经皮肺穿刺活检联合血清CEA和NSE及CA125检查在非小细胞肺癌中的诊断价值分析

倪英

（湖北省荆州市胸科医院内二科，湖北 荆州 434000）

肺癌发病率与死亡率居全球癌症首位，其中非小细胞肺癌（non small cell lung cancer，NSCLC）占肺癌约80%，严重威胁人们的生命健康。调查研究[1]显示，NSCLC患者早期诊断率为12%～20%，5年内生存率可达70%，因此，早期诊断该类患者具有积极意义，可及时采取治疗措施改善预后。X线胸片及痰细胞学检测是以往临床诊断肺部病变最常用的方法，但诊断效能较低，不能降低NSCLC病死率，因此，寻找方便、安全、高效的诊断方式是目前的首要任务[2]。血清肿瘤标志物由于具有可便利获取、重复性高等优点，可作为诊断癌症、判定预后较为可靠参考指标，血清癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）、神经元特异性烯醇化酶（neuronspecific enolase，NSE）、糖类抗原125（Carbohydrate antigen 125，CA125）在NSCLC中应用较多，但也有研究[3]认为由于器官特异性，三者在NSCLC诊断中诊断效能差异较大，因此，单纯依靠血清肿瘤标志物诊断效能并不高。近期研究[4]显示，CT引导下经皮肺穿刺活检诊断准确度高，定位准确。本研究通过将穿刺活检联合血清肿瘤标志物，旨在探究联合检测在NSCLC中诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2016年2月至2017年7月本院收治的疑似肺癌患者92例作为研究对象，患者经影像学检查发现肺部肿物，后经支气管镜检、痰液细胞学等检查未能确诊。其中男52例，女40例；年龄45～79岁，平均年龄（58.69±7.22）岁。

1.2 纳入与排除标准 纳入标准：患者均进行影像学检查发现肺部肿物，支气管镜检、痰液细胞学等未能明确诊断肺部病变；患者先进行皮肺穿刺活检及血清肿瘤标志物检测，随后均进行外科手术获得完整病理标本；本研究经本院医学伦理委员会审核批准，患者及家属均知情同意并签署知情同意书。排除标准：患者自身不能控制咳嗽等原因无法继续活检者；接受抗凝治疗或血小板凝聚障碍者；肺血管病变、肺动脉高压者；穿刺途中发现肺气肿者；接受正压机械通气治疗者；已进行全肺切除者；心律失常、心肌梗死及心功能不全者。

1.3 方法

1.3.1 血清CEA、NSE、CA125检测 清晨，在空腹状态下采集所有研究对象3 ml静脉血，并加入枸橼酸钠抗凝剂，3 000 rpm离心15 min，CEA、CA125试剂盒（酶联免疫吸附法）由罗氏（瑞士）公司提供，NSE试剂盒（酶联免疫吸附法）由美国R&D公司提供，先行不同浓度梯度标准品溶液配制，设置空白孔、待测样品孔，其中待测样品孔加入稀释5倍后的样品溶液，轻柔混匀后置37℃水浴锅中，孵育30 min，清洗、甩干，并加入50μl酶标试剂；空白孔中加入等量蒸馏水，封板后置37℃水浴锅中，孵育30 min，清洗、甩干，先后加入50μl显色剂A、B，37℃避光孵育15 min，最后加入50μl终止液终止反应。采用酶标仪测定待测样品吸光度（波长450nm），绘制标准曲线，并依据吸光度计算待测样品浓度。

1.3.2 经皮肺穿刺活检 患者均于穿刺前进行胸部CT扫描，所用设备为荷兰飞利浦Brilliance 64排螺旋CT扫描仪，扫描前禁食4～6 h，扫描时以病灶为中心上下扫描范围增加，层厚设定为5 mm，层间隔设定为5 mm。依据CT扫描结果，确定穿刺进针点，用胶布将塑料胶管固定于进针部位对应胸壁，进行再次扫描确定穿刺位点并用记号笔在患者皮肤作标记。消毒铺巾后在穿刺点附近注射0.2%利多卡因进行局部麻醉，麻醉时注意勿将麻醉针穿透胸膜。麻醉后根据CT定位方向、角度进针，整个过程患者摒住呼吸，当穿刺针进入胸壁软组织时，再次进行扫描，调整进针方向、角度直至正确进病灶内。此时用穿刺针进行1～3次弹射穿刺肺组织，获取标本，将获得组织置于甲醛溶液中进行固定。

