辛伐他汀对急性脑梗死患者血浆中PTEN、HIF-1α表达和预后的影响

宋晓英，冯 丽

(延安大学附属医院，陕西 延安 716000)

脑梗死又称为缺血性脑卒中，属于神经科常见疾病，是由多种原因造成脑供血突然不足而引起的局部脑组织出现缺氧、缺血，组织坏死等症状。该疾病多发于中老年人群，具有发病率高、致残致死率高的特点[1]。有研究显示[2]，脑梗死患者约占全部脑卒中的70%左右，且死亡率可达5%～15%，存活者致残率高达约50%，严重危害人们的身体健康及生存质量。急性脑梗死的发病机制极为复杂，目前普遍认为与动脉粥样硬化、脑血栓形成等有关[2]。静脉溶栓作为临床治疗该疾病的首选方案，具有一定的疗效，但部分患者在接受治疗后症状并未明显缓解，且病情并未好转，因此临床急需寻找一种溶栓效果佳的药物来提高治疗效果，改善患者预后[3]。辛伐他汀属于羟甲基戊二酰辅酶A(hydroxy methylglutaryl coenzyme A ,HMG-CoA)还原酶抑制剂，具有降低胆固醇的作用，已在抗血栓、降血脂、延缓动脉粥样硬化等方面被广泛应用[4]。基于此，本研究旨在探讨辛伐他汀对急性脑梗死患者血浆中10号染色体上缺失的磷酸酶与张力蛋白同源物基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)表达和预后的影响，以便为临床提供更多的选择治疗方案。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2017年4月至2019年4月延安大学附属医院接治的80例急性脑梗死患者作为研究对象，随机分为辛伐他汀组和对照组各40例。其中辛伐他汀组男25例，女15例；年龄48～75岁，平均(60.86±7.34)岁；病程：2～24 h，平均(7.87±2.54)h；高血压病17例，糖尿病8例，高脂血症14例。对照组男26例，女14例；年龄50～78岁，平均(61.14±7.27)岁；病程：1～23 h，平均(8.14±2.47)h；高血压病19例，糖尿病8例，高脂血症13例。两组性别、年龄、病程、合并高血压、糖尿病及高脂血症病例数等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 纳入与排除标准

诊断参照中华神经科学会制定的《各类脑血管疾病诊断要点》中关于急性脑梗死的相关规定[5]。

1.2.1 纳入标准 ①符合上述诊断要点，并经头颅CT或MRI检查确诊为急性脑梗死患者；②所有患者均在发病24 h内入院治疗；③能耐受本次药物患者。

1.2.2 排除标准 ①合并有严重心、肝、肾等疾病患者；②有其他脑部损伤，对本研究有干扰的患者；③合并恶性肿瘤、自身免疫性疾病或全身感染性疾病患者；④精神障碍，无法配合完成研究者。该研究所有患者均签署知情同意书，并经本院伦理委员会审核通过。

1.3 治疗方法

对照组：给予患者常规治疗，包括控制血糖、血压，进行营养支持，纠正水电解质失衡、调节酸碱平衡等，连续治疗2个月。辛伐他汀组：在常规治疗的基础上配合辛伐他汀治疗，患者口服辛伐他汀片(规格：20 mg，批准文号：国药准字J20180007，厂家：杭州默沙东制药有限公司)，20 mg/次，1次/d，连续治疗2个月。

1.4 实验试剂及仪器

Trizol试剂(货号：BYX1617P，规格：100 mL)于常州贝源鑫生物科技有限公司购买；逆转录试剂盒(货号：BPI01030)购于北京华大蛋白质研发中心有限公司；引物购于美国GeneCopoeia；实时荧光定量PCR试剂盒(货号：DEM202-50T)购于北京拜尔迪生物技术有限公司；ELISA试剂盒(货号：GU-032)来自上海古朵生物科技有限公司。美国罗氏Light Cyclerreg 96实时荧光定量PCR仪(型号：JM1966-018500)购自上海聚慕医疗器械有限公司。

1.5 观察指标

1.5.1 血浆PTEN mRNA表达水平 分别于治疗前后采集两组患者空腹状态下外周静脉血5.0 mL，离心15 min后(速率为3000 r/min)，分离血清，并置于-80℃低温下保存待检。采用实时荧光定量(Real-time Quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR)技术检测患者血清中PTEN mRNA水平。具体操作如下：①按照Trizol操作说明书提取细胞中总RNA；②取0.1 μg 总RNA，加入一定量逆转录酶、RNase抑制剂及缓冲液等，进行逆转录以合成cDNA，该过程反应条件为：42℃下50 min，95℃下5 min；③加入5.0 μL cDNA，1.0 μL正向和反向引物(如表1所示)，进行PCR扩增反应。循环反应条件如下：95℃下预变性5 min，95℃下变性20 s，50℃下退火40 s，72℃下延伸40 s，循环40次后，再于72℃下延伸5 min；④每个样品重复3次实验，采用2-△△Ct法计算血清PTEN mRNA的表达水平。

