张 莉,柳 芹,张金林
(1.武汉华扬动物保健集团,湖北武汉 430000;2.华中农业大学,湖北武汉 430000)
抗菌肽是一种具有广谱抗细菌、病毒、真菌、寄生虫和肿瘤细胞的多肽,在生物体内天然免疫中发挥重大作用(董丽娜等,2017)。近些年来,由于水产养殖业的规模不断增大,抗生素的滥用导致动物的耐药性增加,进而造成鱼类大量死亡,给养殖户带来重大的经济损失(陈奕彬等,2015)。抗菌肽具有分子质量小、环保、稳定性强、耐药性强和无残留等特点,在动物免疫及生长发育中起重要作用。因此,抗菌肽可作为动物饲料添加剂的理想原料之一(董晓庆等,2017)。
目前,研究结果表明,饲料中添加抗菌肽能显著提高鱼类生长性能,增强机体免疫功能(丁修良等,2018)。尽管抗菌肽作为饲料添加剂在鱼类的应用比较广泛,但有关抗菌肽作为饲料添加剂在加州鲈鱼的研究报道较少;本文主要以加州鲈鱼为研究对象,分析饲料抗菌肽的不同添加量对加州鲈鱼生长性能的影响,为抗菌肽在加州鲈鱼养殖基础饲料的使用量提供理论依据。
1.1 试验材料 加州鲈鱼,抗菌肽,饲料原料和抗菌肽购买于通威饲料有限公司,饲料原料都是来自滨州信通饲料有限公司。
1.2 饲料试验配方设计 饲料原料均是以玉米蛋白粉、鱼粉和豆粕为主,其饲料添加剂为抗菌肽,所有原料都粉碎,混合水后制成2 mm的颗粒料,将饲料进行烘干处理,放入冰箱备用。试验设计为5组,分别为对照组、抗菌肽试验1组、抗菌肽试验2组、抗菌肽试验3组、抗菌肽试验4组;添加量如表1所示。
表1 饲料添加剂试验设计 mg/kg
表2 饲料原料成分
1.3 饲养管理 本次试验加州鲈鱼苗来自教学试验养殖基地,养殖试验在学校试验基地中进行试验。试验将健康无病的加州鲈鱼放入水箱内暂养2周,再放入养殖试验基地的水箱内,水箱水温保持在20℃,水深保持30~45 cm。加州鲈鱼分为5组,每组设置3组平行,每组平行放置48尾鱼苗。试验期间,固定加州鲈鱼每次投喂量,每天上午、中午和下午进行投喂,根据天气、水温、摄食强度等及时调整饵料,定期巡查,每天对饲养水质进行监测,包括溶氧、氨氮、pH及水温,保证养殖条件良好,饲养周期为8周。
1.4 饲养指标监测 在养殖试验开始与结束后,分别对加州鲈鱼进行计数和统计,同时测量其体重和体长,分别测定加州鲈鱼的体长、体高及体重,计算增重率(WGR)、成活率、特定生长率(SGR)、相对增重率、饵料系数(FCR),公式如下:
特定生长率(SGR,%/d)=(ln终末体重-ln初始体重)/饲养天数×100;饵料系数(FCR)=总投料量/增重量;肥满度(CF)=体重(g)/体长(cm)×100;成活率(SR,%)=存活尾数/初始尾数×100;增重率(WGR,%)=(末均重-初均重)/初均重×100。
试验结束后,将其各组加州鲈鱼肌肉成分进行测定,粗蛋白质含量采用其凯氏定氮法进行测量,粗脂肪采用索氏提取法进行测定,粗灰分采用加热法进行测定。
1.5 试验数据分析 所有试验数据均用“平均数±标准误”表示,所有数据差异性分析,均用SPSS22.0分析,使用单因素方差分析,采用Duncan’s法进行多重比较,P<0.05为差异显著。
2.1 不同水平的抗菌肽饲料对加州鲈鱼的生长性能影响 由表3可知,随着饲料中不同抗菌肽添加水平不断增加,加州鲈鱼增重率先上升后下降,试验组1和4加州鲈鱼的增重率分别为417.3%和409.75%,均显著高于对照组(P<0.05);随着饲料中抗菌肽添加比例不断增加,加州鲈鱼的特定增长率先上升后下降,在试验组2中,加州鲈鱼特定增长率达到最大的水平,为2.97%,显著高于其他各组(P<0.05)。饲料中添加不同水平的抗菌肽,加州鲈鱼的饵料系数不断下降,试验组1~4中加州鲈鱼的饲料系数显著低于对照组(P<0.05),抗菌肽作为饲料添加剂能显著降低加州鲈鱼的饵料系数。试验3~4组中加州鲈的存活率显著高于对照组(P<0.05)。
表3 不同添加水平抗菌肽饲料对加州鲈鱼生长性能的影响
