高血压肾病早期血清Cys C、β2-MG和尿NAG、RBP水平检测及临床意义

张志斌，温庆辉，张锡波

东莞市人民医院检验科，广东 东莞523000

高血压为危害人类健康的主要心血管疾病之一，病情进展缓慢，可诱导多器官功能损伤，其中体循环动脉压持续升高为主要表现，常诱导肾脏组织受损，进一步加重血压升高，由此反复造成恶性循环[1]。研究表明，高血压肾损伤早期病情隐匿，血尿常规基本正常，随着病情加重，肾功能损伤逐渐加重，最终导致肾功能衰竭，增加临床治疗难度且效果差，远期生存率低，因此早诊断早治疗是逆转患者远期生存率的当务之急[2]。传统的血肌酐、尿素氮、肾小球率过滤对早期肾功能损害的敏感性并不理想，因此找到其他对高血压早期肾损害的敏感性指标迫在眉睫[3]。研究指出，诱导高血压肾损伤的关键因素为肾小管的作用机制紊乱，尿β2-微球蛋白(β2-MG)和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(尿NAG)、尿视黄醇结合蛋白(RBP)均为肾脏损伤的标志物，将其用于判定高血压患者的肾损伤敏感性较高[4]。近年来有研究指出，血清胱抑素C(CysC)亦是反映肾小球滤过功能的敏感性指标，其水平在诊断及判定疾病病情严重程度中发挥不可替代的作用[5]。鉴于此，本研究通过检测早期高血压肾病患者血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP 水平，分析其在高血压肾病中的诊断价值，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2019 年11 月至2020 年10月东莞市人民医院收治的70 例高血压患者作为研究对象，其中高血压肾病40 例(HRD 组)，单纯高血压30 例(HBP 组)。纳入标准：①HRD 组患者均符合世界卫生组织/国际高血压联盟(WHO/ISH)指南中关于疾病诊断及分型标准[6]；②患者积极配合研究；③患者知情本研究并签署自愿参与书。排除标准：①合并糖尿病、泌尿系统疾病者；②合并恶性肿瘤疾病或风湿病者；③精神异常，无法正常沟通交流者；④合并主要脏器功能(肝、肾、心)严重障碍者；⑤合并高血脂、缺血性心脏病或继发性高血压者；⑥合并免疫功能、凝血功能异常者。HRD 组根据慢性肾病分期分为Ⅰ～Ⅱ期23 例[GFR≥60 mL/min·(173 m2)]，Ⅲ～Ⅴ期17例[GFR＜60 mL/min·(173 m2)]。HRD组患者中男性21 例，女性19 例；年龄45～65 岁，平均(54.11±3.29)岁；病程8～12年，平均(9.32±0.67)年。HBP组患者中男性19 例，女性11 例；年龄45～64 岁，平均(53.98±3.09)岁；病程8～11 年，平均(9.41±0.63)年。选择同期在我院体检的健康者30例作为对照组，对照组中男性18例，女性12 例；年龄45～66 岁，平均(54.98±3.29)岁。三组受检者的性别、年龄比较差异均无统计学意义(P＞0.05)。本研究经我院伦理委员会批准。

1.2 检测方法 (1)采集高血压患者及健康体检者3 mL 静脉血，低温静置10 min，以3 000 r/min 的速度离心处理(r=3 cm)5 min，分离血清保存待测，采用AU5811 生化分析仪(生产厂家：武汉盛隆生物科技公司)测定血清中CysC水平，步骤按说明书进行。(2)采集受检者晨起中段尿约10 mL，同样以3 000 r/min 的速度离心(r=3 cm)5 min，分离血清，取上清液，采用散射免疫比浊法(生产厂家：广州星马科技公司)测定β2-MG、尿NAG、RBP水平，实验步骤以说明书为准。

1.3 观察指标 (1)比较三组受检者的CysC、β2-MG、尿NAG、RBP 水平。(2)比较不同临床分期患者的CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平。(3)比较CysC、β2-MG、尿NAG、RBP 各指标单独与联合检测诊断早期高血压肾病的灵敏度、特异性。(4)分析高血压肾病患者血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平的相关性。

1.4 统计学方法 应用SPSS21.0 统计软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差(x-±s)表示，两两比较采用t检验，多组比较采用方差分析，计数资料比较采用χ2检验，采用Pearson法对各项检测指标进行相关性分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组受检者的血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP 水平比较 HRD 组患者的血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP 水平明显高于HBP 组和对照组，HBP 组患者的血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP 水平明显高于对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 三组受检者的血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平比较()

表1 三组受检者的血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平比较()

注：与HBP组比较，aP＜0.05；与HRD组比较，bP＜0.05。

2.2 不同临床分期患者的CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平比较 Ⅲ～Ⅴ期患者的血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平明显高于Ⅰ～Ⅱ期患者，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表2。

表2 不同临床分期患者的血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平比较()

表2 不同临床分期患者的血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平比较()

