型分析仪(Microlab STARlet IVD,瑞士哈美顿博纳图斯股份有限公司)、血型血清学离心机(TD-3A型，长春博研科学仪器有限责任公司)。

1.3 研究方法

取献血者抗凝血液标本3 mL，装入试管后常规离心，红细胞经生理盐水洗涤后，制成0.8%～1%的红细胞悬液；在微柱凝胶检测卡内依次加入50 μL红细胞悬液，900 rpm离心2 min，1 500 rpm离心3 min；以红细胞抗原与相应抗体凝集，并位于微柱凝胶中上层为阳性。

1.4 观察指标

(1)据血型将RhD阳性健康献血者分为A型(n=548)、B型(n=317)、O型(n=504)和AB型(n=127)，比较各组的Rh抗原分型、Rh抗原分布频率。(2)比较达州地区与北京、兰州、湖北和福州等地区RhD阳性健康献血者的Rh血型表型分布。北京、兰州、湖北和福州地区RhD阳性健康献血者的Rh血型表型分布数据采用近年来公开发表的文献[6-9]。

1.5 统计学分析

采用SPSS20.0软件进行统计分析。计数资料以[n(%)]表示，组间行χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 RhD阳性健康献血者Rh抗原分型结果

1 496例RhD阳性健康献血者中，血型包括A型548例，B型317例，O型504例，AB型127例。共检出Rh血型抗原8种分型，检出频率从小到大依次为：CCDee>CcDEe>CcDee>ccDEE>ccDEe>CcDEE>CCDEe>ccDee。不同ABO血型献血者CCDee、CcDEe、ccDEE、CcDee、ccDEe和其他Rh抗原表型(CcDEE、ccDee、CCDEe)的检出频率比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 RhD阳性健康献血者Rh抗原分型结果[n(%)]

表2 RhD阳性健康献血者Rh抗原分布[n(%)]

2.2 RhD阳性健康献血者Rh抗原分布频率

RhD阳性健康献血者中，Rh抗原C、c、E、e阳性率依次为91.44% (1 368/1 496)、51.27% (767/1 496)、42.78% (640/1 496)和93.98% (1 406/1 496)。不同血型献血者Rh抗原分布频率比较，差异无统计学意义(χ2=1.764，P=0.95)。见表2。

2.3 达州地区与国内其他地区Rh血型表型分布情况比较

达州地区RhD阳性健康献血者的Rh血型表型分布与国内北京、兰州、湖北和福州等地区分布情况接近(P>0.05)。北京和湖北均未检出CCDEE表型。见表3。

表3 达州地区与国内其他地区Rh血型表型分布情况比较[n(%)]

3 讨论

Rh表型多态性是发生免疫应答的基础，在临床输血治疗中对受血者进行Rh血型抗体筛查以避免输血不良反应的发生被多数医院采用，但尚未将献血者Rh抗原分型检查纳入常规检查中[10]。研究发现，受血者因RhCE非同型输血会产生相应的免疫性抗体，从而引发严重的免疫溶血性输血反应，甚至危及受血者生命[11]。因此，有必要对献血者Rh抗原分型进行检查，以减少受血者不规则抗体的产生，提高输血的安全性。王剑锋等[12]对铜川地区无偿献血人群Rh血型表型分布情况进行调查，并建立了Rh血型表型数据库，在输血前根据受血者血液中不规则抗体的特点，在数据库中针对性选择相应抗原缺失的红细胞悬液进行交叉配血，明显提高了配血成功率。

本研究分析了达州地区RhD阳性健康献血者Rh表型抗原CcEe的分布频率，结果显示，1 496例RhD阳性健康献血者共检出8种Rh血型抗原分型，抗原分型以CCDee为主，其次为CcDEe，ccDee检出率最低，与向敏等[6]报道的Rh血型表型分布特征一致。理论上来说，RhD阳性健康献血者的Rh表型抗原应有9种，除本研究中检出的8种分型外，还存在CCDEE型，但在临床上较为罕见[13]。本研究未检出CCDEE分型，可能与样本量较少有关，也进一步说明CCDEE是一种稀有表型。本研究发现，不同ABO型血型献血者Rh抗原表型的检出频率比较无明显差异，符合其他地区报道的规律，但与丁佳栋等[7]的研究结果存在差异，可能与研究样本量差异较大有关，也可能与研究对象之间存在民族差异有关。本研究显示，RhD阳性健康献血者中，e、C抗原阳性率达90%以上，且明显高于c、E，由此推测RhD阳性人群在C、c、E、e抗原不匹配输注时E、c抗原刺激产生抗体的可能性最大。本研究还发现，不同血型献血者Rh抗原分布频率比较无明显差异，分析其原因可能是：RhCE基因连锁在一条染色体上，且在人群中分布较为均衡[14-15]。为明确达州地区RhD阳性健康献血者Rh血型表型分布情况是否与国内其他区域存在差异，本研究将达州地区Rh血型表型分布与北京、兰州、湖北和福州等地区的分布情况进行对比，结果显示达州地区RhD阳性健康献血者的Rh血型表型分布与北京、兰州、湖北和福州等地区分布情况接近，提示达州地区RhD阳性健康献血者Rh表型分布符合国内部分地区的分布特征。

综上所述，达州地区RhD阳性健康献血者Rh表型抗原以CCDee、CcDEe型最为常见，C、e抗原分布频率较高，Rh表型分布特征与国内部分地区相似。在临床输血实践中，应针对性地建立本地献血者Rh血型数据库，为受血者的个性化输血治疗提供依据，以保证输血的科学性与有效性。