2种不同检测系统的AFP、CEA、CA125检测结果可比性评估

肖含 李姗姗 崔思洋 周芳宇 李雨艳

（吉林金域医学检验所有限公司 吉林长春 130000）

1 前言

原发性肝癌（PHC）发病率高且进展快速、侵袭性较强，早期无典型症状，多数患者确诊时已处于中晚期，错失最佳治疗时机。因此，探寻一种准确可靠的检测方法，提升PHC的早期诊断效能，对改善患者预后具有重要影响[1]。肿瘤标志物检测是诊断PHC的常用方法，但使采取单一指标进行检测，其特异度、灵敏度较低，缺乏组织及器官特异性[2]。而AFP、CEA、CA125联合检测在PHC诊断中的特异度、灵敏度较高，故应用广泛。对不同检测系统之间的检测结果进行比对，对保证检测结果的一致性、准确性和可比性极为重要，故本文就不同检测系统之间的检测差值进行比较和分析，以期为相关人员提供参考。

2 材料与试剂

2.1 标本采集

采集在本院进行健康体检的人员的血液标本40份。纳入标准：无相关血液疾病；检查各项血液指标均正常；以《临床化学检验血液标本收集与处理》（WS/T225-2002）[3]为准则。

2.2 仪器与试剂

X系统：全自动化学发光仪（雅培i2000SR）及其配套AFP、CEA、CA125试剂；Y系统：化学发光仪（博奥赛斯Axceed260）及其配套AFP、CEA、CA125试剂。

3 方法

3.1 质控

于X系统（参考系统-雅培）和Y系统（实验系统-博奥）中，给予伯乐质控品，进行室内全面质控，以保障所有质控结果均符合正常标准。

3.2 验证精密度

本文借助相关标准性文件，以CLSI的EP15-A2为参考评估标准值[4]，测定流程以样本检测顺序逐一进行。选取2个不同浓度样本，每天检测4个批次，每批检测1次，连续检测5 d，共20个数据。并统计所得数据的均值、SD、CV，计算的CV要求≤1/3Tea。对S批内与CV批内、S批间与CV批间的标准差进行计算。

3.3 验证线性规范

以NCCLS的EP6-A文件为根据[5]，以高值标本（H）为高值血清标本（其水平与线性范围上限相近），以低值标本（L）为低值血清标本（其水平与线性范围的下限相近），根据1H+4L、4H+1L、2H+3L、5H、3H+2L、5L配置H及L，共6个水平。对上述水平中3个项目CEA、CA125、AFP，利用X和Y系统进行评估。各水平均评估2次，取均值，并利用线性回归对水平与理论值进行分析。X作为横坐标表示稀释后理论值，Y作为纵坐标表示实测平均值，对回归方程进行计算，具体方法：Y＝aX+b和决定系数（R2），斜率a值0.95～1.05。R2评估线性标准：R2≥0.95。

3.4 验证参考区间

以CLSI的EP方案为参考标准，检测流程遵循样本检测程序，选取正常健康人样本20份，每份样本测定1次。在20份测试对象的数据中，如果有不超过1个检测结果（95%置信区间）在实验室采纳的参考区间界限以外，则表明实验室采纳的参考区间可接受。

3.5 方法学

比对40份已纳入的临床血清样本，使用X系统和Y系统检测，对结果行线性回归分析，得出Y＝aX+b方程结果及R2，以此分析X系统和Y系统的测试结果。

4 结果

4.1 批内和批间精密度

X、Y系统检测AFP，CEA，CA125项目批内和批间精密度，详见表1。

表1 2个检测系统的AFP，CEA，CA125项目批内和批间精密度

4.2 线性范围验证结果

选取混合血清，将AFP、CEA、CA125等水平按照配制关系进行稀释和计算，横坐标作为理论预期值，纵坐标作为实测值，借助高等数学行数据检验，以线性回归方式执行。经计算得出：AFP：Y=0.98844X+2.2212，R2值为0.9992，详见表2；CEA：Y=0.9999X-6.4297，R2值为0.998，详见表3；CA125：Y=0.9918X+4.4677，R2值为0.9955，详见表4。

表2 Y系统AFP线性范围测试结果（ng/ml）

表3 Y系统CEA线性范围测试结果（ng/ml）

表4 Y系统CA125线性范围测试结果（U/ml）

斜率范围在0.95～1.0之间，R2≥0.95，这表明Y系统复合厂家规定线性范围，满足本文检验需求，具体线性范围：AFP：0～500 ng/ml；CEA：0～500 ng/ml；CA125：0～500 U/ml。

4.3 参考区间验证结果

选取AFP、CEA、CA125健康人员样本20份，每份样本测定1次。填写《健康问卷调查表》，在20份测试对象的数据中，有不超过1个检测结果（95%置信区间）在实验室采纳的参考区间界限以外，则表明实验室采纳的参考区间可接受。

4.4 方法学样本比对

为保证检验结果的精确性，选取40份新鲜的临床血清样本，采用X系统和Y系统共同实施检测，利用线性回归对检测结果实施评估，评估后线性回归方程分别为：AFP：Y=0.0.8775X+4.57，R2值为0.9975；CEA：Y=0.934X+0.5442，R2值为0.9996。CA125：Y=0.0.8946X-0.1084，R2值为0.9998。三者均满足斜率在0.95～1.0，且R2≥0.95，可见不同检测系统的AFP、CEA、CA125检测结果具有良好的相关性。

5 讨论

AFP是临床公认的PHC诊断早期筛查方法，其中原发性肝癌高危者联合应用血清AFP及肝脏超声进行筛查，作用显著。本文采用雅培i2000SR（X系统）和博奥赛斯Axceed 260（Y系统），同时检测甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）、糖类抗原125（CA125），对这3个项目分别进行精密度、线性范围，参考区间和方法学比对验证。结果表明，其精密度、参考区间和线性范围均能符合指标。在方法学比对中，这3个项目均满足斜率在0.95～1.0且R2≥0.95。由此可见，AFP、CEA、CA125指标应用于雅培i2000SR系统和博奥赛斯Axceed 260系统的检测作用效果明显。在日常检测中，为保证质量，采用不同检测系统检测同一项目时，应当进行方法学比对验证。