肠易激综合征患者血清PRDX1、IL－17A表达与肠道症状的相关性

雍海江，袁春辉，苏国忠

吴忠市人民医院 1消化内科，2急诊医学科（宁夏吴忠751100）

肠易激综合征（irritable bowel syndrome，IBS）是临床常见的一种胃肠道功能性疾病，以腹胀、腹痛、排便习惯／大便性状改变为主要临床表现，其病程较长，可间歇性或持续性发作，直接影响患者生活质量［1］。目前，IBS发病机制尚未完全阐明，但专家学者认为胃肠道动力紊乱、炎症反应、氧化应激与IBS发生发展关系密切［2］。过氧化物氧化还原蛋白1（peroxiredoxin 1，PRDX1）属于过氧化物氧化还原酶蛋白家族成员之一，其在IBS中表达水平明显上调，其可能参与并影响IBS疾病发展进程，PRDX1有望成为诊治IBS的炎症标志物［3］。此外，白细胞介素－17A（interleukin－17A，IL－17A）是IL－17成员之一，Amani等［4］研究发现IL－17在IBS患者中呈高表达，经维生素D治疗后，IL－17水平明显降低，IL－17可能在IBS发病过程中发挥重要调节作用。但PRDX1、IL－17A在IBS患者血清中的表达水平与肠道症状的关系研究较少。基于此，本研究通过检查PRDX1、IL－17A在IBS患者血清中的水平，分析两者与IBS症状严重程度量表（IBS symptom severity scale，IBS－SSS）相关性，以期为早期诊治IBS提供临床参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年1月至2020年12月本院诊治的IBS患者116例为IBS组，体质指数（bodymass index，BMI）为18.74～26.76 kg／m2；并以同时间段内本院健康查体者120例为对照组，BMI为18.62～26.44 kg／m2。与对照组相比，IBS组患者胃肠道感染史比例明显升高（P＜0.05），男女比例、年龄、BMI、吸烟史、酗酒史比例差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 两组一般资料比较 例

诊断标准：参考罗马Ⅲ诊断标准［5］判定IBS。纳入标准：（1）所有患者符合IBS诊断标准；（2）所有患者临床资料完整；（3）所有患者自愿参与本项研究者。排除标准：（1）合并消化系统溃疡／感染、炎症性肠病、糖尿病内脏神经病变、恶性肿瘤、肝胆胰疾病者；（2）合并甲状腺功能性疾病者；（3）合并精神病者；（4）患有慢性疾病史需要长期接受药物治疗者；（5）近3个月内行腹腔／肠道手术者。

1.2 试剂与仪器 人PRDX1酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）试剂盒（货号：CSB－EL018653HU－1）购自上海恒斐生物科技有限公司；人IL－17A ELISA试剂盒（货号：PK－EL－62716）购自江苏普诺生生物科技有限公司。人白细胞介素－10（interleukin－10，IL－10）ELISA试剂盒（货号：QN－PS0066）购自上海乔羽生物科技有限公司。紫外分光光度计（型号：DU－730）购自上海普迪生物技术有限公司。

1.3 方法

1.3.1 样本收集 收集所有研究对象清晨空腹肘静脉血4～6 mL，自然凝集，3 550×g离心10 min，收集上清液，分装，保存于－80℃冰箱中，待检。

1.3.2 ELISA法检测血清PRDX1、IL－17A、IL－10水平 取出适量冻存血清样本，解冻，严格按照PRDX1、IL－17A、IL－10 ELISA试剂盒说明书检测两组受试者血清PRDX1、IL－17A、IL－10水平。

1.3.3 检测血清MDA水平 取出适量冻存血清样本，解冻，采用硫代巴比妥酸法测定丙二醛（malondialdehyde，MDA）水平。

1.3.4 IBS－SSS评分 IBS－SSS考察患者排便情况、腹痛频率、腹胀程度、腹痛程度、疾病对生活的影响5个方面，总分为0～500分，分值越大表示肠道症状越重［6］。

1.4 统计学方法 利用SPSS 24.0统计软件，符合正态分布的计量数据采用均数±标准差（±s）表示，组间比较行t检验；计数资料以“例”表示，组间比较采用χ2检验；采用Pearson法分析IBS患者血清PRDX1、IL－17A水平、IBS－SSS评分与IL－10、MDA关系及PRDX1、IL－17A表达水平与IBS－SSS评分相关性；以logistic回归分析IBS发生的影响因素。以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清PRDX1、IL－17A、IL－10、MDA、IBSSSS评分表达水平比较 与对照组相比，IBS组患者血清PRDX1、IL－17A、MDA水平明显升高（P＜0.05），IL－10水平明显降低（P＜0.05）。IBS组患者IIBS－SSS评分为（345.36±112.58）分。见表2。

