血清Leptin、PKCε与乳腺癌患者临床病理特征及预后的相关性研究*

高 飞,任冠颖,高晓培,郄 帅,洪 丹,杨 琳

1.保定市第一中心医院放疗科，河北保定 071000；河北大学附属医院：2.肿瘤内科；3.放疗科，河北保定 071000

近年来，我国已成为乳腺癌发病率增长速度最快的国家之一，乳腺癌也成为发病率最高的女性恶性肿瘤[1]。目前，乳腺癌以手术治疗为主，放疗、化疗、内分泌治疗等多种治疗方案为辅，通过治疗可提高患者远期治愈率，但部分患者仍存在病情复发、病灶转移等情况[2]。因此，探索乳腺癌的临床发病机制，并探讨相应的诊断与治疗手段具有十分重要的临床意义[3]。蛋白激酶Cε(PKCε)是一种新型家族激酶成员，有研究表明，在乳腺癌细胞中PKCε多处于异常高表达状态，Leptin是参与细胞生长发育和能量代谢的一种分泌蛋白，在多种肿瘤细胞中均处于异常活跃状态[4]，但PKCε和Leptin在乳腺癌患者血清中的水平及与患者病理特征的相关性鲜见报道。因此，本研究拟探讨乳腺癌临床病理特征和临床预后与血清Leptin、PKCε水平的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取河北大学附属医院2017年11月至2018年2月收治的40例乳腺癌患者作为观察组，均为女性；年龄(43.29±5.50)岁；TNM分期Ⅰ期13例，Ⅱ期14例，Ⅲ期10例，Ⅳ期3例；病灶区最大径(3.85±1.29)mm；腋窝淋巴结转移12例，未转移28例；浸润性乳腺癌29例，导管原位癌11例。另选取同期50例体检健康女性作为对照组，年龄(45.14±5.74)岁。

1.2观察组纳入标准 (1)确诊后无任何抗肿瘤治疗；(2)经病理组织学检测确诊为乳腺癌；(3)近3个月内无急性感染；(4)无肾脏或类风湿疾病；(5)近半年未应用激素类药物；(6)活动状态评分≥60分；(7)经伦理委员会批准，所有受试者均签署知情同意书。

1.3观察组排除标准 (1)骨髓功能异常的乳腺癌患者；(2)严重脏器疾病患者；(3)合并免疫性疾病患者；(4)内分泌代谢性疾病患者。

1.4方法 本研究对患者随访2年，详细记录患者预后质量。入组后采集患者空腹静脉血3 mL,3 000 r/min离心5 min，离心并收集血清，采用酶联免疫吸附试验检测血清Leptin和PKCε水平，Leptin和PKCε试剂盒均购自杭州联科生物科技有限公司，并严格遵照试剂盒说明书进行操作。

2 结 果

2.1两组血清Leptin、PKCε水平比较 观察组血清Leptin、PKCε水平均明显高于对照组(P<0.05)，见表1。

表1 两组血清Leptin、PKCε水平比较

2.2不同病理特征患者血清Leptin、PKCε水平比 较同TNM分期、病灶区最大径和腋窝淋巴结转移患者血清Leptin、PKCε水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)；随着TNM分期升高、病灶区最大径增大及腋窝淋巴结转移出现，患者血清Leptin、PKCε水平呈明显升高状态(P<0.05)，见表2。

表2 不同病理特征患者血清Leptin、PKCε水平比较

2.3不同病理特征与血清Leptin、PKCε水平的相关性分析 患者血清Leptin、PKCε水平与TNM分期、病灶区最大径、腋窝淋巴结转移均呈正相关(r=0.675～0.743，P<0.05)，见表3。

表3 不同病理特征患者血清Leptin、PKCε水平的关系

2.4不同预后质量患者血清Leptin、PKCε水平比较 死亡组患者血清Leptin、PKCε水平均明显高于存活组(P<0.05)，见表4。

表4 不同预后质量患者血清Leptin、PKCε水平比较

2.5不同Leptin、PKCε水平情况患者预后质量 本研究以Leptin、PKCε水平均值作为高水平和低水平的临界值，高水平Leptin共15例，高水平PKCε共13例，高水平Leptin和高水平PKCε患者生存率明显低于低水平Leptin和低水平PKCε(P<0.05)，见图1、2。

图1 高水平和低水平Leptin患者预后质量调查结果

图2 高水平和低水平PKCε患者预后质量调查结果

2.6Leptin、PKCε水平对乳腺癌患者预后质量的影响 血清高水平Leptin和高水平PKCε是影响乳腺癌患者预后质量的独立危险因素(P<0.05)，见表6。

