C-Jun在乳腺癌组织中的表达及其临床意义的Meta分析*

宗 雪，居红格，2

(1.内蒙古科技大学包头医学院，内蒙古 包头 014060；2.内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院)

据世界卫生组织发布的关于癌症研究的数据显示[1]:在全球范围内仅2020年新增乳腺癌患者已经230万例，在全部新确诊癌症中占11.7 %。死亡病例69万例，是恶性肿瘤导致女性死亡的主要原因之一。乳腺癌已经对全球女性的生命健康造成严重威胁，也加重了社会负担。因此，降低乳腺癌死亡率，应采取乳腺癌筛查、早预防、早治疗等有效措施。当前，寻找特异靶点进行有效预防和治疗是研究的热点。转录因子c-Jun是核内原癌基因，属于AP-1家族成员，由单个外显子构成，由334个氨基酸构成的蛋白JUN，编码定位于细胞核，其分子量为39 kDa[2]。在AP-1的构成和细胞增殖，分化，凋亡和肿瘤转化过程中c-Jun都参与其中,并起到促进作用[3]。据研究[4-6]，c-Jun在结直肠癌、宫颈癌和胃癌中表达水平较高，且与癌细胞的分化程度相关，分化程度越差，蛋白表达水平越高。现有研究[1-12]，c-Jun在乳腺癌中的表达水平具有一定差异性。本研究采用荟萃分析方法探讨c-Jun乳腺癌与其临床特征的关系。

1 对象与方法

1.1选择研究文献标准 (1)纳入研究的文献是关于c-Jun与乳腺癌及其临床病理特征相关文献，并且已经在国内外公开发表；(2)文献中以病例对照的研究为主；(3)研究对象均为被确诊的乳腺癌患者；(4)患者术前未接受其他相关特殊治疗(放疗、化疗、靶向治疗等)；(5)c-Jun检测方法为免疫组化(IHC)，根据细胞数量或严重程度判断表达结果；(6)文献未提供研究结果的效应量，但可根据原始数据计算得出；(7)语言限于中、英文。

1.2文献排除标准 (1)文献中研究结果无法得出效应量；(2)文献属重复发表、记录的原始数据完整、样本量偏少、文献质量差；(3)摘要、论述、综述、等全文不够完整的文献；(4)样本量研究对象为非人类的文献。

1.3检索策略 利用计算机，通过中国知网、万方、维普等数据库、中国生物医学服务系统、PubMed网站、全球最权威的EMBASE数据库、科克伦图书馆、Web of Science以及中国临床试验注册中心进行检索。检索的文献截止时间到 2021-01，中文关键词包括乳腺癌、乳癌、c-Jun原癌基因、c-Jun蛋白；English keywords include breast cancer, breast cancer, c-Jun proto-oncogene, and c-Jun protein;检索采用主题词和自由词相结合的方式进行，文献语言仅限于中文和英文。

1.4文献筛选和资料提取 2名研究人员根据纳入和排除标准检索搜到的文献，并从最终纳入的文献中提取数据，包括文题、第一作者姓名、发表年份、总例数、c-Jun在乳腺癌组及对照组例数和表达水平等的情况，在不同时间提取2次文献资料，分别计算组合效应量，比较前后两次的结果有无差异，有差异时由第3名研究者再次校对。

1.5文献质量评价 根据纽塞尔渥太华量表(Newsell-Ottawa Scale，NOS)，研究者从人群选择研究、群体可比性和暴露因子测量三个方面对纳入的文献进行了8个项目的独立评分。0-5星代表低质量研究，6-9星代表高质量研究。

1.6统计学分析 使用RevMan5.3软件对纳入研究的结果进行统计分析。χ2检验用于检验纳入文献的异质性。如果研究结果之间不存在异质性或异质性较小(I2≤ 50 %或P>0.1)，使用固定效应模型进行分析；如果研究间存在显著异质性(I2> 50 %或P≤0.1)，则采用随机效应模型进行分析。Meta分析的检验水平α = 0.05，结果以森林图表示，RD值、OR值和相应的95 % CI用于评估c-Jun乳腺癌与其临床病理特征之间的关系。