表1 PTEN及内参GAPDH引物

1.5.2 血清HIF-1α蛋白水平 取适量1.5.1中处理后的血清，采用酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked Immuno sorbent Assay，ELISA)检测患者血清中HIF-1α蛋白水平；上述检测操作均由专业实验人员严格依照说明书完成。

1.5.3 NIHSS评分 依据美国国立卫生研究院卒中量表(National Institute of Health stroke scale，NIHSS)评分标准对两组患者治疗前后的神经功能进行评价，总分42分，评分越高，表示患者神经功能损伤越严重。

1.5.4 预后情况 采用改良Rankin量表(Modified Rankin Scale,MRS)评估两组患者治疗后神经功能缺损程度，其中0～2分表示预后良好，3～5分表示预后不良，统计并分析两组患者治疗后的预后情况。

1.6 统计学方法

本研究所有数据均使用SPSS 24.0分析处理，用均值±标准差形式描述计量资料，行t检验；用百分率(%)描述计数资料，行χ2检验；P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者治疗前后血浆PTEN mRNA表达水平比较

治疗前，两组患者血浆PTEN mRNA表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后，两组患者血浆PTEN mRNA表达水平均显著升高(P<0.05)，且治疗后辛伐他汀组血浆PTEN mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.05，见表2)。

表2 两组患者治疗前后血浆PTEN mRNA表达水平比较

2.2 两组患者治疗前后血清HIF-1α蛋白水平比较

治疗前，两组患者血清HIF-1α蛋白水平比较差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后，两组患者血清HIF-1α蛋白水平均比治疗前显著降低(P<0.05)；且治疗后辛伐他汀组血清HIF-1α水平明显低于对照组(P<0.05，见表3)。

表3 两组患者治疗前后血清HIF-1α水平比较

2.3 两组患者治疗前后NIHSS评分比较

治疗前，两组患者NIHSS评分比较差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后，两组患者NIHSS评分均比治疗前明显降低(P<0.05)；且治疗后辛伐他汀组NIHSS评分明显低于对照组(P<0.05，见表4)。

表4 两组患者治疗前后NIHSS评分比较

2.4 两组患者治疗后预后情况比较

治疗后，辛伐他汀组预后良好率为87.50%(35/40)显著高于对照组67.50%(27/40)，两组比较差异具有统计学意义(P<0.05，见表5)。

表5 两组患者治疗后预后情况比较 [n(%)]

3 讨论

目前临床上主要使用他汀类药物来治疗脑梗死，包括阿托伐他汀、辛伐他汀等。有研究[6]显示，他汀类药物在治疗心脑血管疾病方面有明显优势，其对心脑血管具有一定的保护作用。辛伐他汀因具有多效性已成为临床治疗脑梗死应用最广泛的药物。它可有效控制HMG-CoA的活性，降低患者的血脂水平。此外，辛伐他汀还可明显降低缺血性脑卒中的发生概率，改善患者的预后。本研究中，辛伐他汀组预后良好率87.50 %，显著高于对照组的67.50 %，提示辛伐他汀能改善患者预后，减轻患者的神经功能损伤，这与前人研究一致[3]。

PTEN是目前为止发现的唯一具有蛋白脂酶和磷酸酶活性的基因，其在人类肿瘤中存在表达缺失或突变[7]。近来有研究显示[8]，该基因可调控某些炎症细胞，从而对炎症反应产生干预作用。本研究中，两组患者血浆PTEN mRNA表达水平均显著升高，且治疗后辛伐他汀组血浆PTEN mRNA表达水平明显高于对照组，表明辛伐他汀可有效纠正PTEN的表达水平，减轻机体炎症反应。HIF-1是一种异源二聚体，主要由HIF-1α和HIF-1β两个亚单位组成，是至今发现的唯一一个能在特定缺氧环境中发挥活性的转录因子[9]。有研究[9]显示，脑梗死患者外周血中HIF-1α水平会明显升高，其在此时对患者的机体起到保护作用，以减轻缺氧、缺血造成的损伤。本研究中，两组患者血清HIF-1α水平、NIHSS评分均比治疗前显著降低，且辛伐他汀组血清HIF-1α水平、NIHSS评分明显低于对照组，提示辛伐他汀治疗可有效地保护患者神经功能，使患者尽快恢复正常。

综上所述，辛伐他汀在急性脑梗死患者治疗中疗效显著，可有效地降低患者神经功能损伤程度，减轻机体炎症反应，改善患者预后，临床价值较高，值得推广应用。但本研究因纳入样本量有限，结果可能存在一定偏倚，尚待大样本量研究的验证。