1.3.3 手术 患者均于本院胸外科进行全身麻醉，在病灶部位进行肺叶切除术或伴淋巴结清扫术，术后将病灶组织送往病理科。

1.3.4 结果判定 CT引导下经皮肺穿刺活检及手术获得病理标本均置于10%甲醛溶液中进行固定，随后进行石蜡包埋，制备切片4～5μm，脱蜡后进行HE染色。所有病理标本均由本院病理科2名资深医师在（100～400）×显微镜下进行观察，病理组织学依据WHO肺癌分类法进行判定[5]。

1.4 判定标准 根据NSCLC及不同分型患者血清中CEA、CA125、NSE水平，采用受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic，ROC）分析三者的临界值，以此作为NSCLC及不同分型阳性判定标准。

1.5 统计学方法 采用SPSS 21.0统计软件进行数据分析，计数资料以[n（%）]表示，采用χ2检验或Z检验，不符合正态分布的计量资料采用M（P25，P75）进行统计描述；两组间比较采用Mann-Whitney U检验、多组间比较采用Kruskal-WallisH检验;以手术病理结果作为金标准，计算诊断敏感性、特异性，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 活检穿刺与手术病理检测NSCLC结果比较 手术病理结果显示，肺部良性病变21例，NSCLC71例，以手术病理作为诊断金标准，CT引导下经皮肺穿刺检测结果符合NSCLC有66例（90.14%），见表1。

表1 活检穿刺与手术病理检测NSCLC结果比较

2.2 活检穿刺与手术病理检测NSCLC病理类型结果比较 手术病理结果显示，腺癌41例，鳞癌30例，CT引导下经皮肺穿刺检测结果符合腺癌的有38例（90.24%），鳞癌28例（90.00%），两者比较差异无统计学意义，见表2。

表2 活检穿刺与手术病理检测腺癌与鳞癌结果比较

2.3 血清中CEA、CA125、NSE测定结果比较 腺癌、鳞癌血清CEA、NSE及腺癌CA125水平均高于良性组，鳞癌CA125低于良性组，差异有统计学意义（P＜0.05）。腺癌组CEA、CA125水平均高于鳞癌组，NSE水平低于鳞癌组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 各组血清中CEA、CA125、NSE水平比较

2.4 ROC分析血清中CEA、CA125、NSE在NSCLC不同分型中的临界值 ROC分析血清中CEA在NSCLC及其分型腺癌、鳞癌中的临界值分别为7.56、11.07、5.86 ng/ml；CA125在NSCLC及其分型腺癌、鳞癌中的临界值分别为26.52、24.12、25.65 U/ml；NSE在NSCLC及其分型腺癌、鳞癌中的临界值分别为16.49、18.32、20.16 ng/ml，见图1。

图1 ROC分析血清中CEA、CA125、NSE在腺癌和鳞癌中的诊断价值

2.5 不同类型肿瘤血清CEA、CA125、NSE诊断效能比较 CEA腺癌中的灵敏性、特异性均高于鳞癌，CA125在鳞癌中的灵敏性高于腺癌，NSE在鳞癌中的特异性高于腺癌，差异有统计学意义（P＜0.05），见表4～5。

表4 腺癌中CEA、CA125、NSE诊断结果

表5 鳞癌中CEA、CA125、NSE诊断结果

2.6 不同检测方式诊断效能比较 穿刺活检联合血清CEA、CA125、NSE检测在腺癌、鳞癌的符合率、敏感性、特异性均高于血清CEA、CA125、NSE单项检测，差异有统计学意义（P＜0.05），见表6～7。

表6 腺癌单项检测及联合检测诊断效能比较

3 讨论

肺部病变仅依靠影像学检测，较难定性，而研究[6]显示，肿瘤标志物多由肿瘤细胞或经肿瘤刺激后由机体细胞产生，对反映肿瘤发生、发展具有一定意义。因此，其已逐渐发展为无创诊断和疾病监测的重要潜在标志物[7-8]。

