尼麦角林双层渗透泵片体内药动学研究

王艳艳，许烁(.江苏联合职业技术学院连云港中医药分院，江苏 连云港 007； .沈阳药科大学药学院，辽宁 沈阳 006)

0 引言

尼麦角林是一种具有强的肾上腺素作用的酯类麦角生物碱，广泛应用于临床，能有效促进脑梗塞后、神经外科手术后神经功能的恢复；治疗由脑血管疾病引起的脑血管性痴呆、多发性脑梗死痴呆有较好的疗效[1]。尼麦角林原型药物本身的半衰期较短，患者需要多次服药，因此将其制备成控制释放12 h左右的渗透泵可以很好地缓慢恒速控制释放药物，一天服药一次，使得临床疗效达约24 h，提高患者服药的顺应性。

1 仪器与试药

UV-9100型紫外可见分光光度计(北京瑞利分析仪器公司)； TDP型单冲压片机(上海第一制药机械厂)；尼麦角林原料药(北京嘉瑞时代科技有限公司，批号：20100321)；聚氧乙烯(美国陶氏化学公司)；聚乙二醇(上海化学试剂采购供应站)；醋酸纤维素(上海醋酸纤维素厂)；甲醇为色谱纯，其它试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 尼麦角林双层渗透泵型控释片的制备

含药层：将药物、混悬剂等辅料分别过80目筛，称取处方量的各组分，以等量递加法共同过60目筛混匀，加无水乙醇制软材，以20目筛制粒，40 ℃下干燥6 h，以18目筛整粒，加入适量硬脂酸镁，混匀，备用。

助推层：助推剂、渗透压促进剂和氧化铁红分别过80目筛，称取处方量的各组分，以等量递加法共同过60目筛混匀，加无水乙醇制软材，以20目筛制粒，40 ℃下干燥6 h，以18目筛整粒，加入硬脂酸镁，混匀，备用。

包衣：将制好的片芯置于包衣锅中，包衣，包衣后于40 ℃干燥24 h，在含药层一侧表面打孔即得。

2.2 尼麦角林渗透泵片Beagle犬体内药动学研究[2-4]

由于尼麦角林药物进入到体内后迅速被酶解为MMDL(1,6-二甲基-8β-羟甲基-10α-甲氧基-尼麦角林)，MDL(6-二甲基-8β-羟甲基-10α-甲氧基-尼麦角林)等活性代谢产物，血浆中无法检测到原型药物，因此本文以其活性代谢产物之一的MMDL为检测指标。

2.2.1 溶液的配制

标准溶液：精密称取MMDL对照品1.0 mg，置于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解、定容、摇匀，配制成质量浓度为10 mg·L-1的储备液，至4 ℃冰箱保存备用。

内标溶液：精密称取非那西丁对照品2.0 mg，置于100 mL容量瓶中，用甲醇溶解、定容，配制成质量浓度为20 mg·L-1的储备液，至4 ℃冰箱保存备用。

2.2.2 色谱条件

色谱柱：Diamonsil C18(200 mm×4.6 mm，5 μm)；预处理柱：YGW C18；

流动相：甲醇-30 mmol/L磷酸二氢钠溶液=60∶40(v∶v)，0.2 mol·L-1磷酸调节pH至4.0；

检测波长：228 nm；柱温：30 ℃；流速：1.0 mL·min-1；进样量：20 μL。

2.2.3 血浆样品处理

精密吸取200 μL血浆加入到10 mL具塞尖底玻璃离心试管中，加入50 μL内标溶液，加入乙腈150 µL，涡旋3 min， 8 000 r·min-1离心15 min，取上清液进样。进样量20 μL，记录色谱图及峰面积，根据标准曲线方程计算Beagle犬体内MMDL血药浓度。

2.2.4 线性试验及方法学验证

精密量取空白狗血浆100 µL分别置于10 mL的具塞离心管中，精密加入MMDL标准溶液50 μL，再加入内标溶液50 μL(20 μg·L-1)，按血样处理方法项下操作，记录色谱图和峰面积。以MMDL血药浓度C为横坐标，药物和内标峰面积的比值A(AMMDL/A内标)为纵坐标，进行线性回归，标准曲线方程为：

根据标准曲线，MMDL的线性范围为1.0～100.0 µg·L-1，线性关系良好。本法精密度和回收率均符合要求。其中，低、中、高三种浓度血浆样品的日内RSD分别为11.68%、5.15%、7.81%；日间精密度分别为14.22%、6.82%、6.65%。低、中、高三种血浆浓度回收率分别为81.47%、81.23%、78.69%，RSD分别为7.1%、6.6%、6.0%.

2.2.5 给药方案和样品采集

6条健康Beagle犬随机分成2组，每组3条。实验前一天禁食12 h，给药2 h后统一进水，4 h后统一进食。自身对照，随机交叉口服同等剂量(30 mg)自制尼麦角林双层渗透泵控释片或市售尼麦角林普通片，给药间隔为一周。给药后普通片分 别 于0.25、0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、10、12、14、24 h共14个时间点取前肢静脉血3～4 mL，控释片分别于1、2、3、4、5、6、7、8、10、12、14、24、36 h共13个 时 间点取前肢静脉血约4 mL，并立即移入涂有肝素的试管中，于 1 200×g离心10 min，分离血浆，于-20 ℃冰箱保存，待分析。一周后交叉。

2.2.6 样品血药浓度-时间曲线的绘制

将6条Beagle犬口服自制控释片(Test)和市售普通片剂(Reference)的经时血药浓度平均值进行拟合，得两条药-时曲线(如图1所示)。

图1 Beagle犬口服两种尼麦角林制剂后MMDL药-时曲线 (n=6, Mean±S.D.)

2.2.7 药动学参数计算

采用DAS2.0软件，以非房室模型法分别处理尼麦角林普通片和尼麦角林双层渗透泵片的血药浓度-时间数据，求算药动学参数。血药达峰时间tmax和峰浓度Cmax均为实测值，AUC0-t，AUC0-∞等由软件计算给出。各主要药动学参数如表1所示。由表可知，受试制剂的Cmax明显降低，tmax明显延长，达到预期目的。

表1 主要药动学参数 (n= 6)

分别对受试片与参比片的药-时曲线下面积AUC0-t、Cmax进行对数转换，然后对ln(AUC)和ln(Cmax)进行三因素方差分析(周期间、制剂间和个体间)。根据tmax的分布特定，采用非参数检验法和秩和检验进行统计分析，结果表明，受试制剂与参比制剂相比 Cmax和tmax存在显著性差异，说明自制渗透泵片与市售片相比Cmax降低，具有良好的控释效果。

由 双单侧t检验结果 显示AUC0-t的tL＞t(1-0.05)、tH＞t(1-0.05)同时成立，受试制剂的AUC0-t的90%可信限落在参比制剂88.2%～102.6%范围内，说明受试制剂与参比制剂生物等效。

3 结语

文章以尼麦角林为模型药物，制备了具有良好零级释放特征的双层渗透泵型控释片，并进行了体内药物代谢动力学的研究。Beagle 犬体内药物代谢动力学研究表明，与参比试剂药动参数相比，尼麦角林双层渗透泵控释片的Cmax降低，tmax延长，具有良好的控释效果。体内外相关性研究表明，自制渗透泵片具有良好的体内外相关性。