难治性肾病综合征遗传背景检测及其临床应用

于春杰

（吉林省四平市中心人民医院，吉林 四平 136000）

0 引言

难治性肾病综合征属于肾脏疾病类型，临床多表现为大量尿蛋白、低血浆白蛋白等，实施药物治疗效果相对较差。根据患者表现出的特征分型为：激素耐药型、依赖型及频复发，由于难治性患者难以及时治疗，导致患者的肾脏损害进展较快，从而进展为终末期肾病。临床有关研究证实遗传变异属于难治性肾病综合征患者发生的关键因素之一，多个基因变异均容易造成功能及疗效的影响。本研究将对难治性肾病综合征患者应用遗传背景检测及价值进行分析，实验内容如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选择2019 年4 月至2020 年4 月本院肾脏内科收治的25 例难治性肾病综合征患者为观察组，选择同期住院的25例普通肾病综合征患者为对照组，均进行基因检测。对照组男15 例，女10 例，年龄为15～72 岁，平均（28.43±2.56）岁。观察组男16 例，女9 例，年龄为12～70 岁，平均（48.32±8.56）岁，两组研究对象的资料无统计学意义（P>0.05）。

诊断标准：患病儿童符合《儿童常见肾脏疾病诊治循证指南（一）（三）》[2-3]中关于原发性难治性肾病综合征的诊断标准：经临床检测出大量蛋白尿>50 mg/kg，血浆白蛋白<25 g/L 且表现为高度水肿、高血脂症；激素耐药型患者表现出应用泼尼松治疗4 周进行尿蛋白检测呈阳性；激素依赖型患者表现出连续性的2 次药物停用或减量出现复发迹象；频复发患者表现出治疗病程中6 个月内出现复发次数高于2 次。患病成人符合《中国成人肾病综合征免疫抑制治疗专家共识》[4]中的诊断：经临床检测出大量蛋白尿>3.5 g/d，血浆白蛋白<30 g/L 且表现为高度水肿、高血脂症。

纳入标准：（1）符合上述原发性难治性肾病综合征诊断标准及分类标准；（2）患者年龄10～75 岁；（3）患者或监护人对本研究知情且清楚检测过程。

排除标准：（1）患者为近亲结婚；（2）合并乙型相关性、狼疮肾炎、骨髓瘤性等继发性因素导致难治性肾病综合征患者；（3）患者或监护人的依从性较差。

1.2 检测方法

采集患者的3 mL 外周血，置于EDTA 抗凝管中静置备用。应用DNA 提取试剂盒（型号：天根生化科技有限公司）进行基因组DNA 的提取，按照说明书进行严格操作，加入缓冲液、漂洗液等物质后待测。应用PCR 扩增和DNA 二代测序法检测两组的基因，所用PCR 仪、LA Taq 酶、dNTPs 混合物均来源于日本TaKaRa 公司。选择24 例患者对肾病综合征的相关目的基因（NPHS1、NPHS2、WT1 等）进行肾病Panel 检测，1 例患者行全外显子基因测序。

1.3 观察指标

基因突变检测：对比两组的基因检测结果。

预后质量：两组均根据基因检测结果进行个性化治疗，观察两组的预后质量。

临床疗效标准：完全缓解（CR）-24 h 尿蛋白定性为阴性，血生化检测处于正常，肾功能正常；部分缓解（PR）-24 h 尿蛋白水平有明显改善，但未完全恢复正常；未缓解（NR）-4 h 尿蛋白水平未得到改善，下降幅度低于基线水平的50%；复发：经过治疗后又出现明显症状。预后质量=（CR+PR）/ 总例数×100%。

1.4 统计学方法

2 治疗结果

2.1 对比两组患者的基因检测情况

观察组的基因突变率（36.00%）明显高于对照组（8.00%），P<0.05，差异有统计学意义，见表1。

表1 对比两组患者的基因突变检测情况[n(%)]

2.2 对比两组患者的预后质量情况

对照组的预后质量与观察组差异较小，无统计学意义（P>0.05），如表2。

表2 两组的预后质量情况对比[n(%)]

3 讨论

肾病综合征患者临床主要治疗以激素用药为主，可以有效缓解临床高尿蛋白、低血浆白蛋白等相关症状，但是部分患者存在特异性表现，经过长期治疗仍然未得到缓解，或对激素产生依赖，停药或降低剂量出现复发或已经产生明显疗效但随后半年内出现2 次及以上高频复发[5-6]。由于该病症久治不愈容易产生严重感染或其他严重并发症，导致患者进展为终末期肾病的概率大大增加。因此有必要对肾病综合征患者的发病机制进一步研究，本研究显示难治性肾病综合征患者出现多个遗传基因的变异，且预后质量效果较差。

通过基因诊断结果采用对症的个性化治疗方案，阻断患者的终末期肾病进展，减少频繁更换药物或服用不对症的药物，从而引发患者的耐药性或强烈的不良反应。此外基因检测可以有效预测疾病预后，提前做好肾脏移植的准备。本研究结果显示，相较于对照组，观察组的基因突变情况明显更高（P<0.05），但预后质量明显无明显差异（P>0.05），可能是由于难治性患者经过基因Panel、全外显子组测序等方式可以有效检测出致病基因以及新致病基因，从而进行特异性对症治疗，降低患者的进展风险，与一般患者的预后质量相差不大[7-8]。

综上所述，难治性肾病综合征患者进行遗传背景检测，可以了解患者的发病机制，从而制定对症的治疗方案，提高临床治疗效果，临床应用价值高。