特发性少弱精子症Th1/Th2细胞因子与自身抗体表达水平及临床意义

王海旭 张建芳 李砚

(空军军医大学西京医院妇产科生殖中心,陕西 西安 710032)

根据世界卫生组织既有定义，男性不育症是指育龄夫妇双方在未采取任何避孕措施下，婚后同居后1年以上，由男方原因导致女性不孕的患者[1]。相关流行病学调查显示[2]，全球范围内约有20%的夫妻存在生育困难的问题，其中男性不育症占比50%左右。特发性少弱精子症是男性不育症的常见类型，由于该病发病机制尚未明确，临床主要采用经验性治疗，缺乏有效的治疗手段，因此探讨该病的致病因素具有重要意义[3-4]。有研究[5]发现，免疫机制在男性不育症中发挥着重要作用，辅助T细胞可分化出Th1、Th2两种亚型，正常情况下，机体Th1/Th2处于动态平衡，一旦两者失衡，则会出现免疫功能紊乱。因此本研究主要探讨特发性少弱精子症Th1/Th2细胞因子与自身抗体的表达水平及临床意义，具体报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 于2018年1月至2020年1月期间，选取于我院就诊的特发性少弱精子症患者150例为观察组，入选标准：(1)符合《人类精液检查与处理实验室手册(第5版)诊断标准》[6]；(2)睾丸体积正常，无精索静脉曲张等干扰睾丸生精功能的疾病；(3)黄体生成素、卵泡雌激素等生殖激素均在正常范围内；(4)精子浓度<15×106/mL且存活率<40%，经巴氏染色正常形态精子百分率≥4%；(5)近6个月未使用生精药物治疗，生活作息规律。排除标准：(1)明确其他因素所致不育者；(2)合并严重免疫、内分泌系统疾病者；(3)畸形精子症；(4)极重度、少、弱精子症；(5)合并生殖系统感染；(6)使用激素、化疗等药物治疗者。根据精子浓度分为，轻、中度组(n=95)：精子浓度(5～15)×106/mL；重度组(n=55)：精子浓度(1～5)×106/mL。另选取同期于我院就诊的精液检测正常的男性80名为健康对照组。本研究已通过我院医学伦理委员会批准。

1.2方法 收集所有受检者精液标本，约2～6 mL，37℃水浴箱孵育至精液液化，采用彩色精子质量检测系统分析精液。将精液离心后，直接取上清检测不同细胞因子水平，Th1细胞因子主要包括白介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-ɑ)、干扰素-γ(IFN-γ)；Th2细胞因子包括白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)。采用酶联免疫吸附法检测抗人绒毛促性腺素抗体(AhCGAb)、抗精子抗体(AsAb)，操作严格遵循试剂盒说明书进行。

2 结 果

2.1三组一般资料比较 三组年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。三组精子浓度、精子总数比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 三组一般资料比较

2.2三组细胞因子水平比较 三组IL-2、TNF-ɑ、IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-10水平比较差异有统计学意义(P<0.05)，重度组上述细胞因子水平明显高于轻中度组，轻中度上述细胞因子水平明显高于对照组(P<0.05)。见表2。

表2 三组细胞因子水平比较

2.3三组自身抗体阳性表达率比较 三组组间AhCGAb、AsAb抗体阳性表达率比较，差异无显著性(P>0.05)。重度组AhCGAb、AsAb抗体阳性表达率明显高于轻中度组，轻中度组AhCGAb、AsAb抗体阳性表达率明显高于对照组(P<0.05)。见表3。

表3 三组自身抗体阳性表达率比较[n(%)]

3 讨 论

特发性少弱精子症患者临床主要表现为少精、弱精或畸形精子等，多项研究认为该病的发生与长期应激环境、内分泌紊乱、基因缺陷等多种因素有关[7-8]，但具体发病机制尚不明确，临床以经验性治疗为主，总体疗效不甚理想，因此分析特发性少弱精子症的致病因素具有重要意义。

既往研究[9]发现，某些病理状态能够针对生精细胞的自身免疫反应，进而诱导自身免疫性睾丸炎和附睾炎，损伤精子发生，进一步产生抗精子抗体，提示免疫机制在特发性少弱精子症的发生、发展中发挥着重要作用。P.Pöllänen等[10]学者指出，Sertoli和Leydig细胞可分泌转化生长因子β,而转化生长因子β，可抑制睾丸内移植物的免疫排斥，同时分泌出转化生长因子β同源物，抑制睾丸免疫应答，不利于维持睾丸免疫豁免环境。目前特发性少弱精子症与机体免疫应答的相关性研究较少。辅助性T细胞可分化出Th1、Th2两种亚型[11-12]。其中Th1细胞主要分泌IL-2、TNF-ɑ、IFN-γ等细胞因子，主要参与细胞免疫应答过程，IL-2是机体内功能最为强大有效的T细胞生长因子，可促进几乎所有亚型的T细胞增殖、活化[13]；IFN-γ与IL-2作用相似，可促进多种细胞表达生物相容复合物体抗原I类和II类分子发挥抑制病毒复制和抑制Th2细胞分化增殖的作用[14]。而Th2细胞以分泌IL-4、IL-6、IL-10为主，其中IL-6在机体免疫调节和抵御外来侵袭中发挥着重要作用。IL-4对于B细胞、T细胞都有免疫调节作用；IL-10是典型的抗炎因子，可通过抑制机体固有免疫和适应性免疫功能进而降低机体免疫反应[15]。有研究[16]发现，机体病理状态下，高水平IL-6可直接诱导生精细胞的凋亡，而IL-10会通过抑制实验性自身免疫性睾丸炎进而破坏睾丸组织结构与精子发生。既往研究表明[17]，机体在正常情况，Th1/Th2处于动态平衡，两者失衡则容易发生免疫功能紊乱。本研究中，重度组、轻中度组精子浓度、精子总数明显低于对照组，重度组IL-2、TNF-ɑ、IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-10明显高于轻中度组和对照组，提示Th1/Th2细胞因子水平与特发性少弱精子症的发生发展存在相关性，分析原因可能是过度增加Th1/Th2细胞因子可能会引发慢性隐匿性睾丸炎症，当病情进展时，炎性多肽会通过刺激内皮细胞进而分泌更多的Th1/Th2细胞因子，大量的白细胞可能会透过受损的血-睾屏障，损害睾丸微环境，进而损害精子功能和精子数量，造成精液质量的下降[18]。

本研究结果显示，重度组AhCGAb、AsAb抗体阳性表达率明显高于轻中度组和对照组，提示自身抗体水平与特发性少弱精子症的发生发展存在相关性，有研究[19]发现，免疫抗体AsAb与多项不育症关系密切，当免疫抗体AsAb能力较强的状态下，机体排斥作用增强，影响精子前向运动，进而干扰精子代谢和获能，是影响患者不育的重要原因。

综上所述，Th1/Th2细胞因子与自身抗体表达水平与特发性少弱精子症的发生发展具有相关性，是影响男性不育的重要因素，但本研究纳入样本量较少，具体机制有待进一步探讨。