新型吲哚类SIRT2 抑制剂的设计、合成及生物活性研究

王丽姣，宋 陈

（西华大学食品与生物工程学院，四川 成都 610039）

组蛋白修饰是蛋白翻译后修饰的重要修饰方式之一，包括乙酰化、甲基化、磷酸化修饰等。组蛋白乙酰化修饰受组蛋白乙酰化酶（HAT）和组蛋白去乙酰化酶（HDAC）共同调控，维持正常的生理功能。Surtuin（SIRT）蛋白，共包含7 种亚型，即SIRT1-SIRT7，是一种非典型去乙酰化酶，其催化底物去酰化机制与典型HDAC 不同，依赖NAD+的直接参与[1−3]。其中SIRT2 是一种存在于细胞质，但在有丝分裂期间可以穿梭于细胞核的重要亚型。有研究[4−6]表明，SIRT2 的异常与神经退行性疾病的发生、发展密切相关，因此，该靶点可作为相关疾病的潜在治疗靶点，SIRT2 抑制剂有望用于相应疾病的治疗。

1 已报道的SIRT2 抑制剂

许多科研小组报道了一系列的SIRT2 小分子抑制剂[7−8]。如图1 所示，根据其结构特征可将SIRT2 抑制剂分为多肽类底物类似物及非肽类小分子抑制剂两大类。多肽类抑制剂可能存在理化性质不好，易被代谢等成药性相对较差等缺点。非肽类小分子抑制剂又可分为以下9 类：烟酰胺类、羟基萘醛类、3-苯磺酰胺基苯基类、吲哚衍生物类、3,5-二取代-1,2,4-噁二唑、苯并吡喃酮、磺酰胺及磺酸类、氨基酸类、酰胺类等[9−10]。

图1 已报道的部分SIRT2 抑制剂结构及IC50 值

目前，对SIRT2 小分子抑制剂的研究报道虽然较多，但大部分分子都面临着各种各样的问题，真正具有高活性、高选择性及理化性质好的SIRT2小分子抑制剂分子却较少。

本文前期研究获得了一个具有潜在的SIRT2抑活性的化合物N-（1-苄基-1H-吲唑-4-基）-2-（萘-1-基氧基）乙酰胺（14a），在100 和10 μmol·L−1浓度下，抑制率分别为70%和36%。本文从化合物14a 出发进行结构修饰，采用生物电子等排体原理，设计并合成了一系列新型吲哚类新骨架的目标化合物。

2 吲哚类目标化合物的设计

前期研究发现，当Linker 为2-氧基-乙酰胺，且芳香环为萘环时，化合物（14a）对SIRT2 的抑制活性有显著提高，在100 和10 μmol·L−1与阳性对照4 活性相当（73%，31%），抑制率分别为70%和36%。因此，本文在化合物14a 基础上进行改构，萘环和Linker2-氧基乙酰胺继续保留，根据生物电子等排体原理将吲唑环的2 位N 原子用C 原子代替而成吲哚环，然后再在吲哚环1-N 上引入疏水基团，从而设计合成了一系列新型吲哚类目标化合物（见图2）。

图2 目标化合物的设计

3 目标化合物的合成

吲哚类目标化合物的合成路线如图3 所示。由逆合成分析可知，合成目标化合物的其中一个原料为4-硝基吲哚，其与不同取代基的苄溴发生取代反应，与萘氧基乙酸缩合成酰胺，再将硝基还原成氨基得到不同取代胺的中间体。各种取代胺的中间体与另一个原料萘氧基乙酸缩合成不同的酰胺，最终得到不同的目标化合物。该设计路线不仅显著降低了实验成本，还提高了实验效率。因此，本文的合成路线即为先合成两个片段（即羧酸片段和氨基片段），再将其拼合成目标化合物。合成羧酸片段是用1-萘酚（19）和2-溴乙酸乙酯（20）在碳酸钾作敷酸剂，乙腈作溶剂下发生亲核反应得到化合物21，再将化合物21 在乙醇和水，碱性环境下水解生成中间体片段1-萘氧基乙酸(22)。4-硝基吲哚（23）与不同结构的疏水基团(苯环，带有取代基苯环，噻吩)24 同样在K2CO3作敷酸剂，N,N-二甲基甲酰胺（DMF）作溶剂下发生亲核反应得到化合物25，再经铁粉将硝基还原成氨基分别得到化合物26。