2 结果

2.1文献检索结果 从各个数据库共检索3 311篇文献，经筛选，最终收录5篇。文献筛选过程及结果见图1所示。

图1 文献筛选流程图

2.2纳入文献的关键特征和质量评估 共收录5篇文章，其中英文2篇，中文3篇。纳入文献主要特征见表1，纳入NOS文献质量等级见表2。

表1 纳入研究基本特征

表2 NOS量表质量评价

2.3Meta 分析结果

2.3.1乳腺癌中c-Jun阳性率 5篇[8-12]文献报道了乳腺癌中c-Jun的表达情况，经过对337例异质性检验后，研究间异质性较小(I2=30 %，P=0.22)，因此固定效应模型的结果表明：c-Jun在乳腺癌的阳性率为82 %[RD=0.82，95 % CI(0.71，0.93)，P<0.00](图2)。

图2 单臂研究c-Jun在乳腺癌中的表达情况

2.3.2乳癌组和对照组中c-Jun表达情况 3篇文献[8-10]报道了乳腺癌组与对照组c-Jun表达情况，其中乳腺癌组222例，对照组97例。经异质性检验，研究间异质性较小(I2=41 %，P=0.19)，因此固定效应模型结果显示乳腺癌组c-Jun水平高于对照组，且差异具有统计学意义[OR=10.79, 95 % CI(5.85, 19.89),P<0.00](图3)。

图3 乳腺癌组和对照组中c-Jun表达情况

2.3.3c-Jun在无淋巴结转移的表达情况 有两篇文献[9,12]讨论了乳腺癌淋巴结转移情况，以及c-Jun表达，将已经发生淋巴结转移的78例患者分在一组，27例无淋巴结转移者为一组。由于研究中发现各组间异质性较小(I2=0 %，P=0.98)，因此，显示其结果采用固定效应模型。组间c-Jun的表达水平存在差异，淋巴结转移组高于无淋巴结转移组，具有统计学意义[OR=9.61，95 % CI(2.27，40.69)，P=0.002](图4)。

图4 c-Jun有无淋巴结转移的表达

2.3.4不同分化程度c-Jun表达情况 2篇[9-10]文献报道了乳腺癌不同分化程度c-Jun表达情况，其中Ⅰ和Ⅱ级72例，Ⅲ级67例。各研究间异质性较小(I2=0%，P=0.60)，故采用固定效应模型结果显示，两组间c-Jun表达差异无统计学意义[OR=0.99，95 % CI(0.36，2.77)，P=0.99](图5)。

图5 乳腺癌不同分级中c-Jun表达情况

2.4敏感性分析 采用随机和固定模型，OR值、95% CI和I2一致，敏感性分析采用Stata 14.0，结果见图4。分析纳入文献及其数据后，删除任何一篇文章对结果影响不大，说明meta分析的结果是稳定的(图6)。

图6 敏感性分析

3 讨论

乳腺癌[12]是一种高度异质性疾病，具有不同的组织学类型和不同的生物学临床特征。Biro等人[13]根据肿瘤表面分子的表达将乳腺癌分为四种不同的分子亚型：luminal A、luminal B、HER2和base-like型。其中，三阴型恶性程度最高，侵袭性强，预后差。目前治疗以手术以及放化疗为主，没有特异性治疗。已有研究证明，乳腺癌致癌驱动分子可以作为乳腺癌治疗靶点。翟婧彤等[14]发现，多腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂被证实对PALB2胚系突变的三阴性乳腺癌患者有一定的疗效。Luo等[15]发现，CDK6可以作为肿瘤抗微环境的靶标，其表达与三阴性乳腺癌患者组织中的血管生成和纤维化肿瘤微环境呈正相关。乳腺癌的发生和发展是一个复杂的过程，涉及许多解释乳腺癌发生机制的分子，寻找更好特异性靶点仍是研究者关注的热点。

