血清AFP、AFP-L3、AFU、GP73联合检测对原发性肝癌的诊断价值

王志远，卢立全，牛继华

1.上海市养志康复医院(上海市阳光康复中心)检验科，上海 201600；2.上海市浦东新区人民医院检验科，上海 201200；3.上海市松江区中心医院检验科，上海 201620

原发性肝癌属于消化系统恶性肿瘤，在世界上属于极为常见的肿瘤之一，其具有恶化程度高、侵略性强、病死率高等特征。全世界范围内该病病死率位居恶性肿瘤死亡率第三，在国内仅次于肺癌位居第二，且每年均呈上升趋势[1-2]。因肝癌具有较强的隐匿性，在早期没有明显的征兆，因此易被忽略，导致发现时患者已发展为中晚期，错失治疗良机。肝硬化主要由多种病因引起，相关研究显示肝硬化与慢性乙型肝炎有关[3-4]。目前，临床上常用血清AFP指标水平作为诊断肝癌的重要依据，但其效果不佳，常发生假阳性和假阴性情况，从而影响其检测的准确度、灵敏度、特异性。因此临床上急需寻求一种高效的检测方案。本研究旨在研究检测患者血清甲胎蛋白(alpha fetoprotein，AFP)、甲胎蛋白异质体(alpha fetoprotein heterogeneity，AFP-L3)、α-L-岩 藻 糖 苷 酶(A-L-Fucosidase，AFU)、高尔基体糖蛋白73(golgi glycoprotein 73，GP73)水平对原发性肝癌的诊断价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择上海市养志康复医院(上海市阳光康复中心)2018年2月至2020年10月期间收治的66例原发性肝癌患者作为观察组。纳入标准：①经临床诊断均确诊为肝癌；②无合并其他心肝肾疾病及其他恶性肿瘤者。排除标准：①患有严重心肝肾疾病者；②患有合并其他恶性肿瘤者。选择同期在上述医院体检的66例健康志愿者作为对照组。观察组中男性32例，女性34例；年龄45~70岁，平均(58.2±10.3)岁。对照组中男性35例，女性31例；年龄48~75岁，平均(59.6±12.3)岁。两组受检者的性别、年龄比较差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会批准，所有受检者均对本研究知情并签署同意书。

1.2 检测方法 所有受检者均于清晨空腹抽取静脉血3 mL，采用离心机以3 000 r/min的转速离心30 min，提取上层清液，将提取的上层清液血清进行标记，然后将其存放于-70℃环境中备用。采用化学发光免疫分析仪(仪器购自上海寰熙医疗科技有限公司)测定血清AFP及AFP-L3水平；血清AFU水平采用生化定量法进行检测，试剂盒由上海信帆生物有限公司提供；血清GP73水平采用酶联免疫法进行检测，试剂盒由上海酶联生物科技有限公司提供。以上检测工作均由同一名工作人员严格按照说明书进行操作。以AFP>20μg/L、AFP-L3>10%、AFU>35 U/L、GP73>150μg/L为阳性，计算阳性率。

1.3 观察指标 (1)比较两组受检者血清中AFP、AFP-L3、AFU及GP73水平；(2)比较两组受检者血清中AFP、AFP-L3、AFU及GP73检测阳性率；(3)比较两组受检者血清中各指标单独及联合检测的特异性、灵敏度、准确度。

1.4 统计学方法 应用SPSS 25.0统计软件进行数据分析。计量资料符合正态分布，以均数±标准差(±s)表示，组间均数比较采用t检验，计数资料比较采用χ2检验。均以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组受检者的血清AFP、AFP-L3、AFU及GP73水平比较 观察组患者的血清AFP、AFP-L3、AFU及GP73水平明显高于对照组，差异均有显著统计学意义(P<0.01)，见表1。

表1 两组受检者的血清AFP、AFP-L3、AFU及GP73水平比较(±s)

表1 两组受检者的血清AFP、AFP-L3、AFU及GP73水平比较(±s)