表7 鳞癌单项检测及联合检测诊断效能比较

CT引导下经皮肺穿刺活检属于诊断肺部病变的微创法，操作安全、简便、快速，目前在临床上应用较多，可提高穿刺准确率[9]，临床研究[10]显示，其对于血管、心脏等特殊部位进行穿刺时可降低并发症的发生率。有研究[11]报道，在CT引导下对肺癌进行诊断的灵敏度和特异度均能达到90%以上。本研究结果显示，经皮肺穿刺对NSCLC诊断灵敏性为90.14%，特异性为90.48%，符合率为90.22%，与以往研究[12]结果相符，提示CT引导下经皮肺穿刺活检在NSCLC诊断中具有一定的优势。为探究在不同肿瘤类型中的诊断效能，本研究进一步分析发现在鳞癌、腺癌中穿刺检测灵敏性约90%，符合率约95%，在鳞癌、腺癌中诊断效能比较差异无统计学意义，说明在对不同类型NSCLC进行经皮肺穿刺活检诊断效能均较高，具有较高的临床诊断价值。本研究结果显示，CT引导下经皮肺穿刺活检虽具有较高的诊断效能，但仍存在一定的假阳性、假阴性，结合文献分析原因可能为，CT引导下经皮肺穿刺容易受到病灶大小的影响，在对体积较大的病灶进行取材时，易忽视病灶内部非病变组织的存在，获取液化组织、坏死组织，降低穿刺取材的准确性；穿刺体积较小的病灶时，受效应容积的影响，无法准确达到病灶位，导致假阳性结果，因此，应进行多次取材，以确保穿刺诊断准确性[13-15]。

CEA主要存在胚胎、癌组织中，有研究[16]显示非小细胞癌者CEA水平明显升高，且与肿瘤产生、复发密切相关，因此，其CEA对评估非小细胞癌患者预后具有重要作用。NSE属于神经元细胞分泌的酸性蛋白酶，可用于NSCLC、甲状腺髓质癌等癌症病情监测及疗效评价，如商玉珠[17]报道，鳞癌NSE阳性检出率最高，超过CEA，常作为患者治疗及病情监测的分子标志物。CA125作为卵巢癌相关抗原，在肝、胰腺、胃癌等恶性肿瘤呈高表达，且在NSCLC中也呈高表达，具有半衰期短、代谢速度快等特点，检测该指标可观察肿瘤生长变化情况[18]。本研究结果显示，腺癌、鳞癌血清CEA、NSE及腺癌CA125水平均高于良性组，鳞癌CA125低于良性组（P＜0.05）；腺癌组CEA、CA125水平均高于鳞癌组，NSE水平低于鳞癌组（P＜0.05）。与王秋波等[19]研究结果相符，提示NSE在不同肺癌病理类型中差异表达。进一步研究显示，CEA在腺癌中的灵敏性、特异性高于鳞癌，CA125在鳞癌中的灵敏性高于腺癌，NSE在鳞癌中的特异性高于腺癌，提示根据NSCLC患者血清CEA、CA125、NSE水平变化可鉴别NSCLC种类。本研究结果显示，血清NSE水平对于鉴别诊断腺癌和鳞癌的灵敏度比较差异无统计学意义，鳞癌诊断中特异性较高，分析原因为，可能是部分样本采集后操作不当存在一定溶血现象，造成NSE假性升高，致使鉴别诊断鳞癌特异性高，应进行下一步实验验证。本研究结果显示，穿刺活检联合血清CEA、CA125、NSE检测在腺癌、鳞癌的符合率、敏感性、特异性均高于血清CEA、CA125、NSE单项检测，差异有统计学意义（P＜0.05），提示联合诊断在NSCLC病理类型诊断中价值更高。

综上所述，经皮肺穿刺活检联合血清CEA、NSE、CA125检查在NSCLC中具有较高的临床诊断价值，在进行穿刺活检诊断时，还可结合肿瘤标志物进行辅助诊断，避免漏诊、误诊的发生，进一步提高诊断效率。