FK506结合蛋白在食管癌中的表达及意义

胡彦伟，焦智民，郭君兰，杨 柳，张春珍

食管癌是我国常见的恶性肿瘤，由于饮食多样化和社会平均年龄的增长，食管癌的患病率逐渐增多[1]。早期食管癌的预后较中晚期明显较好，但食管癌患者早期多无症状，确诊时常为中晚期，导致预后较差[1]。随着医学不断发展，越来越多肿瘤相关分子检测应用于临床，这些检测可为恶性肿瘤的诊治提供参考。因此，研究肿瘤相关分子与食管癌发生、发展的关联，可能为食管癌的诊治，尤其是早期诊断提供一定的帮助[2]。

FK506结合蛋白(FK506 binding proteins,FKBPs)，是高度保守的伴侣分子蛋白家族，通过激活组蛋白分子伴侶，调控转录因子及改变染色质结构影响基因表达、修复及复制等[3]。目前已发现至少15种该家族成员，其中FK506结合蛋白5(FK506 binding protein 5,FKBP5)，又称FKBP51(FK506 binding protein 51)是其成员之一[4]。有研究显示FKBP5与某些实体瘤的发生有关，其高表达可诱导正常细胞转化为肿瘤干细胞[5-6]。在人类肿瘤研究中，FKBP5表达升高或降低均有发现。目前越来越多研究显示FKBP5可能是肿瘤的一个新治疗靶点[7-9]。国内外最新的研究发现，FKBP5与食管腺癌患者的生存呈负相关，可作为影响预后的独立指标[10-11]。在国内，食管鳞癌、食管胃交界癌中FKBP5的表达等研究尚未见报道。因此作者设计了该课题，采用免疫组化检测食管鳞癌组织中FKBP5的表达，旨在研究FKBP5与食管癌的发生、预后的相关性。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取河南省安阳肿瘤医院2016年10月至2017年9月手术并确诊的食管癌患者49例(手术前均未行新辅助放化疗)，年龄48～76岁，中位年龄65岁，疾病病理分期采用国际TNM分期：Ⅰ+Ⅱ期33例(67.35%)，Ⅲ期16例(32.65%)；肿瘤直径<4 cm者35例(71.43%)，≥4 cm者14例(28.57%)；淋巴结转移阳性者20例(40.82%)，无淋巴结转移者29例(49.18%)。

1.2 免疫组化本课题所应用组织均为10%甲醛固定常温约24 h，由我院病理科医师石蜡包埋；将所有标本切成4 μm厚切片；在室温下用抗FKBP5 (Bio-Rad， USA)一抗孵育2 h。FKBP5免疫组化染色(食管癌及癌旁组织)均使用本院全自动免疫组化机(LEICA，Germany)。免疫组化结果由我院2名病理科医师进行阅片，判分标准：1+，1%～25%的阳性细胞；2+,25%～50%的阳性细胞；3+,50%～75%的阳性细胞；4+,≥75%阳性细胞。细胞着色：0分,阴性；1分,浅棕色；2分,棕色；3分,棕褐色。最终按总积分，即阳性率积分数和着色程度积分数相乘，分为高表达和低表达：低表达<5分，高表达≥5分[12]。见图1。

图1 免疫组化检测FKBP5在食管癌(A)和癌旁组织(B)中的表达(SP法，×200)

2 结果

2.1 食管癌组织及癌旁组织中FKBP5蛋白的表达FKBP5定位于细胞的胞核。49例食管癌组织中，高表达39例(79.59%)，低表达10例(20.41%)，而在食管癌癌旁组织中FKBP5高表达仅2例(4.08%) ，而FKBP5低表达47例( 95.92%)。FKBP5在食管癌组织、癌旁组织中的表达差异有统计学意义(χ2=57.4，P<0.05) 。

