重度烧伤患者炎性因子与T淋巴细胞水平的相关性研究

蔚利纳

(郑州市第一人民医院 干细胞中心，河南 郑州 450000)

重度烧伤属于临床常见创伤性疾病，该病不仅会干扰机体内环境运作，还会导致机体继发一系列病理变化，表现为炎性因子水平异常升高、免疫功能减退；随着体外免疫屏障功能的持续减退，重度烧伤患者体内免疫因子或受到过度激活进而形成免疫过激或免疫抑制，同时并发应激反应、加剧病菌清除机制紊乱情况，导致炎性物质堆积[1]。由此可见，同时对以上两个方面的波动情况进行分析有助于形成烧伤部位病情发展动态检测结果，为临床重度烧伤诊治提供依据。关于监测重度烧伤肌肤病变部位炎性因子水平是否能够反映免疫功能减退情况，而免疫功能减退是否推动机体炎症介质增殖，本研究就重度烧伤患者炎性因子与其T淋巴细胞水平的相关性进行研究后，得出以下结论，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2020年1月至2021年1月在郑州市第一人民医院进行治疗的43例重度烧伤患者作为研究对象纳入观察组，同期选取43例到院体检的健康者纳入对照组。43例重度烧伤患者中，男24例，女19例；年龄为23～64岁，平均(46.71±12.63)岁；烧伤面积：20例烧伤面积占体表总面积的30%～45%，15例＞45%，8例为11%～20%Ⅲ度烧伤。43例健康者中，男26例，女17例；年龄为22～64岁，平均(47.84±13.20)岁；体质量指数(BMI)为19～23 kg/m2，平均(21.24±1.03) kg/m2。两组性别、年龄构成比差异无统计学意义(P＞0.05)，86例入组对象及家属均已签署知情同意书。

1.2 纳入及排除标准

纳入标准：(1)入组健康者B超、放射科检查、血尿常规检测结果均正常；(2)重度烧伤患者符合《中国烧伤专科手术分级评估方法专家共识(2019版)》[2]中重度烧伤诊断标准。

排除标准：合并免疫性疾病、慢性皮肤炎症、肝肾综合征、内分泌系统功能障碍者。

1.3 检测仪器及方法

1.3.1 检测仪器

T淋巴细胞亚群水平和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平检测采用美国BD公司所生产的FACSCanto II流式细胞仪；C-反应蛋白(CRP)检测所用荧光免疫定量分析仪由基蛋生物科技股份有限公司生产，型号为Getein1600。

1.3.2 检测方法

受测T淋巴细胞亚群包括自然杀伤细胞(NK)以及白细胞分化抗原CD4+、CD8+，采用单克隆抗体分析法进行检测，取100 μL血细胞抗凝混悬液置入检测试管，后加入荧光素标记单抗，震荡混匀静置20 min；接着加入细胞裂解液，离心吸取上清，加入400 μLPBS洗涤；后重悬于700 μLPBS洗涤液中。CRP及TNF-α采用免疫荧光法进行检测，采用抗凝试管收集250 g外周血液样本混合实验缓冲液进行稀释、避光震荡捕获微球抗体，后于室温环境下离心5min，使用移液枪吸取125 μL上层清液；接着往每管内加入200 μL洗涤缓冲液，利用涡旋将微球重悬30 s，离心5 min后吸取200 μL血浆上层清液，尽量吸弃液体；最后根据流式细胞仪样本检测需求，于每管内加入150～300 μL洗涤缓冲液，通过涡旋重悬微球抗体。于60 min内上各指标对应仪器或采用对应试剂进行检测。

1.4 观察指标

比较对照组与观察组的CRP、TNF-α以及NK、CD4+、CD8+淋巴细胞水平，同时对重度烧伤患者CRP、TNF水平与NK、CD4+、CD8+T淋巴细胞水平的相关性进行分析。

1.5 统计学分析

采用SPSS 22.0统计学软件对此次研究数据进行分析，计量资料以±s表示，进行t、r检验，若检验结果为P＜0.05则差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组炎性因子、T淋巴细胞亚群水平比较

观察组CRP、TNF-α水平均高于对照组，NK、CD4+水平低于对照组，CD8+水平与对照组相比较高(P＜0.05)。见表1。

表1 两组炎性因子、T淋巴细胞亚群水平比较(±s )

表1 两组炎性因子、T淋巴细胞亚群水平比较(±s )

