猪肠系膜上动脉血栓模型建立的改良方法

丛铭池 荆玉辰 辛世杰

(中国医科大学附属第一医院血管外科/甲状腺外科，沈阳 110001)

急性肠系膜缺血(acute mesenteric ischemia，AMI)通常定义为一组疾病，其特征是小肠不同部位的血液供应中断，导致缺血和继发性炎症改变。如果不治疗，将最终导致危及生命的肠道坏死。其主要病因为肠系膜上动脉栓塞(superior mesenteric artery embolism)，约占50%。发病率低，约占所有急性外科住院病例的0.09%～0.2%[1]，男女比例3∶1，60～70岁为高发人群[2]。肠梗死的死亡率可接近90%[3]。目前尚无一款专门应用于肠系膜上动脉栓塞性疾病的介入器械。本研究建立了一种与临床发病情况接近的动物模型用以评估自主研发的取栓器效果。

1 材料和方法

1.1 材料

10只健康巴马香猪，6～8月龄，体质量35～45 kg，雄性，购自北京实创世纪小型猪养殖基地，实验动物生产许可证号：SCXK(京)2018-0011，实验动物福利伦理审查编号：2018064。

1.2 方法

1.2.1实验动物处置： 术前禁食 12 h，咪达唑仑5 mg及氯胺酮0.05 g肌注镇静。面罩罩住口鼻并使用异氟烷进行麻醉诱导，待角膜反射消失后将动物固定于手术床上。耳缘静脉穿刺开通静脉通路，泵注丙泊酚30～40 mL/h维持麻醉。股动脉穿刺区消毒，铺单，切开皮肤钝性分离暴露股动脉并穿刺，置入动脉鞘及导丝、导管，造影确认置入肠系膜上动脉内，沿导丝置入4F Fogarty导管进入肠系膜上动脉内约10 cm，造影剂充盈球囊，造影确认成功阻断肠系膜上动脉(SMA)。

1.2.2血凝块制作：抽取动脉血20 mL，加入50 U凝血酶，静置15 min，待凝固后切条备用。

1.2.3模型制作：经8F动脉鞘注入血凝块，抽吸球囊取出Fogarty导管。

1.2.4观察指标

1.2.4.1 影像学：分别于10 min、30 min和1 h造影查看栓塞情况。

1.2.4.2 解剖学：所有实验动物均在存活时，进行肠系膜上动脉解剖，标本留取由肠系膜上动脉腹主动脉开口处及一并保留部分腹主动脉至肠系膜上动脉三支主要分支末端。

2 结果

2.1 肠系膜上动脉栓塞模型情况

实验中所有实验动物栓塞模型均建立成功，并分别记录体质量与SMA直径(表1)。10 min时可见肠系膜上动脉主干距开口处约1 cm显影，并有造影剂回流入腹主动脉，主干远端及分支不显影，栓塞效果满意(图1)。30 min时可见肠系膜上动脉主干距开口处约3 cm显影。1 h时与之前无明显差异，后续实验将栓塞时间确定为30 min。

表1 体质量与肠系膜上动脉直径Table 1 Body mass and superior mesenteric artery diameter

图1 模型建立过程Fig.1 Modeling process

2.2 解剖并验证模型

剖开肠系膜上动脉主干近端完全栓塞，远端未见明显血栓，少量终末分支可见血栓。相应供血肠管可见紫色缺血改变。如图2所示，该标本为经取栓器取栓后骨骼化取下的标本，近端主干内可见少量血栓残留，一条分支内可见血栓栓塞，各分支远端均未见血栓。

图2 骨骼化后的肠系膜上动脉标本Fig.2 Skeletonized superior mesenteric artery specimens

3 讨论

肠系膜上动脉栓塞发病率虽低，但初步诊断的误诊率达58.1%[4]，且预后极差，常危及生命。血栓通常停留在正常解剖狭窄处，SMA直径相对较大，从主动脉发出的角度较低，尤易受到损伤。因为它的大部分血栓位于SMA自腹主动脉开口约3～10 cm处[1]。目前现有动物模型多以结扎、夹闭等方法以大鼠[5]、兔[6]等作为实验动物，但无论解剖结构还是血管条件均与人体相差甚远。猪、狗等大型动物血管条件与人体更接近，更适合用作动物模型，但是狗的肠系膜血管侧支循环丰富[7]，所以猪成为了最佳实验动物。

预实验参照田国标等[8]的方法，经动脉鞘将体外制作的自体血凝块作为血栓注入肠系膜上动脉，解剖后发现肠系膜上动脉主干及所有分支均被血栓栓塞，与临床中患者发病情况有所不同，且无法进行取栓器械的效果评估。在此基础上，对模型建立方法进行了改良。同样采用自体血凝块作为血栓，使用Fogarty球囊进行阻断，将血栓固定在肠系膜上动脉开口处近端，对远端及分支动脉影响较小，在后续的取栓实验中，取栓成功后通过造影可见肠系膜上动脉及分支血供恢复。与田国标等[8]的方法相比，本方法高度模拟了临床中肠系膜上动脉栓塞性疾病，模型建立过程中对肠系膜上动脉远端及分支动脉影响较小，解剖后可见仅肠系膜上动脉开口处近端被血栓栓塞。本方法更适合观察取栓后肠道血运恢复情况，评估取栓器械的治疗效果以及后续的抗凝治疗及护理，也可为以后新的取栓器械及其他治疗方法提供有效的实验模型。