图3 吲哚类目标化合物27f-27o 的合成路线

羧酸化合物22 和游离的氨基化合物26 在2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯（HATU），N,N-二异丙基乙胺(DIEA)，二氯甲烷（DCM）中缩合成最终目标化合物27f-27o。结构式如表1 所示。

最终合成了10 个目标化合物的结构如表1 所示，所有的化合物均通过了柱纯化或重结晶并用HPLC 鉴定了其纯度，纯度在95%以上，达到了测试生物活性的纯度要求，所有的目标化合物都进行1H-NMR、13C-NMR 和MS 的结构表征。

表1 化合物27f-27o 的结构

4 抑制活性测试与构效关系讨论

化合物27f-27o 的结构式如图4 所示。吲哚类化合物27f-27o 对SIRT2 的抑制活性数据分析见表2。

表2 吲哚类化合物27f-27o 对SIRT2 的抑制活性

图4 化合物27f-27o

合成的10 个新分子对SIRT2 蛋白在高浓度下有一定的抑制效果，但总体的抑制率较低，均没有超过对照化合物14a。其中，所有化合物中抑制效果较好的是化合物27m 苯环间位溴双取代的结构，其在10 μmol·L−1下其抑制率只有42%，在100 μmol·L−1下为56%，可能是溴原子的电负性降低了苯环电子云密度，与SIRT2 的静电效应增强使得结合更牢固。其次是无取代的苯环的结构，其在10 μmol·L−1下其抑制率只有32%，在100 μmol·L−1下能达到55%，其余苯环上的单取代抑制率均在50%以下，噻吩取代的结构抑制率更低，可能仍然是共轭结构电子云效应以及取代基的诱导效应致使无法与SIRT2 蛋白结合或者结合不稳定。

5 合成实验操作及化合物表征数据

5.1 N-（1-（4-氟苄基）-1H-吲哚-4-基）-2-（萘-1-基氧基）乙酰胺（27f）的合成及表征

首先将1-萘酚19(10 g,69 mmol)用乙腈(30 mL 溶解在圆底烧瓶中，依次加入碳酸钾（28.6 g,207 mmol）、2-溴乙酸乙酯20（15 mL,138.7 mmol），加毕后升温至80 ℃下回流反应2 h 左右。经TLC检测反应完全后，过滤出不溶性杂质，浓缩滤液，经快速柱层析（PE）得白色雪花状固体化合物21。将中间体21（6.3 g,27.3 mmol）用乙醇（15 mL）和水（5 mL）溶解后，加入氢氧化钠（3.3 g,81.9 mmol），加完后继续室温下搅拌3 h 左右。经检测反应完全后，旋干乙醇溶剂，剩余水溶剂用稀盐酸调至弱酸性(PH=5 左右)，此时析出固体，将其过滤，滤饼经真空干燥箱干燥后得到白色固体化合物22。两步收率40%。然后将4-硝基吲哚23（215 mg,1.32 mmol）、对氟溴苄24f（500 mg,2.65 mmol）、碳酸钾（546 mg,3.96 mmol）称入到反应瓶中，用N,N 二甲基甲酰胺DMF（10 mL）溶解后，升温至80 ℃下回流反应2 h 左右。经TLC 检测反应完全后加入水(100 mL)，然后用乙酸乙酯萃取（50 mL×3），合并有机相，经无水硫酸钠干燥后，浓缩，经硅胶柱色谱分离（PE 与EA 体积比为50∶1），得黄色固体中间体25f。将中间体25f（445 mg,1.34 mmol）用乙醇（8 mL）和水(4 mL)溶解在反应瓶中，一次性加入还原铁 粉（376 mg,6.72 mmol）、氯 化 铵（36 mg,0.67 mmol），加毕后升温至80 ℃下回流1 h 左右。经TLC 检测反应完全后，趁热过滤出不溶性杂质，旋干滤液中的乙醇，加入少量水后用饱和碳酸氢钠溶液将PH 调至8，然后用乙酸乙酯萃取（30 mL×3）,合并有机相，用无水硫酸钠干燥后，减压浓缩旋干后得红棕色固体化合物26f。将中间体22（151 mg，0.75 mmol）和中间体26f(150 mg,0.62 mmol)称入反应瓶中，用乙腈溶解后依次加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯（HATU）（283 mg,0.75 mmol）,N,N-二异丙基乙胺（DIEA）(205 μL,1.24 mmol)，加毕后继续常温下搅拌反应3 h 左右。经TLC 检测反应完全后，旋干溶剂，加水和乙酸乙酯萃取（30 mL×3）,合并有机相并用无水硫酸钠干燥后，减压浓缩，经硅胶柱色谱分离（PE∶EA 体积比为2∶1），得目标化合物27f，红色固体，总收率为40%，纯度为98.1%。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6) δ 9.93 (s,1H),8.41-8.39 (m,1H),7.96 —7.94 (m,1H),7.66 —7.56 (m,4H),7.53—7.46 (m,2H),7.32—7.27 (m,3H),7.20—7.10(m,3H),7.05 (d,J=7.6 Hz,1H),6.73 (d,J=2.8 Hz,1H),5.45 (s,2H),5.09 (s,2H) ppm.13C NMR (101 MHz,DMSO-d6) δ 166.86,163.11,160.69,153.96,136.99,134.87,134.61,130.53,129.52,128.69,127.93 1,27.04 1,26.52 1,25.87 1,25.41 1,22.31 1,21.96 1,21.72,121.07,115.88,115.66,112.00,107.31,105.99,99.48,67.99,48.95 ppm.HRMS:m/z calcd for C27H21FN2O2[M+H]+425.1660,found 425.1656。