2.3 各项指标单独与联合检测诊断早期高血压肾病的灵敏度、特异性比较 CysC、β2-MG、尿NAG、RBP 检测的灵敏度、特异性均低于4 项指标联合检测的灵敏度、特异性，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表3。

表3 各项指标单独与联合检测诊断早期高血压肾病的灵敏度、特异性比较

2.4 高血压肾病患者血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP 水平的相关性 经Pearson 法分析结果显示，高血压肾病患者血清CysC与尿NAG、RBP表达水平呈正相关(r=0.981、0.671，P＜0.05)，而β2-MG 与尿NAG、RBP也呈正相关(r=0.617、0.751，P＜0.05)。

3 讨论

高血压是临床多发疾病，其患病率在我国最高，伴随病情进展可累及多器官损伤，其中高血压肾损伤是最常见的并发症之一，致残率、死亡率高[7]。数据显示，持续高血压可引起肾小球高灌注，进而诱导肾小球动脉硬化，出现肾损伤，进一步降低患者生活质量，因此高血压引起的肾病已成为除糖尿病外造成终末期肾病的第二大原因[8]。因肾脏的代偿功能较强，加之多数患者在无明显特异性表现，肾功能检查也无异常，但其实际已经受损，可见其早期病情具有一定隐匿性、可逆性[9]。尿素氮、肌酐、尿微量蛋白是评价肾功能是否受损的常用指标，但上述指标受多种因素影响(如：食物、感染)其敏感性、特异性，当肾功能受损＞50%则表现出异常[10]。故需寻找一种简易、敏感且可显示早期肾损伤的指标来提高高血压肾损伤的早期诊断。

CysC是反映肾小球滤过功能的内源性标志物，近年来在临床运用较广泛。资料表明，CysC为低分子量蛋白质，主要由120个氨基酸残基组成，是蛋白质超大家族的主要成员之一，其在各机体组织中的所有核细胞红均有表达，且在机体组织中的产生率相对比较恒定，可在循环中经肾小球自由过滤，而肾脏组织则是清除循环中CysC 的唯一器官，被认为是决定肾小球滤过率的典型内源性标志物[11-12]。NAG 属于高分子糖蛋白酸性水解酶，集中来源于肾小管上皮细胞之中，当肾小管遭受损伤时，且水平表达异常升高，故通过监测其水平变化可反映肾小管受损严重程度，但需要注意的是NAG 在过滤中不能通过肾小球滤过膜[13]。β2-MG 为低分子血清蛋白，其分子质量为11.8 kD，虽然其在肾小球滤过膜中较易通过，但几乎全被曲小管细胞重新吸收和讲解，故其在尿液中的含量极低。资料表明，β2-MG在早期肾小管间质性疾病中的敏感性较高，当肾小球和肾小管的早期屏障功能受损或出现障碍时，其表达水平会在短时间内异常升高[14]。RBP 为临床常见的经肝脏分泌蛋白，其分子量为21 kD，同时具有降低RBP肾内分级、肾小球滤过的作用[15]。在近年来的研究中发现，RBP 为脂肪细胞分泌而来，属于新的脂肪细胞因子，被认为是与胰岛素抵抗正相关的脂肪因子[16]。MENG 等[17]研究指出，RBP 在肥胖、近端肾小管上皮细胞被分解代谢，且不能被肾小球过滤，仅有1/10的RBP经肾小球滤出后会被肾小管重吸收，在正常人群中含量极低，并且在酸性尿中十分稳定，被认为是反映曲小管损伤的敏感性指标之一。

本研究重点分析了上述四项指标在高血压肾病中的表达水平及意义。结果表明，HRD组患者的CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平明显高于HBP组和对照组，表明高血压肾病患者的CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平呈异常增高状态。本研究进一步分析了不同临床分期高血压肾病患者的血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平，结果表明Ⅰ～Ⅱ期患者的CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平明显高于Ⅲ～Ⅴ期患者，提示随着患者病情加重，上述指标水平逐渐升高。经Pearson法进行相关性分析显示，高血压肾病患者血清CysC 与尿NAG、RBP表达水平呈正相关(r=0.981、0.671，P＜0.05)，而β2-MG 与尿NAG、RBP 也呈正相关(r=0.617、0.751，P＜0.05)，即浓度越高肾损伤越严重。LIPKOWITZ等[18]研究指出，CysC、β2-MG、尿NAG、RBP 各项指标单独用于诊断高血压早期肾损伤，易受胆红素、尿pH值等因素影响，导致其敏感性、特异性较低。鉴于此，本次研究分析了上述四项指标联合检测的敏感性、特异性，结果表明4 项指标联合检测的敏感度为96.77%、特异性为83.33%，均分别高于上述四项指标的单独检测的敏感度、特异性，可见此四项联合检测更有利于高血压肾损伤的临床诊断、治疗。

综上所述，CysC、β2-MG、尿NAG、RBP 可作为高血压肾病早期损伤的标志物，其浓度变化与病情严重呈正相关，四项指标联合检测更有助于提高高血压肾病早期损伤的治疗及治疗。