组别 例数 CRP/(mg·L-1) TNF-α/(ng·L-1) NK/% CD4+/(个/μL) CD8+/(个/μL)观察组 43 38.25±5.13 99.58±21.46 5.08±1.52 356.30±36.57 1 526.72±417.84对照组 43 4.52±1.30 33.26±12.86 12.93±4.10 531.68±38.64 1 070.11±361.26 t 12.990 6.042 8.296 9.139 2.108 P＜0.001 0.008 ＜0.001 ＜0.001 0.042

2.2 重度烧伤患者炎性因子、T淋巴细胞亚群水平相关性分析

观察组43例重度烧伤患者CER、TNF水平与NK细胞、CD4+均呈负相关，与CD8+细胞呈正相关(P＜0.05)。见表2。

表2 重度烧伤患者炎性因子、T淋巴细胞亚群水平相关性分析(±s )

表2 重度烧伤患者炎性因子、T淋巴细胞亚群水平相关性分析(±s )

炎性因子 NK/% CD4+/(个/μL) CD8+/(个/μL)r P r P r P CRP -0.449 0.016 -0.423 0.019 0.375 0.025 TNF -0.315 0.030 -0.377 0.024 0.405 0.019

3 讨 论

重度烧伤引发炎性病变的病理机制被认为与机体免疫力低下、炎性因子所致神经内分泌反应、烧伤创面变形坏死组织为细菌提供良好培养基等因素有关；基于此，准确评估重度烧伤患者炎性反应程度，不仅是临床感染诊断、治疗效率提升的关键措施，也是有效改善患者预后的重要参考依据[3-4]。考虑到重度烧伤所引起的病理变化在发病机制上呈复杂性特征，对各项机制的相关性进行分析，可提高临床病理诊断分析的系统性及科学性。

本研究中，对健康者以及重度烧伤患者的炎性因子及T淋巴细胞水平进行检测后发现，重度烧伤患者炎性因子、T淋巴细胞水平与正常人群差异较显著，提示重度烧伤患者局部肌肤黏膜、器官病变会诱发不同程度的炎性反应，同时破坏机体正常免疫屏障。有学者研究指出[5]，与一般轻度烧伤相比，重度烧伤患者皮损程度较严重，其局部黏膜屏障出现应激性损伤、微生物移位的可能性较大；若此类病变持续发展未得以控制，则易激活各类炎性介质，并在多种放大效应引导下引发多器官连锁应激反应。除了炎症反应以外，免疫调节失常也是机体遭遇各类创伤、感染影响后出现的典型症状。T细胞、NK均参与到细胞免疫应答过程中，其中活化后的NK细胞与免疫应答过程中发挥释放、分泌趋化因子的作用，T细胞亚群于机体出现创伤、失血性休克等疾病且并发免疫抑制时表现出较低的增殖活性；重度烧伤后，体表肌肤、皮下组织受损破溃，相应区域的免疫屏障自然难以保持完整性[6]。

有关研究指出[7]，促炎—抗炎动态调控机制失衡在免疫功能减弱过程中发挥重要推动作用，而免疫抑制会介导炎症反应的生成。关于以上说法中提到的炎症反应与免疫功能之间的相互作用，本研究对重度烧伤患者炎性因子及其T淋巴细胞水平相关性进行分析后得出，其炎性因子与T淋巴细胞水平存在正相关或负相关关系，提示重度烧伤患者发生炎性病变的同时往往伴随着免疫功能减退。重度烧伤会刺激外源性、内源性病原体相关模式分子大量释放，同时激活自体免疫防御机制启动先天免疫反应、诱导免疫细胞分泌趋化因子抵御炎症介质增殖；然而，T淋巴细胞所介导的获得性免疫反应主要通过调节巨噬细胞功能来完成抗菌职能，而烧伤合并感染者巨噬细胞功能正处于抑制状态，此情况或引发巨噬细胞代偿性分泌大量炎性因子以维持促炎—抗炎机制平衡[8]。在巨噬细胞职能减退、代偿性释放炎性因子的影响下，T淋巴细胞活化受阻、CD4+与CD8+的动态平衡被打破，机体抗炎能力持续下降；以上免疫调节机制失衡因素综合作用会加剧炎性组织的积累，构成恶性循环。

综上所述，重度烧伤患者炎性因子与其T淋巴细胞水平存在显著相关性。