表2 两组血清PRDX1、IL－17A、IBS－SSS、IL－10、MDA评分水平比较 ±s

表2 两组血清PRDX1、IL－17A、IBS－SSS、IL－10、MDA评分水平比较 ±s

项目 例数 PRDX1（ng／mL） IL－17A（ng／L） IBS－SSS评分（分） IL－10（ng／L） MDA（nmol／L）对照组 120 3.43±1.02 36.07±8.31 － 3.58±1.06 1.76±0.51 IBS组 116 6.02±1.94 58.48±11.27 345.36±112.58 2.85±0.72 4.49±1.25 t值 12.897 17.427 － 6.168 22.099 P值＜0.001 ＜0.001 － ＜0.001 ＜0.001

2.2 IBS患者血清PRDX1、IL－17A水平、IBSSSS评分与IL－10、MDA相关性 Pearson法分析显示，IBS患者血清IL－17A水平、IBS－SSS评分与IL－10呈负相关（r＝－0.367、－0.536，P＜0.05）；IBS患者血清PRDX1水平、IBS－SSS评分与MDA呈正相关（r＝0.374、0.503，P＜0.05）。见表3。

表3 IBS患者血清PRDX1、IL－17A水平、IBS－SSS评分与 IL－10、MDA的关系

2.3 IBS患者血清PRDX1、IL－17A表达水平与IBS－SSS评分相关性 Pearson法分析显示，IBS患者血清PRDX1、IL－17A表达水平与IBS－SSS评分均呈正相关（r＝0.562、0.584，P均＜0.05）。见图1、2。

图1 IBS患者血清PRDX1水平与IBS－SSS评分的关系

2.4 影响IBS的logistic回归分析 以胃肠道感染史、血清PRDX1、IL－17A水平、IBS－SSS评分、IL－10、MDA为自变量，以IBS是否发生为因变量，行logistic回归分析，结果显示PRDX1、IL－17A、IBS－SSS评分、MDA为IBS发生的危险因素（P均＜0.05）。见表4。

图2 IBS患者血清IL－17A水平与IBS－SSS评分的关系

表4 logistic回归分析IBS发生的影响因素

3 讨论

IBS虽是良性非器质性疾病，但发病率较高，对患者家庭和社会造成经济负担［7］。因此，寻找IBS发病的有关因素，及时调控相关指标，对提高患者生活质量具有积极意义。

PRDX1是一种过氧化物还原酶，在活性氧清除、细胞增殖、分化、凋亡及炎症反应过程中发挥重要调节作用［8］。有关研究表明，PRDX1在慢性炎症导致的结直肠癌中表达水平明显上调，其可能调节肿瘤坏死因子－α、白细胞介素－6等促炎因子及部分活化的核因子－κBp65表达水平，进而在结直肠癌发生发展中发挥促炎作用，PRDX1具有作为诊治结直肠癌的潜在靶标［9］。既往研究显示，PRDX1在需要体外膜氧合的心源性休克患者中表达失调，与炎性细胞因子具有一定相关性，PRDX1在炎症反应中起关键调节作用，其可能与全身性炎症反应综合征发生发展及不良预后有关，PRDX1有可能是治疗缺血／再灌注损伤的生物学指标［10］。以上研究表明，异常表达的PRDX1与炎症类疾病密切相关。此外，Horie等［11］利用蛋白质组学及免疫组化法分析PRDX1在活动性和非活动性溃疡性结肠炎患者中的表达情况，结果显示PRDX1在活动性溃疡性结肠炎患者黏膜中的表达水平较高，且PRDX1表达水平随着溃疡性结肠炎患者上皮细胞炎症程度增加而升高，PRDX1可用于评估溃疡性结肠炎病情及其相关肿瘤发生的严重性。本研究中IBS组患者血清PRDX1水平明显高于对照组，提示PRDX1可能参与并影响IBS发病过程。推测PRDX1可能通过调节炎症因子表达，从而在IBS的炎症反应过程中起促进作用［12］。

