2019年本院下呼吸道感染病原菌分布特征及耐药性分析*

蔡凤仪 陈路 罗杏云

（广东省清远市清城区人民医院内一科 清远 511500）

下呼吸道感染（LRTI）由病毒、细菌、支原体等微生物感染引起，是一类常见的感染性疾病，包括急、慢性支气管炎，肺炎、支气管扩张等，患者可有咳嗽、咳痰、胸闷气喘等症状[1]。临床治疗LRTI常采取抗感染及对症支持治疗，但随着抗生素不断升级换代，广谱抗生素在临床应用日渐广泛，不合理用药现象越来越普遍，不仅造成病原菌分布变化，且细菌耐药问题日趋严重，抗生素治疗效果大打折扣[2]。分析LRTI病原菌分布，检测细菌耐药情况，掌握耐药动向，对临床合理用药意义重大。本次研究对我院LRTI患者痰标本样本进行细菌培养及药敏试验，明确我院LRTI患者病原菌分布特征及耐药性情况。现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料收集我院2019年1～12月收治的LRTI患者痰液样本，选取其中阳性标本635例。其中男432例，女203例；年龄18～73岁，平均（47.37±11.67）岁；急性支气管炎284例，慢性支气管炎266例，肺炎72例，支气管扩张13例。纳入标准：经临床及实验室检查符合LRTI诊断标准[3]；入组前48 h内未使用抗生素者。排除标准：合并肿瘤或血液病患者；合并其他严重感染者；临床资料不全者。

1.2 样本采集方法可自行咳痰患者，嘱充分清洁口腔后取清晨首次深痰1 ml以上；不能自行咳痰患者，由医护人员使用生理盐水充分清洁口腔后，采用机械吸痰收集痰标本；气管插管患者采用吸痰器收集痰液样本。

1.3 细菌培养将收集到的痰液样本接种至血琼中平板培养，并涂片染色于光镜下检查，每低倍镜下白细胞数＞25个、鳞状上皮细胞小于10个，或两者比例＜2.5:1，即为合格标本。培养24 h后使用DL-96A全自动微生物生化鉴定仪（珠海迪尔生物工程有限公司）进行鉴定。

1.4 药敏试验采用世界卫生组织推荐的K-B纸片扩散法进行药敏试验，将具有一定含量抗菌药物的滤纸放置于培养基表面，随着药物扩散，药物浓度在纸片周围形成梯度差。致病菌在抗菌浓度范围内不能生长，因此形成抑菌圈，根据抑菌圈大小可测得细菌对抗菌药物敏感度。使用铜绿假单胞菌ATCC27853、金黄色葡萄球菌ATCC25923、肺炎克雷伯菌ATCC700603进行质量控制，每周进行1次。

1.5 观察指标观察LRTI痰液阳性标本病原菌分布情况及耐药性。

1.6 数据分析采用WHONET5.3数据分析软件进行统计分析，计数资料以%表示。

2 结果

2.1 LRTI病原菌分布情况635份LRTI痰液样本中，共检出723株病原菌，其中革兰氏阴性菌共521株，占比72.06%。当中数量较多的为大肠埃希菌217株（30.01%）、铜绿假单胞菌123株（17.01%）、肺炎克雷伯菌52株（7.19%）；革兰氏阳性菌202株，占比27.94%，以金黄色葡萄球菌（96株，13.28%）、凝固酶阴性葡萄球菌（59株，8.16%）为主。见表1。

表1 LRTI病原菌分布情况（n=723）

2.2 常见革兰氏阴性菌耐药情况本研究经药敏试验显示，在革兰氏阴性菌中，大肠埃希菌对头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、亚胺培南及美洛培南等药物耐药率均低于25%，对哌拉西林、头孢呋辛耐药率高于60%；铜绿假单胞菌对头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、亚胺培南、阿米卡星、环丙沙星耐药率低于25%，但对于头孢噻肟、头孢曲松、头孢呋辛耐药率高达100%；肺炎克雷伯菌对头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、亚胺培南、美洛培南耐药率低于20%。见表2。

表2 革兰氏阴性菌耐药情况

2.3 常见革兰氏阳性菌耐药情况本研究经药敏试验显示，革兰氏阳性菌中金黄色葡萄球菌对多西环素、环丙沙星耐药率低于15%，凝固酶阴性葡萄球菌对试验药物均表现出较高耐药率，粪肠球菌则对头孢哌酮、亚培安南、复方新诺明耐药率为0%。见表3。