2.2 FKBP5表达与食管癌临床病理特征FKBP5蛋白在食管癌中的表达与食管癌患者的性别、年龄、食管鳞癌不同病理分类、肿瘤发生部位、肿瘤大小、淋巴结转移及神经浸润、pTNM分期等均未见明显相关性(P>0.005)，见表1。

1 食管癌中FKBP5水平与临床病理特征的关系 例(%)

2.3 FKBP5的表达与食管癌患者预后食管癌患者中FKBP5高表达组的平均生存期为30.4个月，低表达组为35.5个月，显示FKBP5高表达患者的3 a生存率低于低表达者，即FKBP5低表达组预后更好(χ2=16.62，P<0.05)。见图2。

图2 FKBP5不同表达水平食管癌患者3 a生存期的生存图

3 讨论

食管癌是我国常见的消化系统肿瘤之一，尤其是食管鳞癌在全球多见，我国高发地区为太行山周边的河南、山西及广东的部分地区等[13]。食管癌早期常无症状，诊断困难，确诊通常为中晚期。因此，食管癌患者的总体预后较差[14]。目前关于食管癌分子学和形态学的研究已开展很多，但是仍未找到可应用于临床的预测因子。如能发现明确的因子可预测及判断预后，对全民筛选，尤其是高危地区人群筛选，以及更好的个体化精准治疗将大为有益。FKBP5的羧基末端有3个肽重复(TPR)，其功能与热休克蛋白HSP90、HSP70及其他蛋白质，如类固醇激素受体之间的相互作用有关。孕激素受体和雄激素受体(AR)均属于类固醇激素受体[6]，在 FKBP5的作用下类固醇激素受体的转录活性降低，但不会降低雄激素受体的转录活性。FKBP5的异常表达在多种肿瘤中都有发现，高表达于黑色素瘤、肾癌、颅内肿瘤、淋巴瘤、头颈部鳞状细胞癌及前列腺癌等，但其在结肠癌和胰腺癌中的表达下调或不表达[7]。研究发现，在黑色素瘤中FKBP5与肿瘤的侵袭及转移灶大小相关[8]，在胶质瘤中FKBP5与胶质瘤的分级、总生存、预后存在一定相关性[13]。这些研究显示，FKBP5蛋白或成为新的肿瘤分子标记之一，它可能通过不同的信号转导途径调控转录、DNA修复等，从而导致肿瘤的发生。目前很多研究显示，FKBP5可能是一个新的肿瘤诊断、治疗靶点[9]。FKBP5的表达通常可调控AR信号功能，在前列腺癌研究中发现它优于其他AR目的基因[10]。国内外最新研究发现，AR和FKBP5与食管腺癌的生存呈负相关，可作为影响预后的独立指标[11]。但食管鳞癌、食管胃交界癌中FKBP5的表达情况国内外未见报道。

本研究采用免疫组织化学方法检测FKBP5蛋白在49例食管癌组织和癌旁组织中的表达，FKBP5蛋白在食管癌组织中的表达为79.59%，而在癌旁组织中为4%，两组之间差异有统计学意义(P<0.05)。揭示FKBP5表达或与食管癌的发生、发展有关。该结果与FKBP5在前列腺癌等的表达情况一致[7]。本研究中FKBP5表达与食管癌患者的性别、年龄大小、食管鳞癌不同类型、肿瘤发生部位、肿瘤大小、淋巴结转移、神经浸润及pTNM分期无显著相关性(P>0.05)，提示FKBP5可能在食管癌的发生、发展、转移及疾病预后中存在一定作用。且本研究相关结果提示，FKBP5低表达组食管癌患者的3 a生存率高于FKBP5高表达组，提示其或成为食管癌患者预后的新分子指标。因此，FKBP5的表达可能是食管癌诊治、预后检测的新的生物学指标之一。

本研究显示，在食管癌组织中FKBP5表达较高，提示FKBP5可能是食管癌发生、发展、预后检测的新指标。进一步研究FKBP5在食管癌基础及临床中的具体分子机制，将为食管癌的早期诊治(筛选)、预防及个体化精准治疗提供理论支持。