液相色谱-串联质谱法对食品中氯吡脲 残留的测定

◎ 牛 彦

（1.忻州市综合检验检测中心，山西 忻州 034000；2.山西省杂粮产品质量检验中心，山西 忻州 034000；3.忻州市检验检测研究院，山西 忻州 034000）

氯吡脲一般指氯吡苯脲，具有细胞分裂素活性，广泛用作农业、园艺和果树生长调节剂[1]。氯吡脲在食品中的痕量残留会对人体的神经系统产生危害，能造成儿童脑炎、发育不良等。因此对食品中氯吡脲残留进行检测显得尤为重要。

目前，用于氯吡脲的检测方法主要有高效液相色谱法[2-3]、气相色谱法[4-5]、液相色谱-串联质谱法[6]等。其中液相色谱-串联质谱法具有灵敏度高、准确性好等优点。而在文献[7]中，主要涉及水果中氯吡脲残留量的测定，对其他食品中氯吡脲残留量的测定鲜有报道。因此，本文通过优化质谱条件，采用液相色谱-串联质谱法对结球甘蓝、小麦粉和茶叶中氯吡脲的残留量进行测定，并对其在三者中的基质效应进行了 对比。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

AB SCIEX Triple Quad5500液相色谱-质谱联用仪；GT16-3型高速台式离心机（北京时代北利离心机有限公司）；DMT-2500多管漩涡混合仪（杭州米欧仪器有限公司）。

标准物质：甲醇中氯吡脲溶液标准物质[坛墨： 1 000 μg·mL-1（GBW（E）084929a）]，4 ℃下保存。

乙腈、甲酸均为色谱纯，水为超纯水。2 mL QuEChERS离心管（上海安谱实验科技股份有限公司），无水硫酸镁，分析纯（上海麦克林生化科技有限公司）；氯化钠，分析纯（天津市大茂化学试剂厂）。

1.2 样品处理

结球甘蓝：准确称取10.00 g结球甘蓝置于50 mL离心管中，加入10.0 mL乙腈，涡旋3 min，向离心管中加入4.00 g无水硫酸镁和1.00 g氯化钠，涡旋 1 min；然后4 000 r·min-1离心5 min，取1.5 mL上清液带净化。

小麦粉：准确称取5.00 g小麦粉置于50 mL离心管中，加入10.0 mL水，涡旋30 s使试样浸润；加入10.0 mL乙腈，涡旋3 min，向离心管中加入5.00 g 氯化钠，涡旋1 min；然后4 000 r·min-1离心5 min，取 1.5 mL上清液带净化。

茶叶：称取2.00 g茶叶，提取方式与小麦粉相同。

净化：将1.5 mL上清液放入2 mL QuEChERS离心管中；涡旋30 s，在5 000 r·min-1离心5 min，取上清液过0.22 μm微孔滤膜，待测。

1.3 计算公式

式中：X-试样中被测组分含量，mg·kg-1；c-从标准工作曲线得到的试样溶液中被测组分的浓度，ng·mL-1；V-试样溶液定容体积，mL；m-试样的质量， g；c0-空白溶液中被测组分的浓度，ng·mL-1。

1.4 仪器条件

（1）色谱条件。色谱柱：Kinetex®2.6 μm Biphenyl 100 Å LC Column 100×3 mm；柱温：40 ℃；进样量：5 µL。流动相：A为0.1%甲酸水，B为乙腈，流速及梯度比例见表1。

表1 流速及流动相梯度比例表

（2）质谱条件。在正离子扫描模式（Q1 MS）下，对氯吡脲的质谱参数及去簇电压（DP）、碰撞能量（CE）进行优化，碰撞气为60.05 kPa，离子源温度为550 ℃，具体见表2。

表2 质谱条件及参数表

2 结果与分析

2.1 线性范围、基质效应

将氯吡脲储备液1 000 µg·mL-1用甲醇分两次稀释成100 ng·mL-1的中间液，分别吸取10 µL、20 µL、 50 µL、100 µL、200 µL和500 µL中间液，分别用结球甘蓝、小麦粉、茶叶空白基质定容至1 mL，配制成1 ng·mL-1、2 ng·mL-1、5 ng·mL-1、10 ng·mL-1、20 ng·mL-1和50 ng·mL-1基质工作曲线。

图1为茶叶、结球甘蓝、小麦粉、溶剂中氯吡脲的标准曲线及相关系数。从图中可以看出，茶叶、结球甘蓝、小麦粉、溶剂中氯吡脲的标准曲线方程分别为y=2.377 31×105x-6.491 15×104、y=3.138 38×105x- 3 440.958 93、y=3.386 14×105x+1.390 76×105、y= 5.233 41×105x+1.490 98×105；相关系数分别为0.999 45、 0.999 83、0.999 61、0.999 04。可 以看 出 氯 吡 脲 在 1～50 ng·mL-1范围内线性关系良好。表明采用上述优化的质谱条件以及仪器条件可对茶叶、结球甘蓝、小麦粉、溶剂中氯吡脲进行检测。

图1 结球甘蓝、小麦粉、茶叶、溶剂中氯吡脲的标准曲线及相关系数图

根据基质因子的计算公式：MF=K1/K2，即溶剂标准曲线斜率K2和基质标准曲线斜率K1的比值[8]。计算得到氯吡脲在茶叶、结球甘蓝、小麦粉中的MF分别为0.45、0.60、0.65，可以看出，氯吡脲在茶叶、结球甘蓝、小麦粉中的MF均小于0.8，可认为均具有较强的基质抑制效应，其中氯吡脲在茶叶中的基质抑制效应最强。

2.2 回收率及精密度

以阴性结球甘蓝、小麦粉、茶叶为测试样品，氯吡脲的加标水平分别为2 µg·kg-1、5 µg·kg-1、20 µg·kg-1，每个水平做6个平行样，外标法定量，检测结果见表3。

从表3可以看出，在2 µg·kg-1、5 µg·kg-1、20 µg·kg-1的加标水平下，结球甘蓝、小麦粉、茶叶的回收率分别为81%～86%、78%～112%、67%～83%；相对标准偏差（n=6）分别为2.14%～3.24%、4.56%～6.23%、1.93%～6.88%。采用上述优化的质谱条件及仪器条件可使结球甘蓝、小麦粉、茶叶中氯吡脲的定量下限达到2 µg·kg-1，满足GB 23200.110—2018（定量限为10 µg·kg-1）中测定要求。

表3 氯吡脲在结球甘蓝、小麦粉、茶叶中加标回收率及精密度表

3 结论

本文建立了采用液相色谱-串联质谱法对食品中氯吡脲残留量测定的检测方法，并对氯吡脲在结球甘蓝、小麦粉和茶叶中的基质效应进行了研究，发现氯吡脲在3种基质中均具有较强的基质抑制效应，在茶叶中的基质抑制效应最强。通过对质谱条件优化，使得应用于结球甘蓝、小麦粉和茶叶等食品检测时，回收率、精密度均能满足食品残留分析要求。