老年脑胶质瘤组织中骨膜蛋白及EMT标记物的表达及临床意义

潘晓燕 范宜娟 杨滢瑜 陈荣 汤芃芃

(上海宝山区仁和医院 上海复旦大学附属华山北院宝山分院病理科，上海 200431)

脑胶质瘤在颅内肿瘤中占比较高，高级别脑胶质瘤较多见，且恶性程度高，侵袭能力强，病情进展快〔1〕。目前，脑胶质瘤主要治疗方式为手术联合放化疗，能有效缓解病情，但缓解时间较短，患者5年生存率不足5%〔2〕。因此，寻找脑胶质瘤新的标记物和新的治疗靶点至关重要。上皮-间质转化(EMT)能通过促进肿瘤细胞扩散至远处，增加肿瘤的恶性行为，导致转移〔3〕。研究表明，EMT与脑胶质瘤恶性程度相关，EMT标记物上皮钙黏蛋白(E-cad)、纤连蛋白(Fn)、波形蛋白(Vim)、神经钙黏蛋白(N-cad)能在一定程度上反映肿瘤恶性程度〔4〕。骨膜蛋白(POSTN)可诱导肿瘤细胞活化，促进肿瘤细胞侵袭和迁移〔5〕。有研究发现，POSTN能通过调控EMT过程，参与肿瘤的发生发展过程〔6〕。但是，目前关于POSTN、EMT与脑胶质瘤恶性程度关联的相关研究较少。基于此，本研究分析老年脑胶质瘤组织中骨膜蛋白及EMT标记物的表达及临床意义。

1 资料与方法

1.1一般资料 回顾性收集上海宝山区仁和医院2017年1月至2020年4月完成神经外科手术的105例老年脑胶质瘤患者临床资料，患者脑胶质瘤标本、正常组织标本均保存完整。患者中男58例，女47例；年龄63～81岁，平均年龄(72.54±5.53)岁；肿瘤直径2.11～5.94 cm，平均直径(3.88±0.54)cm；分级：Ⅰ级10例，Ⅱ级36例，Ⅲ级22例，Ⅳ级37例。

1.2入选标准 (1)纳入标准：①符合《中国脑胶质瘤分子诊疗指南》〔7〕中脑胶质瘤诊断标准；②年龄>60岁；③在上海宝山区仁和医院首次手术切除；④经手术病理确诊为脑胶质瘤；⑤实验室数据库中有可用的组织蜡块。(2)排除标准：①合并其他恶性肿瘤；②其他疾病史及治疗史；③临床资料不完整。

1.3免疫组织化学染色法 10%中性甲醛固定、石蜡包埋的组织标本4 μm厚连续切片，常规脱蜡、脱水，抗原修复，阻断内源性 过氧化物酶，Envision二步法进行免疫组织化学染色，二氨基联苯胺显色，苏木素复染，常规脱水透明，封片。免疫组织化学染色评定标准：随机选取5个高倍镜视野观察，细胞质或细胞核出现黄色或棕黄色为阳性细胞。根据染色程度进行恶性程度评分：无染色0分，淡黄色1分，黄色2分，棕黄色3分。根据阳性细胞百分比进行评分：阳性细胞百分数≤5%为0分，>5%且≤25%为1分，>25%且≤50%为2分，>50%且≤75%为3分，恶性程度>75%为4分。染色程度与阳性细胞百分比相乘的结果作为最终评定恶性程度标准：0分为阴性(-)，1～4分为弱阳性(+)，5～8分为中等阳性()，9～12分为强阳性()。

1.4统计学方法 采用SPSS24.0软件进行秩和检验、Kendall′s tau-b相关性分析检验。

2 结 果

2.1脑胶质瘤组织和正常组织中POSTN及EMT标记物表达 脑胶质瘤组织中POSTN、Fn、Vim、N-cad表达高于正常组织，E-cad表达低于正常组织，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 脑胶质瘤组织和正常组织中POSTN及EMT标记物表达〔n(%),n=105〕

2.2不同级别脑胶质瘤组织中POSTN及EMT标记物表达 高级别脑胶质瘤组织中POSTN、Fn、Vim、N-cad表达高于低级别脑胶质瘤组织，E-cad表达低于低级别脑胶质瘤组织，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 不同级别脑胶质瘤组织中POSTN及EMT标记物表达〔n(%)〕

2.3POSTN及EMT标记物表达与脑胶质瘤恶性程度的相关性 脑胶质瘤组织中POSTN、Fn、Vim、N-cad表达与脑胶质瘤恶性程度呈正相关(r=0.545、0.671、0.624、0.630，P<0.05)；E-cad表达与脑胶质瘤恶性程度呈负相关(r=-0.649，P<0.05)。

2.4POSTN与EMT标记物表达相关性 POSTN与Fn、Vim、N-cad表达正相关(r=0.173、0.481、0.168，P<0.05)；POSTN与E-cad表达呈负相关(r=-0.410，P<0.05)。

3 讨 论

脑胶质瘤侵袭性强、增殖快，目前仍无法通过手术清除，术后通常需联合化疗〔8〕。但是，脑胶质瘤患者由于胶质瘤、血脑屏障水肿，造成脑组织间隙静水压升高，对化疗药物的浓度造成影响，可能会影响化疗效果，容易导致复发〔9〕。

在肿瘤侵袭过程中，EMT现象具有重要的作用〔10〕。POSTN是一种糖蛋白，分子质量相对较高，具有多功能性，参与细胞外基质的组成〔11〕。研究表明，POSTN高表达和肿瘤转移具有密切的联系，会增加预后不良的风险〔12〕。本研究结果说明，恶性程度越高的脑胶质瘤组织POSTN表达越高，EMT越严重。由此推测，POSTN、EMT标记物可能与老年脑胶质瘤的发生发展相关。进一步经相关性分析，结果显示，脑胶质瘤组织中POSTN、Fn、Vim、N-cad表达与脑胶质瘤恶性程度呈正相关；E-cad表达与脑胶质瘤恶性程度呈负相关。分析原因为：POSTN能使肿瘤细胞中Wnt信号加强，从而调节肿瘤微环境，促进肿瘤细胞的生长，强化肿瘤细胞的生存能力，促进肿瘤恶化〔13，14〕。作为一种基质蛋白，POSTN也能影响细胞的黏附过程促进肿瘤的侵袭与增殖，参与肿瘤血管、淋巴管的形成，促进转移〔15〕。EMT现象与脑胶质瘤恶性程度的相关性已被证实，如李楠等〔16〕研究。本研究说明，POSTN可能通过影响EMT，参与脑胶质瘤的发生发展。分析原因为：POSTN参与癌症坏死进程，对局灶性黏附激酶等生存信号及前侵袭信号具有调节作用，从而影响转移癌症细胞的活性，促进EMT现象〔17〕。Ouanouki等〔18〕研究中使用花青素抑制POSTN后，Fn、Vim表达降低。说明，POSTN可能是调节EMT标记物的关键信号中间蛋白，可见POSTN调控EMT过程影响胶质瘤发生、发展的相关机制有一定的研究价值，可在未来进一步进行研究分析明确。

综上所述，老年脑胶质瘤的发生发展与组织中POSTN表达、EMT标记物有一定联系，检测POSTN及EMT标记物或可指导老年脑胶质瘤病情评估。