注射用头孢曲松钠含量测定探究与方法学验证

刘丽燕，黎舒萍(阳江市检测检验中心，广东 阳江 529500)

0 引言

文章采用HPLC法测定注射用头孢曲松钠中头孢曲松的含量, 准确可靠, 简便。同时通过HPLC色谱图, 可以判断注射用头孢曲松钠的质量控制水平, 为临床用药提供依据。

1 实验溶液配制

对照品以及供试品的配置按照《中国药典》2015年版二部配置[1]。

2 方法学验证

2.1 线性关系试验

分别精密吸取同一对照品溶液(见3.1对照品溶液的配置)配成10、20、50、100、200 µg/mL的系列溶液,分别精密量取0.5、1.0、2.5、5、10 mL置于10 mL容量瓶，加流动相稀释至刻度，摇匀滤过，取10 µL注入液相色谱仪中，测定峰面积。以对照品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。其中R=0.999 9(n=5)。结论：实验结果表明，头孢曲松在10～200 µg/mL浓度范围内具有良好的线性关系，其中回归方程如(1)所示及相关系数为R2=0.999 9：

2.2 精密度试验

取同一对照品溶液，(精密称取头孢曲松对照品4.034 mg置20 mL容量瓶中，加入流动相溶解并稀释至刻度，摇匀即得)，重复进样6次，每次10 µL，测定头孢曲松峰面积，测定结果RSD小于2.0%。

结论：把6次所测定的样品溶液峰面积计算出头孢曲松的相对标准偏差(RSD)为0.05%，小于2.0%,则精密度一般，符合中国药典规定。

2.3 重复性试验

取用0.9%氯化钠溶液溶解的供试品，照供试品溶液制备方法制备，取供试品注射用头孢曲松溶解于0.9%氯化钠，并定容至100 mL容量瓶，精密量取2 mL置100 mL容量瓶，加0.9%氯化钠溶剂稀释至刻度，摇匀滤过，制备 6份供试液，取10 µL注入液相色谱仪中，测定峰面积。结论：测得6组峰面积数据计算相对平均偏差(RSD)为0.11%，小于2.0%，则重复性良好。

2.4 加标回收率试验

取注射用头孢曲松钠供试品，用0.9%氯化钠溶剂配制的注射用头孢曲松钠，共六份分别配置成头孢噻10 mg/mL，精密量取1 mL再分别精密加入对照品溶液(溶剂为流动相溶液)10 mg置于100 mL的容量瓶，用0.9%氯化钠溶剂稀释至刻度，然后按正文含量测定方法供试品溶液制备项下的方法操作测定，记录色谱图，考察本方法的加样回收率。结论：测得6组数据计算平均回收率为109.3%, RSD=0.92%，109.3在98.0～120.0%范围内，RSD=0.92%≤2.0%；符合规定，本方法的加样回收率较高，且回收率不超过2.0%。

3 探究在不同温度下随着时间的变化对含量的影响

3.1 常温下随着时间的变化对含量的影响。

取供试品注射用头孢钠分别溶于5%葡萄糖氯化钠、0.9%氯化钠溶剂，并定容至100 mL容量瓶，精密量取1 mL置于10 mL容量瓶，分别加各溶剂稀释至刻度，作为供试品溶液，考察常温条件下放置0、4、8、24 h含量的变化，其中配制好的注射用头孢曲松钠注射液在常温条件下放置24 h的过程中没有发生颜色和沉淀的变化。其中大于10%的有效成分被分解，则认为该药品与输液不宜配伍。

以0 h的溶液含量为100%，计算公式为：

结论：根据上述数据结果可得(如表1所示)，在常温下随着时间的变化，供试品使用5%葡萄糖氯化钠、0.9%氯化钠配制的放置0～8 h对有效成分的含量影响不大，但是放置24 h后的有效成分的含量均大于10%的被分解；所以该药品与输液配伍不适合放置超过24 h。

表1 供试品在下常温随时间的变化

3.2 在0～8 ℃下随着时间的变化对含量的影响

取供试品注射用头孢曲松钠分别溶于5%葡萄糖氯化钠、0.9%氯化钠溶剂，并定容至100 mL容量瓶，精密量取1 mL置于10 mL容量瓶，分别加各溶剂稀释至刻度，作为供试品溶液，考察3 ℃条件下放置0、4、8、24 h含量的变化，其中配制好的注射用头孢噻肟钠舒巴坦钠注射液在3 ℃条件下放置24 h的过程中没有发生颜色和沉淀的变化。其中大于10%的有效成分被分解，则认为该药品与输液不宜配伍。

结论：根据上述数据结果可得(如表2所示)，供试液在0～8 ℃下放置随着时间的变化对含量的影响较小，其中5%葡萄糖氯化钠比0.9%氯化钠的稳定性高；所以注射用头孢曲松钠适合配伍后在低温(0～8 ℃)下放置24 h内对有效成分分解影响不大。

表2 供试品在0～8 ℃随时间的变化

4 在不同温度下随时间的变化对pH的影响

4.1 常温下随时间的变化对pH的影响

取供试品注射用头孢曲松钠分别溶于5%葡萄糖氯化钠、0.9%氯化钠溶剂，并定容至100 mL容量瓶，作为供试品溶液，考察常温条件下放置0、4、8、24 h后pH的变化。

结论：根据上述数据结果可得(如表3所示)，在常温下随着时间的变化对pH有影响，供试品使用5%葡萄糖氯化钠、0.9%氯化钠配制的pH值均逐渐升高。

表3 常温下随时间的变化对pH的影响

4.2 0～8 ℃下随时间的变化对pH的影响

取供试品注射用头孢曲松钠分别溶于5%葡萄糖氯化钠、0.9%氯化钠溶剂，并定容至100 mL容量瓶，作为供试品溶液，考察0～8 ℃条件下放置0、4、8、24 h pH的变化。

结论：根据上述检验结果可知(如表4所示)，在0～8 ℃下放置随着时间的变化对pH的影响较小，使用5%葡萄糖氯化钠、0.9%氯化钠溶剂配制的pH值都相对稳定，变化不大。

表4 0～8℃下随时间的变化对pH的影响

5 不同强度下振摇的变化对不溶性微粒的影响

取供试品注射用头孢曲松钠分别溶于5%葡萄糖氯化钠、0.9%氯化钠溶剂，用带针头注射器抽取适量各溶剂溶于供试品注射用头孢曲松钠，再注射进溶剂里，作为供试品溶液，在高强度和低强度的两个条件下分别振摇10 min，待测试，测试体积5 mL，考察在不同强度下振摇对不溶性微粒的变化。

结论：根据上述检验结果可知(如表5所示)，5%葡萄糖氯化钠、0.9%氯化钠两者在高强度下振摇的不溶性微粒都比低强度下振摇的≥10 µm的微粒量少，而两者≥25 µm的不溶性微粒都相对稳定甚至没有变化。

表5 不同强度下振摇的变化对不溶性微粒的影响

6 结语

数据显示, HPLC法能准确测定头孢曲松的含量，线性范围为10～200 µg/mL，R=0.999 9；平均回收率为109.3%，RSD(%)=0.92%；重复性RSD(%)=0.11%；精密度RSD(%)=0.05；系统适应性头孢曲松钠与头孢曲松反式异构体峰值分离度大于6.0。所以对注射用头孢曲松钠的测定表明本方法灵敏可靠，可以用于注射头孢曲松钠的含量测定。