c-Jun[16-17]最早在家禽中发现，与禽肉瘤逆转录病毒 ASV17 基因同源，是第一个发现的致癌转录因子。有研究发现[18]，生理功能的c-Jun可以促进胚胎肝脏发育以及肝脏和皮肤再生。病理功能的c-Jun参与致癌基因诱导的肝脏和皮肤肿瘤的形成。突变的致癌基因激活下游的丝裂原激活蛋白激酶(MAPKs)信号，然后MAPK促进c-Jun丝氨酸或苏氨酸残基的磷酸化和活化，形成同源二聚体c-Jun-c-Jun或异源c-Jun-c-fos和c-Jun-ATF[17-21]。这些二聚体与cAMP反应元件(CRE)DNA序列TGACGTCA结合，直接驱动转录激活细胞周期蛋白D1和表皮生长因子，在细胞外参与细胞周期进程和细胞增殖，进行信号的转录应答[19-20]。

现有研究发现，c-Jun在某些肿瘤内呈高表达水平。Oya等[21]发现，c-Jun高表达与获得性囊性肾脏疾病和肾细胞癌非典型细胞异常增殖有关，强调了c-Jun活化在肾细胞癌早期癌变中的作用。Liu[22]等发现，c-Jun在卵巢癌的表达水平明显高于癌旁，强调了其过表达抑制了miR-6089的抑癌作用并增强了肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和增殖。

在目前关于乳腺癌组织中c-Jun表达与临床病理特征关系的研究，结果存在分歧。朱凤雪[23]通过印迹蛋白研究发现，c-Jun蛋白在乳腺癌患者中的表达水平低于正常乳腺组织，在晚期TNM III期乳腺癌中其表达水平低于TNM I期。而在程瑞雪、刘晓丽、Tiniakos等[8-10]研究发现，在乳腺癌中c-Jun的蛋白表达水平，远远高于肿瘤旁组织。本研究结果提示c-Jun在乳腺癌组中表达率高于对照组，差异有统计学意义(P<0.00)。刘晓丽、Langer等[9,12]经过对淋巴结转移的研究，认为c-Jun在淋巴结转移乳腺癌中表达有一定差异性。本次研究结果，c-Jun在淋巴结转移组中，呈高表达，与淋巴结未转移组的表达存在差异，有统计学意义(P=0.002)。在研究分化程度时，Langer等[10]认为c-Jun在低分化组中高表达。而刘晓丽等[9]认为，它在高分化组中高表达，本研究结果认为，c-Jun在这两组的表达分化差异无统计学意义(P=0.99)。

万芳[24]通过印迹蛋白发现，在乳腺癌细胞中，c-Jun呈高表达，且c-Jun表达水平在雌激素受体阴性与阳性的乳腺癌细胞中有所不同，阴性高于阳性。赵焕[25]研究发现，c-Jun的表达情况随乳腺导管内增生性病变加重而增加，在浸润性导管癌中显著增加。进一步证实高水平表达的c-Jun促进乳腺癌的发生，且与病变程度相关。

目前c-Jun在乳腺癌中治疗的研究表明[26-28]，作为立早癌基因，c-Jun 与乳腺癌增殖和血管生成存在一定关系，c-Jun 的过表达导致ER +乳腺癌细胞对他莫昔芬的敏感性降低。因此，阻止肿瘤血管生成，c-Jun靶向治疗是一种有效的新方法。有关乳腺癌肺转移的研究发现[29]，帕那替尼(一种酪氨酸激酶抑制剂)可通过ERK/c-Jun信号通路抑乳腺癌肺转移(BCLM)相关基因的表达。c-Jun也是BCLM的关键因素和潜在药物靶标。

综上所述，本组meta分析结果表明c-Jun高表达与乳腺癌转移相关，c-Jun在乳腺癌进展中起重要作用，提示c-Jun有可能作为乳腺癌潜在治疗靶标。

这项研究在某些方面仍然存在缺陷：(1)通过广泛的数据库搜索检索到了5篇文献，病例总数少，研究样本少，结果可能受到一定影响；(2)部分文献不能完全检索数据，因此无法进行完整全面分析；(3)c-Jun的判读标准不同，结果的统计会有一定差异，还需要更大的样本和更好的实验研究来验证结果。