蛋白酪氨酸磷酸酶基因及细胞增殖指数Ki-67与输卵管癌的病理、预后等关系研究

杜玲玲

(锦州市中心医院 妇产科,辽宁 锦州121000)

输卵管癌是妇科较为常见的恶性肿瘤，在女性所有生殖道恶性肿瘤中的占比达0.14%-1.8%[1]。对输卵管癌进行快速、准确的诊断，是降低死亡率的关键。细胞增殖指数Ki-67为与细胞增殖相关的核抗原，与恶性肿瘤性疾病的进展存在十分紧密的关联性，并被逐步地应用于输卵管癌等恶性肿瘤的分子生物学研究之中，其中研究较多的基因为BRcA基因[2]、P21基因、以及核增殖抗原PCNA等[3]。目前，国内外关于蛋白酪氨酸磷酸酶基因(Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten，PTEN)及细胞增殖指数Ki-67与输卵管癌病理以及预后之间的相关性较少。本研究着重探讨了上述两种因子与输卵管癌病理及预后之间的关系，现报道如下。

1 研究材料及方法

1.1 研究材料选择2016年3月至2019年3月期间锦州市中心医院收治的43例输卵管癌患者作为研究对象，均经手术与术后病理确诊。本组患者中，年龄最小为29岁，最大为59岁，平均(42.29±10.21)岁；临床分期情况：Ⅰ-Ⅱ期19例，Ⅲ-Ⅳ期24例。本组入选患者中，均排除继发性恶性肿瘤的可能性，手术前均未接受放化疗、激素等方式治疗。输卵管癌临床分期方法采用国际妇产科联盟(International Union of Gynecology and Obstetrics，FIGO)制定的输卵管癌的临床分期方法[4]。

1.2 研究方法采用常规SP免疫组化法进行染色，试剂盒与试剂均购自于北京百奥莱博科技有限公司，DAB显色，每次染色均使用PBS代替一抗作为阴性对照。结果判定：PTEN：其主要分泌于胞浆，阳性结果以胞浆出现显著的棕黄色颗粒为标准，对10个棕黄色高倍视野随机进行计数，每个视野计数细胞量为100个，阳性细胞数量与染色强度作为综合判断。根据半定量积分方法，以阳性细胞比例进行计分：阳性细胞比例<5%、5%-25%、26%-50%以及>50%分别计分为0分、1分、2分及3分。然后以着色强度进行计分：无着色、浅棕色、棕黄色以及深棕黄色计分分别为0分、1分、2分及3分。阳性细胞比例计分与着色强度计分合计为1分、1-2分、3-4分、5-6分分别记为“-”、“+”、“++”、“+++”。Ki-67主要在细胞核中有显著性表达，阳性结果以细胞核出现显著的棕黄色颗粒为标准，若无染色颗粒，则为阴性。具体评分方法同PTEN相同，计分也相同。

1.3 观察指标包括：(1)分析Ki-67及PTEN与输卵管癌病理之间的关系；(2)分析Ki-67及PTEN与输卵管癌患者预后状况之间的关系。

1.4 统计学方法采用SPSS22.0软件对数据进行统计分析，Ki-67及PTEN与输卵管癌病理之间的关系相关数据以“n(%)”的形式表示；采用COX多元回归模型分析Ki-67及PTEN与输卵管癌患者预后状况之间的关系；P<0.05，表示差异具有显著的统计学意义。

2 结果

2.1 Ki-67及PTEN与输卵管癌病理之间的关系分析除了与是否绝经之间无显著的相关关系外(P>0.05)，Ki-67及PTEN与组织类型、临床分期、病理分级、残余病灶大小之间存在显著的相关关系(P均<0.05)，见表1。

表1 Ki-67及PTEN与输卵管癌病理之间的关系[%(n/N)]

2.2 Ki-67及PTEN与输卵管癌患者预后之间的相关关系分析基于寿命法，计算输卵管癌Ki-67及PTEN阳性组与阴性组生存率，经Wilcoxon比分经验法计算，2组生存率之间的差异均具有显著的统计学意义(P均<0.05)，见表2-3。

表2 PTEN与输卵管癌患者预后之间的相关关系[n(%)]

表3 Ki-67与输卵管癌患者预后之间的相关关系[n(%)]

将输卵管癌患者预后设为因变量X，自变量有6个，即：绝经(X1)、病理分级(X2)、临床分期(X3)、PTEN(X4)、Ki-67(X5)以及残余病灶(X6)，基于COX多元回归模型，分析影响输卵管癌患者预后的相关因素，结果显示：PTEN及Ki-67为影响输卵管癌患者预后状况的危险因素(P均<0.05)，见表4。