表6 Leptin、PKCε表达对乳腺癌患者预后质量的影响

3 讨 论

作为目前全球女性群体中发病率最高的恶性肿瘤，乳腺癌已逐渐成为临床中严重威胁女性群体健康的疾病之一[5]。目前，对于乳腺癌的治疗以手术治疗为主，但患者治疗后仍可能出现病情复发、转移的情况，如何对患者进行有效治疗并改善患者治疗预后质量具有十分重要的意义[6]。有研究者发现，炎性反应、免疫功能异常改变均与恶性肿瘤的发生、发展、复发或转移关系密切[7]。恶性肿瘤具有抗凋亡、抗生长抑制、易侵袭性、转移性、永生性，持续血管生长等特征，而炎症微环境是肿瘤进展的主要病理特征[8]。且炎症可促进肿瘤转移，并可诱发肿瘤细胞逃避免疫杀伤，与多种恶性肿瘤特征密切相关。恶性肿瘤患者体内微环境多处于失衡状态，伴随免疫功能下降的情况。目前的研究发现，在结直肠癌、肝癌、呼吸系统肿瘤、消化系统肿瘤、血液病等患者血液中，Leptin和PKCε处于明显异常表达状态，Leptin和PKCε与肿瘤发生、发展、增加肿瘤耐药性及患者预后可能存在一定相关性，但仍需要进一步深入探究[9-11]。有学者指出，对乳腺癌的临床发病机制进行深入研究，并辅助患者的临床治疗，对于改善患者治疗疗效与临床预后具有十分重要的意义[12]。

乳腺癌细胞内及细胞间信号转导紊乱在肿瘤的发生和发展过程中起着重要作用[13]。Leptin可诱导乳腺癌MAPK/ERK和PI3K/Akt等信号通路相关蛋白激活，Leptin还可调节细胞内和细胞外基质相互作用，刺激血管生成，从而促进肿瘤进展。Leptin通过调控多种细胞因子下游表皮生长因子、血小板衍生生长因子、神经生长因子等下游蛋白，介导乳腺癌等肿瘤细胞转移及侵袭信号整合和传递。有研究显示，Leptin会诱导肿瘤细胞中MAPK/ERK信号转导，调控乳腺癌细胞的生长生存、骨架稳定、细胞形态、凋亡和侵袭等细胞行为[14]。在多种信号通路中，蛋白激酶(PKCs)是关键效应分子，与肿瘤的发生、发展、转移及预后关系密切，这也是近年临床研究的热点。PKCs常依照丝-苏氨酸激酶亚基结构不同分为3类，其中PKCε是新型的PKC种类，其分子活化不依赖于钙离子。研究显示，在乳腺癌细胞系中PKCε水平高于正常乳腺细胞系，提示PKCε在乳腺癌发生和调控过程中起到重要作用[15]。

本研究结果显示，观察组血清Leptin、PKCε水平均明显高于对照组，随着TNM分期升高、病灶区直径增大及腋窝淋巴结转移出现，患者血清Leptin、PKCε水平呈明显升高状态，且相关性分析结果显示，患者血清Leptin、PKCε水平与TNM分期、病灶区直径、腋窝淋巴结转移呈正相关。患者预后质量分析结果显示，死亡组血清Leptin、PKCε水平均高于存活组。进一步以Leptin、PKCε水平均值作为高水平和低水平的临界值，高水平Leptin共15例，高水平PKCε共13例，高水平Leptin和高水平PKCε患者生存率明显低于低水平Leptin和低水平PKCε。Logistics回归模型分析结果显示，乳腺癌患者血清高水平Leptin和高水平PKCε是影响患者预后质量的独立危险因素。本研究结果表明，随着患者血清Leptin、PKCε水平升高，乳腺癌患者病情恶化程度加重，进而导致患者预后质量降低。Leptin会促进肿瘤细胞异常生长，还可通过全身内分泌和自分泌作用于乳腺上皮细胞，促进脂肪组织中雌二醇的转化，导致乳腺上皮细胞出现异常增殖，在乳腺癌的发生和发展中起到十分重要的作用。与此同时，PKCε会促进形成mTORC2复合物，活化细胞内AKT，激活PI3K-AKT信号通路，促进肿瘤转移和增殖，导致患者预后质量不佳。

综上所述，乳腺癌患者血清Leptin、PKCε水平与TNM分期、病灶区直径、腋窝淋巴结转移呈正相关，且高水平Leptin和高水平PKCε是影响患者预后质量的独立危险因素。但本研究临床样本数较少，有待后续持续追踪和分析。