5.2 N-（1-（4-氯苄基）-1H-吲哚-4-基）-2-（萘-1-基氧基）乙酰胺（27g）的合成及表征

将4-硝基吲哚23（197 mg,1.20 mmol）、对氯溴苄24g（500 mg,2.40 mmol）、碳酸钾（497 mg,3.60 mmol）称入到反应瓶中，用N,N 二甲基甲酰胺DMF（10 mL）溶解后，升温至80 ℃下回流反应2 h 左右。经TLC 检测反应完全后加入水(100 mL)，经乙酸乙酯萃取（50 mL×3），有机层经无水硫酸钠干燥后，浓缩，经硅胶柱色谱分离（PE 与EA 体积比为5∶1）得黄色固体中间体25g。将中间体25g（400 mg,1.40 mmol）用乙醇（8 mL）和水(4 mL)溶解在反应瓶中,一次性加入还原铁粉（391 mg,6.98 mmol）、氯化铵（37 mg,0.70 mmol）,加毕后升温至80 ℃下回流1 h 左右。经TLC 检测反应完全后，趁热过滤出不溶性杂质，旋干滤液中的乙醇，加入少量水后用饱和碳酸氢钠溶液将PH 调至8，然后用乙酸乙酯萃取（30 mL×3），合并有机相并用无水硫酸钠干燥后，减压浓缩旋干后得红棕色固体化合物26g。将中间体22（142 mg，0.70 mmol）和中间体26g(150 mg,0.58 mmol)称入反应瓶中，用乙腈溶解后依次加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯（HATU）（266 mg,0.70 mmol），N,N-二异丙基乙胺（DIEA）(192 μL,1.16 mmol)，加毕后继续常温下搅拌反应3 h 左右。经TLC 检测反应完全后，类似合成27f 后处理及硅胶柱色谱分离后得目标化合物27g，红色固体，总收率为45%，纯度为98.2%。1H NMR (400 MHz,DMSO-d6) δ 9.91 (s,1H),8.38—8.36 (m,1H),7.92—7.89 (m,1H),7.62 (d,J=8.0 Hz,1H),7.58—7.52 (m,3H),7.48 (d,J=3.2 Hz,1H),7.45 (t,J=8.0 Hz,1H),7.39—7.35 (m,2H),7.25—7.18 (m,3H),7.08 (d,J=8.0 Hz,1H),7.01 (d,J=7.6 Hz,1H),6.71(d,J=2.8 Hz,1H),5.43 (s,2H),5.06 (s,2H) ppm.13C NMR (101 MHz,DMSO-d6) δ 166.87,153.97,137.71,137.01,134.61,132.43,130.56,129.27,128.98,128.76,127.93,127.04,126.52,125.87,125.42,122.32,122.01,121.72,121.07,112.04,107.28,105.99,99.57,68.00,48.98 ppm.HRMS:m/z calcd for C27H21ClN2O2[M+H]+441.1364,found 441.1363。