2.2 不同添加水平抗菌肽饲料对加州鲈鱼的营养成分的影响 高水平抗菌肽组(试验组4)加州鲈鱼脏体比显著高于其他组(P<0.05),且加州鲈鱼脏体比随着饲料中抗菌肽的添加水平的升高而上升。高水平抗菌肽组(试验组4)加州鲈的肝体比显著高于其他组(P<0.05);饲料中不同添加水平的抗菌肽对加州鲈的肥满度没有显著影响(P>0.05);试验组3加州鲈鱼体组成中粗蛋白质含量最高,显著高于其他试验组(P<0.05),试验组2次之,显著高于对照组、试验组1和4(P<0.05);对照组加州鲈鱼体组成中粗脂肪含量显著高于试验组1~4(P<0.05);试验组3加州鲈鱼体组成中水分显著高于其他各组(P<0.05);试验组3加州鲈鱼的粗灰分显著高于其他各组(P<0.05),其他各组之间没有显著差异(P > 0.05)。
表4 不同添加水平抗菌肽饲料对加州鲈鱼的营养成分的影响
3.1 不同水平的抗菌肽饲料对加州鲈鱼的生长性能影响分析 在本试验结果中,饲料中添加不同水平的抗菌肽对加州鲈鱼增重率有不同程度的影响。当抗菌肽添加量为160 mg/kg时,加州鲈鱼的增重率最高,明显高于对照组,当添加量为200 mg/kg时,加州鲈鱼的增重率与对照组无显著差异,这些研究结果表明,饲料中添加适量的抗菌肽可对加州鲈鱼生长产生显著影响,与董晓庆(2017)等研究结果类似。水产动物生长发育与周围环境、饲料营养成分、水温及水质等因素息息相关。但饲料中添加高水平营养成分将会抑制其水产动物的生长,被称为抗生长因子,饲料中有效成分可能存在抗生长因子,对水产动物起到一定抑制作用。而抗菌肽作为动物机体天然防御系统的重要成分之一,对动物生长发育起到促进作用。丁修良(2018)等研究发现,抗菌肽作为添加剂能显著提高抗菌肽的养分成分,促进鸡肠道绒毛增长,增加吸收面积,增强肠道吸收效率,促进机体生长。这些研究结果表明:饲料中添加适量抗菌肽可能会促进加州鲈鱼的生长,可能与抗菌肽抑制肠道有害菌,促进肠道吸收效率,提高机体肠道的消化能力,具体原因需要进一步深入探究。
在水产养殖中,抗菌肽作为饲料添加剂进行使用,并取得一定成效。王自蕊(2014)等研究抗菌肽作为鲫鱼饲料的添加剂,能有效提高鱼类生长性能,当饲料中抗菌肽添加量为300 mg/kg,能显著提高鲫鱼的生长性能和鲫鱼体内溶菌酶活性。林鑫(2013)等研究抗菌肽作为锦鲤的饲料添加剂,当抗菌肽添加量为150 mg/kg时,显著提高锦鲤的增重率和特定生长率。姜珊(2011)等研究发现,添加一定量抗菌肽能显著提高罗非鱼的增重率。柴仙琦(2012)等研究发现,添加一定量抗菌肽能显著提高凡纳滨对虾的增长率、特定生长率及饵料系数。这些试验结果也证明了抗菌肽作为饲料添加剂能显著提高鱼类生长机能与免疫机能,在机体免疫中能发挥重大作用。这些试验结果鱼类生长发育与抗菌肽使用剂量、鱼类养殖环境、种类及温度变化等因素有关。
3.2 不同添加水平抗菌肽饲料对加州鲈鱼营养成分的影响分析 形态学研究是评估水产动物生长发育状态的重要指标。形态学指数已被水产动物广泛应用于评估水产动物健康水平的指标。本研究发现,饲料中添加不同水平抗菌肽对加州鲈鱼的肝体比、脏体比有显著影响。饲料中不同添加水平的抗菌肽对加州鲈鱼肥满度有显著影响,表明抗菌肽的添加会促进加州鲈鱼的肥满度。
蛋白质及其他营养成分是评估鱼体健康重要的参考指标(覃志彪等,2016)。在本研究中,饲料中抗菌肽的添加水平越高,加州鲈鱼粗蛋白质含量越高,抗菌肽添加量为160 mg/kg时,加州鲈鱼的粗蛋白质含量最大,表明饲料中添加一定量的抗菌肽有助于氨基酸的消化与吸收,以及蛋白质的合成和累积;本研究发现,粗脂肪含量会随抗菌肽添加水平的升高而下降,试验组粗脂肪含量低于对照组,表明饲料中添加不同水平抗菌肽对加州鲈鱼的粗脂肪含量产生不同影响。这可能与抗菌肽有助于消化脂肪,促进脂肪代谢,抑制脂肪形成有关。因而,饲料添加一定水平抗菌肽可能会提高加州鲈鱼的蛋白水平,从而抑制其脂肪含量。
饲料抗菌肽的添加量为160 mg/kg将会促进加州鲈鱼的增重率及特定生长率,降低饵料系数,促进加州鲈鱼生长,提高饲料利用效率,对对鱼类形态学特征有显著影响,促进加州鲈鱼的生长。