IL－17A主要是由Th17细胞分泌的特异性促炎性细胞因子，其可促使炎症细胞释放细胞因子、趋化因子及抗菌肽，促进中性粒细胞聚集及增殖，连接适应性免疫及固有免疫，在自身免疫性、肿瘤等疾病进展及宿主防御中发挥关键作用［13］。有关研究显示，双重氧化酶2（dual oxidase 2，DUOX2）诱导产生的H2O2在慢性炎症及宿主防御中具有关键作用，IL－17A与白细胞介素－4结合，协同增加DUOX2在结肠癌细胞中的表达，从而可能在胃肠道恶性肿瘤炎症反应及DNA损伤中起一定作用［14］。既往研究显示，幽门螺杆菌是消化性溃疡疾病及慢性活动性胃炎的主要致病因素，IL－17A表达上调与幽门螺杆菌感染有关，IL－17A诱导的炎症反应可能受miR－146a调控，IL－17A有望成为胃炎诊治的生物学靶标［15］。以上研究证实，IL－17A表达失调与胃肠道炎症性疾病相关。此外，Busch等［16］通过采集并分析溃疡性结肠炎患儿回肠结肠镜检的标本，结果显示，IL－17A在溃疡性结肠炎患儿中呈过表达，其可能参与并影响炎症性肠病发病进程，IL－17A可能具有诊治炎症性肠病的潜在价值。本研究中IBS组患者血清水平明显高于对照组，提示IL－17A可能在IBS病理过程中发挥一定调节作用。究其可能原因，一方面，IL－17A作为IL－17家族代表性成员，其可能通过刺激上皮细胞、巨噬细胞、内皮细胞等分泌细胞趋化因子及多种炎性介质，募集中性粒细胞从而诱导炎症发生；另一方面，由于肠道通透性增加或肠道菌群紊乱，肠道细菌成分通过激活肠粘膜抗原呈递树突细胞，促使IL－17A分泌增加，进而引起针对肠道菌群的免疫应答［17］。

IL－10主要是由Th2细胞产生的抗炎细胞因子，在肠道免疫及炎症反应中具有重要调节作用；此外，MDA可间接反映组织受氧自由基损伤程度，其可能在IBS氧化应激、自由基损伤过程中发挥重要作用［4］。本研究中IBS组患者血清IL－10水平明显低于对照组，MDA水平明显高于对照组，与Amani等［4］研究趋势类似，提示异常水平的IL－10、MDA可能与IBS发病进展有关。推测IL－10可能通过抑制巨噬细胞黏附、激活，抑制炎症细胞因子的产生和释放，进而在IBS的炎症反应过程中起抑制作用；MDA可能通过影响氧化反应，引起组织自由基损伤，从而在IBS发病过程中起作用。

本研究对所有IBS患者肠道症状进行评估，结果显示，IBS－SSS评分为（345.36±112.58）分，且与血清PRDX1、IL－17A表达水平呈正相关，提示血清PRDX1、IL－17A可能与肠道症状相互影响，从而协同影响IBS发生发展。进一步研究显示，IBS患者血清IL－17A水平、IBS－SSS评分与IL－10呈负相关，PRDX1水平、IBS－SSS评分与MDA呈正相关，提示IL－17A与IL－10，PRDX1与MDA可能发生相互作用，并与肠道症共同影响IBS进程。此外，本研究显示PRDX1、IL－17A、MDA水平、IBS－SSS评分均为IBS发生的危险因素，提示PRDX1、IL－17A、MDA水平升高，IBS－SSS评分增加，均会增加IBS患病风险，及时监控上述指标有助于早期评估、治疗IBS。

综上所述，PRDX1、IL－17A在IBS患者血清中呈过表达，两者与肠道症状具有一定相关性，可能与IL－10、MDA、肠道症状相互作用，进而影响IBS发展过程。但本研究样本较少，会引起研究结果出现一定偏颇，后续研究将增加样本量进行深入探究。