阴道微生态评价系统检测阴道分泌物诊断细菌性阴道病的价值

吴秀珍，马菲菲，林丽华，黄绍娥

三明市第一医院检验科 (福建三明 365000)

细菌性阴道病(bacteria vaginosis，BV)是由于阴道微生态平衡被破坏而导致的混合感染型疾病，在育龄期女性中发病率较高。BV可诱发多种妇科疾病和(或)产科疾病，如尿道炎、妇科肿瘤、早产、羊水感染等，严重威胁患者的身心健康[1]。因此，准确诊断、及时有效治疗BV患者的意义重大。既往，国内外多以Amsel诊断法为基本的临床诊断方法，该方法虽诊断价值较高，但其重复性较差，临床推广有一定难度。有研究报道，阴道微生态评价系统能反映阴道微环境改变，在阴道感染检测中有较为显著的价值[2]。由此推测，阴道微生态评价系统在BV的诊断中或有一定价值。基于此，本研究旨在分析阴道微生态评价系统检测阴道分泌物诊断BV的价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019年1—12月我院检验科收治的60例疑似BV患者作为研究对象，年龄22～40岁，平均(30.25±3.17)岁；体质量指数(body mass index，BMI)19～28 kg/m2，平均(23.07±1.26)kg/m2。本研究方案通过三明市第一医院医学伦理委员会审核批准。纳入标准：待检者均签署知情同意书；精神及意识状态正常，可高效配合研究；待检者有外阴不适、分泌物量及性状改变、分泌物有异味等症状；心、肝、肾功能正常；有性生活史。排除标准：处于月经期；在检查前1周内有阴道用药史；在检查前3 d内使用过阴道润滑剂、阴道灌液或进行性交。

1.2 方法

阴道微生态评价系统检测方法具体如下。(1)取材：轻置未涂润滑剂的无菌窥阴器暴露阴道，取材前先用1支棉拭子轻轻拭去取材部位堆积的脓液，然后用另2支棉拭子取阴道侧壁上1/3的阴道分泌物。(2)涂片、固定：将其中1支拭子在玻片上滚动1周作为涂片标本，并将涂片干燥、固定。(3)染色：准备革兰染色液，由珠海贝索生物技术有限公司提供，包括龙胆紫溶液、碘溶液、脱色液、蕃红染色液，首先加龙胆紫溶液染色10 s后水洗，甩干，再加碘溶液染色10 s后水洗，甩干，之后应用脱色液脱色10 s后水洗，甩干，最后应用蕃红染色液复染10 s后水洗，待自然干燥后使用OLYMPUS CX22 型生物显微镜实施镜检，查找线索细胞的同时在镜下进行Nugent评分(0～3分为正常，4～6分为临界范围，7分及以上为BV)。(4)阴道微生态评价：从2～8 ℃的恒温冰箱中取出试剂盒，将其恢复至室温后使用，在软试管中滴取4～6滴稀释液，然后将另1支附着有阴道分泌物的棉拭子置于软试管内的稀释液中，将棉拭子反复旋转3～4次，使所附着的分泌物充分释放，最后将棉拭子头部紧贴软管壁使其吸附的液体流回试管，得到所需样本，从铝箔袋中取出反应装置，用吸管吸取样本液，在反应装置的7个反应孔内(包括1个空白对照孔)每孔滴加1滴样本液，然后在唾液酸酶反应孔中再滴加1滴显色液，轻轻震摇反应装置，1 min内对照比色卡的显色情况记录PH，将反应装置放于37 ℃温度下温育10 min，在乙酰氨基葡萄糖苷酶反应孔中再滴加1滴终止液，在30 s至60 min内记录显色结果。(5)结果判读：以空白对照孔为对照孔，根据比色卡显示的颜色反应(比色卡标识，“-”为阴性、“±”为弱阳性、“+、++、+++”为阳性)判读各孔反应后的结果得出是否存在BV，在完成阴道微生态评价后实施Amsel诊断法，并以此结果为金标准。

1.3 评价指标

(1)诊断价值：统计阴道微生态评价系统诊断BV的结果，以Amsel诊断法结果为金标准，分析阴道微生态评价系统诊断BV的价值，其中以a表示真阳性，以b表示假阴性，以c表示假阳性，以d表示真阴性，灵敏度=a/(a+c)×100%，特异度=d/(b+d)×100%，准确度=(a+d)/(a+b+c+d)×100%，阳性预测值=a/(a+b)×100%，阴性预测值=d/(c+d)×100%。(2)一致性分析：采用Kappa法进行一致性检验，分析阴道微生态评价系统诊断BV结果与Amsel诊断法结果的一致性。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 Amsel诊断法结果

经Amsel诊断法确诊为BV的患者共43例。

2.2 阴道微生态评价系统诊断BV结果

阴道微生态评价系统诊断BV的准确度为91.67%(55/60)、灵敏度为93.02%(40/43)、特异度为88.23%(15/17)、阳性预测值为95.24%(40/42)、阴性预测值为83.33%(15/18)；经Kappa一致性度量，阴道微生态评价系统诊断BV结果和Amsel诊断法一致性较好(Kappa=0.798，P=0.000)，见表1。

表1 阴道微生态评价系统的诊断效果(例)

3 讨论

在正常情况下，阴道内存在的微生物菌群和宿主之间是相互影响、相互制约的，处于动态平衡状态，对维持阴道自净作用及保持宿主健康发挥着重要作用。但当机体内外因素打破该种动态平衡的状态时，会造成微生物在种类、数量、比例上出现变化，导致阴道微生态紊乱，使加特纳菌、普氏菌及阿托波等厌氧菌侵袭并在阴道内大量繁殖，进而引起BV，严重降低患者的生命质量[3-4]。因此，应用快速、准确的方法诊断BV患者已成为临床关注的重点。

Amsel诊断法是将临床表现与实验室检查结果相结合的诊断方法，是诊断BV的金标准，但临床普及具有一定难度，应用具有局限性[5]。当前，微生态评价系统逐渐用于各种阴道炎症疾病的临床诊断中，且取得了一定的效果[6]。本研究结果显示，阴道微生态评价系统诊断BV的准确度、灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值均较高，且经Kappa一致性度量，阴道微生态评价系统诊断BV结果和Amsel诊断法一致性较好，表明阴道微生态评价系统能准确诊断BV。分析其原因为，阴道微生态评价系统是将Nugent革兰染色评分法与干化学酶技术相结合的诊断系统，先根据阴道内菌种情况进行评分，然后根据酶解特异性底物显色或添加显色液显色评估阴道微环境改变情况。若阴道分泌物中存在过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸苷酶、β-葡萄糖醛酸酶、PH及乙酰氨基葡萄糖苷酶的变化，在相应底物作用下会呈现不同的颜色改变，并且呈现的颜色深浅与所含酶的浓度成正比[7-8]。其中的唾液酸苷酶是由加德纳菌、普氏菌及阿托波菌等BV致病菌产生的特异性酶，仅在BV致病菌出现后才会大量产生。因此，检测阴道分泌物中的唾液酸苷酶可了解阴道内BV致病菌定居及繁殖的情况。利用阴道微生态评价系统检测阴道分泌物，当唾液酸苷酶孔呈阳性(显示淡红色、红色或紫红色)，且结合Nugent革兰染色评分≥7分时可准确诊断BV。

综上所述，阴道微生态评价系统能准确诊断BV，且与Amsel诊断法结果的一致性较好，诊断价值较高。