组别观察组对照组t值P值AFP(μg/L)219.56±17.94 17.19±3.15 90.261 0.001 AFP-L3(%)15.78±4.56 3.89±0.78 20.880 0.001 AFU(U/L)68.56±11.78 24.78±6.56 25.410 0.002例数66 66 GP73(μg/L)208.89±48.76 67.46±15.78 21.678 0.001

2.2 两组受检者血清中AFP、AFP-L3、AFU及GP73检测阳性率比较 观察组患者血清中AFP、AFP-L3、AFU及GP73检测阳性率明显高于对照组，差异均有显著统计学意义(P<0.01)，见表2。

表2 两组血清中AFP、AFP-L3、AFU及GP73检测阳性率比较[例(%)]

2.3 血清中各指标单独及联合检测对原发性肝癌的特异性、灵敏度、准确度比较 各项指标对原发性肝癌均有一定的诊断价值，联合诊断准确度高达96.5%，四项指标中对原发性肝癌患者特异性最高的AFP-L3为90.2%，灵敏度最高的AFU为74.6%，AFP-L3单独诊断准确度最高，为80.9%，见表3。

表3 血清中各指标单独及联合检测对原发性肝癌的特异性、灵敏度、准确度比较(%)

3 讨论

肝癌属于恶性肿瘤之一，其病死率在我国居高不下，严重威胁着患者的生命安全，其具有反复发作及转移等特点。医学上根据其病理分为胆管细胞型肝癌、肝细胞型肝癌及混合型肝癌[5-6]。我国主要以肝细胞型肝癌为主，其约占肝癌总患者的90%以上。临床上主要采用检测血清AFP指标来诊断患者病情，但单一检测指标在临床上易出现误差，造成诊断错误[7]。

AFP是一种糖原蛋白，它是由卵黄囊细胞及肝脏细胞合成分泌的，其主要发生在胚胎时期，在其他时期合成量较少或不合成量，但机体肝脏受到损害时会大量分泌。因此，临床上常将AFP作为肝癌诊断的标志物之一，但其检测灵敏度较低，仅为40%~65%，且还存在30%左右的假阴性、假阳性问题。因此，临床上需进一步寻求更为准确的标志物[8-9]。AFP主要有三种压型，分别为AFP-L1、AFP-L2、AFP-L3，是根据其与小扁豆结合程度的不同进行划分的，其中AFP-L3作为一项特殊的指标，在肝癌细胞中具有特殊性，并随着病情的恶化其所占比例也随之升高，因此在临床上也采用AFP-L3作为肝癌的标志物之一[10]。AFP-L3属于AFP中的一种压型，它只能产生于肿瘤细胞中。已有相关学者将AFP-L3用于诊断早期肝癌检测，且取得良好效果。主要通过低浓度AFP结合影像学对患者进行AFP-L3动态观察，从而达到早期诊断的目的[11-12]。GP73是一种跨膜蛋白，近几年发现其与肝癌有关，一般情况下，常活跃于肝癌组织中，且会分泌至细胞内或细胞表面，从而使得血清中GP73水平显著提升，且特异性表达明显升高。据相关研究表明，采用GP73诊断早期肝癌患者优于AFP[13-14]。AFU是一种水解酶，它主要存在哺乳动物中，能参与分解多种活性分子如糖脂、蛋白等，且在肝癌患者血清中AFU水平较高，虽此现象的机理至今尚不明确，但多数医学研究结果表明基本一致，故常被作为临床诊断肺癌的指标[15-16]。本研究结果表明，肝癌患者血清中的AFP、AFP-L3、AFU及GP73水平及其检测阳性率明显高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。各项指标对原发性肝癌均有一定的诊断价值，联合诊断准确度高达96.5%，四项指标中AFP-L3的特异性最高为90.2%，AFU的灵敏度最高为74.6%，AFP-L3单独诊断准确度最高，为80.9%。

综上所述，通过单独检测血清AFP、AFP-L3、AFU、GP73水平，对原发性肝癌患者的诊断有一定的价值，但联合检测能显著提升其灵敏度、特异性和准确度，具有临床应用价值。