乳腺浸润性癌中磷酸化细胞外信号凋节激酶与CXC趋化因子配体14的表达及临床诊断意义

那瀚匀

（丹东市第一医院，病理科，辽宁 丹东 118000）

乳腺癌是全球女性常见的恶性肿瘤，占女性恶性肿瘤死因中的首位[1]。据2010年国际癌症研究所发布的数据显示，全球每年乳腺癌的新发病例达167.1万，死亡52.2万，发展中国家乳腺癌的发病率稍低于欧美等发达国家[2]。而在我国，近10年里乳腺癌的发病率呈升高趋势，发病率约为37.8/10万，病死率约为9.2/10万[3]。近些年对于乳腺癌分子机制的研究取得一定的进展，为乳腺癌的早期诊断及靶向治疗提供了越来越多的可能性。细胞外信号凋节激酶（P-ERK）对机体的多种生理活动具有重要的调控作用，P-ERK是其活性形式。相关研究表明，P-ERK具有调节细胞周期、促进细胞增殖、分化、抑制细胞凋亡等作用[4-5]。CXC趋化因子配体14（CXCL14）是CXC类趋化因子家族中的一员，具有趋化自然杀伤细胞、巨噬细胞、B细胞、单核细胞核、不成熟树突状细胞以及抗血管生成等作用[6-7]。本研究旨在探讨乳腺浸润性癌中P-ERK与CXCL14的表达及临床诊断意义，报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象 收集2018年1月至2019年4月47份乳腺浸润性癌手术或穿刺活检组织标本及30份癌旁正常乳腺组织标本，术前均未接受过放、化疗及免疫治疗。所有标本一经离体，即经福尔马林固定，并包埋入石蜡，4 μm连续切片，备用。

1.2 方法 采用免疫组化SP法检测标本中P-ERK与CXCL14的表达情况。SP试剂盒为福州迈新公司产品；兔抗人P-ERK单克隆抗体为英国Abcam公司产品；兔抗人CXCL14单克隆抗体为北京欧盟公司产品。操作按试剂盒说明进行，包括脱蜡、水化，高压抗原修复，3% H2O2孵育，山羊血清封闭，滴加一抗室温孵育1.0 h，二抗室温孵育0.5 h，DAB显色，苏木素复染，盐酸乙醇分化，脱水、二甲苯透明、封片等操作。结果判定：由2位观察者采用双盲法对结果进行判定，显微镜400倍视野下，20个视野，P-ERK为细胞质或细胞核染色，CXCL14为细胞质染色，计数500～1 000个细胞中的阳性细胞，阳性细胞数所占的比例为0～5%为（-），占6%～25%为（+），占26%～50%为（++），＞50%为（+++）。

1.3 统计学方法 采用SPSS 18.0统计软件分析处理数据，计数资料以率表示，行χ2检验；计量资料以（±s）表示，行t检验，相关性分析采用非参数Spearman等级相关检验；P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 P-ERK与CXCL14在不同乳腺组织中的表达情况 P-ERK在乳腺癌组织中的表达阳性率明显高于正常乳腺组织，而CXCL14在乳腺癌组织中的表达阳性率明显低于正常乳腺组织，差异有统计学意义（P＜0.05）。相关性分析显示，P-ERK与CXCL14的表达呈负相关（r=-0.426，P＜0.05）。见表1。

表1 P-ERK与CXCL14在不同乳腺组织中的表达情况[n（%）]

2.2 P-ERK与CXCL14与乳腺浸润性癌临床病理特征的关系 P-ERK在TNMⅠ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期中的表达阳性分别为44.0%（11/25）、63.6%（14/22），在中高分化、低分化中的表达阳性分别为57.6%（19/33）、43.9%（6/14），在有淋巴结转移、无淋巴结转移中的表达阳性分别为71.4%（15/21）、38.5%（10/26），P-ERK在TNM Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移中的表达阳性率明显高于TNM Ⅲ～Ⅳ期、无淋巴结转移，差异有统计学意义（P＜0.05）。CXCL14在TNM Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期中的表达阳性分别为40.0%（10/25）、22.7%（5/22），在中高分化、低分化中的表达阳性分别为33.3%（11/33）、28.6%（4/14），在有淋巴结转移、无淋巴结转移中的表达阳性分别为71.4%（5/21）、38.5%（10/26），CXCL14在TNM Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移中的表达阳性率明显低于TNM Ⅲ～Ⅳ期、无淋巴结转移，差异有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨论

ERK信号途径因可正性调控的肿瘤生长而成为近年研究的热点。研究表明，ERK的过度磷酸化对恶性肿瘤肿瘤的发生及侵袭、转移产生了重要作用[8]。在宫颈癌中，ERK信号通路可通过参与Ras基因突变而促进肿瘤细胞增殖，在宫颈肿瘤向宫颈浸润癌进展的这一过程中，P-ERK的表达逐渐增强[9]。体外试验表明，GPR30-EGFR-ERKl/2信号通路可能是双酚A诱导乳腺癌细胞增殖的通路之一[10]。动物实验表明，P-ERK密切参与了乳腺癌细胞成瘤及侵袭、转移的过程[11]。本研究结果显示，P-ERK在乳腺癌组织中的表达阳性率明显高于正常乳腺组织，且P-ERK在TNM Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移中的表达阳性率明显高于TNM Ⅲ～Ⅳ期、无淋巴结转移，再次提示P-ERK参与了乳腺浸润性癌的发病过程，并能预测乳腺浸润性癌的恶性程度，对乳腺浸润性癌的诊断及术前评估有所帮助。

CXCL14在正常组织中一般呈高表达。研究表明，CXCL14表达缺失与多种恶性肿瘤的生长密切相关[12]。CXCL14可能通过宿主—肿瘤的免疫反应来达到抗肿瘤的目的[13]。CXCL14可通过抑制实体瘤新生血管的生成发挥抗肿瘤作用，CXCL14低表达有助于肿瘤血管生成，从而促进肿瘤细胞的增值、侵袭及转移[14-15]。本研究结果显示，CXCL14在乳腺癌组织中的表达阳性率明显低于正常乳腺组织，同时CXCL14在TNM Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移中的表达阳性率明显低于TNM Ⅲ～Ⅳ期、无淋巴结转移。上述结果说明，CXCL14同样对乳腺浸润性癌的发生、发展有重要意义。相关性分析显示，P-ERK与CXCL14的表达呈负相关（r=-0.426），提示通过调控ERK信号通路可能对CXCL14的表达有调节作用，从而发挥抗肿瘤作用。

综上所述，乳腺浸润性癌中P-ERK呈过度表达，而CXCL14表达下调，且二者呈负性相关；二者对乳腺浸润性癌的生物学行为有预测价值，对乳腺浸润性癌的诊断有潜在的前景。