表4 基于多元COX回归模型分析影响输卵管癌患者预后状况的危险因素

3 讨论

3.1 PTEN与输卵管癌病理及预后状况之间的关系

本研究采用SP免疫组化法分析了PTEN阳性表达与输卵管癌各种病理学指标之间的相关关系，结果显示，PTEN与组织类型、临床分期、病理分级、残余病灶大小之间存在显著的相关关系(P均<0.05)。提示：输卵管癌患者机体中PTEN呈低表达。PTEN在调节细胞周期、细胞凋亡与黏附效应等生物学活性发挥重要作用，如PTEN活性失活或者发生突变，会导致PTEN所编码的产物生物学活性部分或者完全丧失，诱发恶性肿瘤的出现。有学者基于SP免疫组化法，分别对比了子宫内膜癌、喉癌、前列腺癌与相对应正常组织中的PTEN阳性表达率，结果显示：癌组织中PTEN阳性表达率显著低于正常组织[5-8]。在本研究中，PTEN在输卵管癌高分化组的阳性表达率高于低分化组，提示：PTEN阳性表达率随着输卵管癌分化程度的升高而升高。Ⅲ-Ⅳ期输卵管癌PTEN阳性表达率显著低于Ⅰ-Ⅱ期，此结果提示：输卵管癌临床分期越高，PTEN阳性表达水平呈降低的变化趋势。由此可以得知：PTEN的阳性表达与输卵管癌临床分期以及病理分级具有显著的相关关系。同时，本研究结果还显示：残余病灶大小在2 cm以上患者的PTEN阳性表达率要显著小于残余癌灶在2 cm以下的患者，提示：PTEN阳性表达率的下降可能与输卵管癌恶性程度呈现显著的相关关系。由于PTEN阳性表达率显著降低，在很大程度上削弱了其对整合蛋白所介导的跨膜信号转导通路的抑制效果，从而加快癌细胞的黏附、迁移以及进展等。

3.2 Ki-67与输卵管癌病理及预后状况之间的关系

Ki-67反映输卵管癌细胞的增殖状态十分敏感，具有高生物学标记效果，能够准确地反映输卵管癌细胞异常增生的活跃程度。Ito等研究结果显示，子宫内膜癌样腺癌Ki-67阳性表达率要明显高于子宫内膜非典型增生组织，Ki-67在子宫内膜癌癌前病变过程中就有所上升，随着疾病不断进展，Ki-67阳性表达率则随之而显著升高[9]。本研究结果与上述结论正吻合。

本研究结果显示，临床分期为Ⅲ-Ⅳ期输卵管癌Ki-67指数阳性表达率显著高于Ⅰ-Ⅱ期(P<0.05)，病理分期为G3期输卵管癌Ki-67指数阳性表达率显著高于G1-G2期(P<0.05)。此结果提示，输卵管癌恶性程度越高，Ki-67阳性表达率越高。由此可知，Ki-67可作为评判输卵管癌恶性程度的一个重要指标。判断输卵管癌患者预后状况的重要因素包括临床分期以及组织学分级等，临床分期越高、组织学分化越差，那么患者预后状况则越差，患者机体中Ki-67阳性表达率则越高。因此，Ki-67能够对输卵管癌患者预后状况进行有效判定，对临床治疗具有一定的指导价值。近来国内也有相似的研究报道[10]。同时，本研究结果还显示，残余病灶在2 cm以上的输卵管癌组织中的Ki-67阳性表达率显著高于残余病灶在2 cm以下的输卵管癌组织，提示Ki-67阳性表达率越高，输卵管癌恶性程度及进展程度越大。

本研究采用多元COX回归模型分析Ki-67及PTEN是否为影响输卵管癌患者预后状况的独立危险因素，结果显示，二者均为诱发输卵管癌患者预后状况的独立危险因素(P均<0.05)，与张颖等[11]、Rabczyniski J等[12]研究结果符合。PTEN表达其对应的相对危险度(Wald值)为0.090，此结果提示：输卵管癌患者PTEN表达阴性者发生死亡的概率为PTEN阳性患者的9.771倍，输卵管癌患者Ki-67阳性表达者死亡的概率为阴性表达的4.098倍。所以，PTEN阴性表达以及Ki-67阳性表达患者死亡概率较大。

综上所述，PTEN与Ki-67与输卵管癌组织类型、临床分期、病理分级、残余病灶大小存在显著的相关关系，PTEN表达越低、Ki-67表达越高，患者预后状况越差。