表3 革兰氏阳性菌耐药情况

3 讨论

临床治疗LRTI主张及早予以抗生素，以控制感染。但近年来随着医疗技术的发展，抗生素不断升级换代，临床应用也越来越广泛，抗生素不合理用药、滥用等现象也随之加重，不仅对病原菌种类分布及构成产生影响，更加速了细菌耐药性，严重降低了抗生素治疗效果及使用寿命[4]。因而，临床治疗应充分考虑患者病原菌分布情况及耐药情况，规范、合理用药，实现药物最大程度利用。

邢艳利等[5]研究报道LRTI病原菌分布多以革兰氏阴性菌为主，本研究结果发现，本院LRTI病原菌中革兰氏阴性菌占比72.06%，其中以大肠埃希菌株数最多，占比30.01%，其次为铜绿假单胞菌占比17.01%，肺炎克雷伯菌占比7.19%，与其结论类似。铜绿假单胞菌可生存于各类潮湿环境，且临床对于插管、导管等侵袭性治疗方式应用频繁，导致铜绿假单胞菌成为最为常见的条件致病菌[6]。此外，本研究结果中大肠埃希菌及阴沟肠杆菌也具有较高检出率，临床治疗应予以重视。薛继红[7]的研究结果显示，LRTI病原菌中，革兰氏阴性菌检出率为29.9%，以金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌为主。但本研究结果显示，本院LRTI患者病原菌中革兰氏阳性菌检出率为27.94%，以金黄色葡萄球菌为主，占13.28%，与前人研究结果稍微有所出入，分析认为菌株来源于不同地区，抗生素用药习惯及选择压力不同，导致病原菌种类构成比变迁有所差异[8～9]。

本研究经药敏试验发现，大肠埃希菌对头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、亚胺培南及美洛培南耐药率均低于25%，对哌拉西林、头孢呋辛、耐药率均高于60%；铜绿假单胞菌对头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、亚胺培南、阿米卡星、环丙沙星耐药率低于25%，但对头孢噻肟、头孢曲松、头孢呋辛耐药率高达100%。CHINET铜绿假单胞菌耐药性监测报道，铜绿假单胞菌对阿米卡星敏感度最高，与本研究结果相似[10]。阿米卡星对大部分氨基糖苷类钝化酶稳定性较高，且临床应用较少，因而药敏试验结果敏感度较高[11]。但需重视的是，铜绿假单胞菌可在使用抗生素后获得性耐药，因此临床用药应在治疗3 d后再次进行药敏试验[12]。胡向国等[13]研究报道，大肠埃希菌对亚胺培南、庆大霉素耐药率较高，本药敏试验结果亦显示，肺炎克雷伯菌对头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、亚胺培南、美洛培南耐药率低于20%，这表明头孢哌酮/舒巴坦及头孢他啶、亚胺培南、美洛培南等药物对肺炎克雷伯菌具有较高抗菌活性。该菌可因外膜孔道蛋白丢失、青霉素结合蛋白改变等因素导致对如亚胺培南等碳青霉烯类药物产生耐药性，而舒巴坦可抑制不动杆菌产生的β-内酰胺酶，具有较高的杀菌作用[14]，其耐药性表现与姚毅[15]的研究结果一致。

金亮等[16]的研究结果显示，金黄色葡萄球菌对除万古霉素外的其他抗生素均有不同程度耐药性。本药敏试验结果也表明，金黄色葡萄球菌对多西环素、环丙沙星耐药率低于15%，凝固酶阴性葡萄球菌对试验药物均表现出较高耐药率，粪肠球菌则对头孢哌酮、亚培安南、复方新诺明等药物耐药率为0%。前者对β-内酰胺类抗生素产生耐药主要由于β-内酰胺类抗生素作用靶位改变，与抗生素亲和力降低[17]。

综上所述，我院LRTI病原菌以革兰氏阴性菌为主，且常用抗生素耐药率较高，医院管理应注重提高医生规范化用药意识，避免盲目用药，倡导使用抗生素治疗前进行细菌培养基药敏试验，合理选择抗生素治疗。