5.3 N-（1-（4-溴苄基）-1H-吲哚-4-基）-2-（萘-1-基氧基）乙酰胺（27h）的合成及表征

将4-硝基吲哚23（162 mg,1.00 mmol）、对溴溴苄24h（500 mg,2.00 mmol）、碳酸钾（414 mg,3.00 mmol）称入到反应瓶中，用N,N 二甲基甲酰胺DMF（10 mL）溶解后，升温至80 ℃下回流反应2 h 左右。经TLC 检测反应完全后经类似后处理及硅胶柱色谱分离得黄色固体中间体25h。后续步骤同合成27f 类似，得目标化合物27h，黄色固体，总收率为40%，纯度为98.1%。1H NMR (400 MHz,DMSO-d6) δ 9.91 (s,1H),8.38—8.36 (m,1H),7.92—7.89 (m,1H),7.62 (d,J=7.2 Hz,1H),7.58—7.42 (m,7H),7.23 (d,J=8.0 Hz,1H),7.13 (d,J=8.4 Hz,2H),7.08 (t,J=8.0 Hz,1H),7.01 (t,J=8.0 Hz,1H),6.71 (d,J=2.8 Hz,1H),5.41 (s,2H),5.06(s,2H) ppm.13C NMR (101 MHz,DMSO-d6) δ 166.87,153.97,138.13,137.01,134.61,131.90,130.57,129.61,128.76,127.93,127.04,126.52,125.87,125.42,122.32,122.02,121.72,121.07,120.92,112.04,107.27,105.99,99.58,68.00,49.04ppm.HRMS:m/z calcd for C27H21BrN2O2[M+H]+485.0859,found 485.085 2。

5.4 N-（1-（4-乙酰基苄基）-1H-吲哚-4-基）-2-（萘-1-基氧基）乙酰胺（27i）的合成及表征

将4-硝基吲哚23（190 mg,1.17 mmol）、1-（4-（溴甲基）苯基）乙-1-酮24i（500 mg,2.35 mmol）、碳酸钾（484 mg,3.51 mmol）称入到反应瓶中，用N,N 二甲基甲酰胺DMF（10 mL）溶解后，升温至80℃下回流反应2 h 左右。经TLC 检测反应完全后经类似萃取及硅胶柱色谱分离得黄色固体中间体25i。后续步骤同合成27f 类似，得目标化合物27i，总收率为42%，纯度为98.2%。1H NMR (400 MHz,DMSO-d6) δ 9.93 (s,1H),8.37—8.36 (m,1H),7.89(d,J=8.0 Hz,3H),7.63—7.43 (m,6H),7.28 (d,J=8.0 Hz,2H),7.22 (d,J=8.0 Hz,1H),7.07 (t,J=8.0 Hz,1H),7.02 (d,J=7.2 Hz,1H),6.73 (d,J=2.4 Hz,1H),5.53 (s,2H),5.06 (s,2H),2.53 (s,3H) ppm.13C NMR (101 MHz,DMSO-d6) δ 197.89,166.88,153.98,143.97,137.09,136.45,134.61,130.59,129.00,128.90,127.93,127.48,127.04,126.53,125.87,125.42,122.32,122.04,121.74,121.07,112.08,107.27,105.99,99.65,68.00,49.43,27.13 ppm.HRMS:m/z calcd for C29H24N2O3[M+H]+449.1860,found 449.1862。

5.5 N-（1-（4-甲氧基苄基）-1H-吲哚-4-基）-2-（萘-1-基氧基）乙酰胺（27j）的合成及表征

将4-硝基吲哚23（202 mg,1.24 mmol）、1-（溴甲基）-4-甲氧基苯24j（500 mg,2.49 mmol）、碳酸钾（513 mg,3.72 mmol）称入到反应瓶中，用N,N 二甲基甲酰胺DMF（10 mL）溶解后，升温至80 ℃下回流反应2 h 左右。经TLC 检测反应完全后经类似萃取和硅胶柱色谱分离得黄色固体中间体25j。后续步骤同合成27f 类似，得目标化合物27j，总收率为34%，纯度为98.1%。1H NMR (400 MHz,DMSO-d6) δ 9.88 (s,1H),8.37 —8.35 (m,1H),7.92—7.89 (m,1H),7.61—7.52 (m,4H),7.46—7.42(m,2H),7.27 (d,J=8.0 Hz,1H),7.17 (d,J=7.2 Hz,2H),7.07 (t,J=8.0 Hz,1H),7.01 (d,J=7.6 Hz,1H),6.87 (d,J=8.8 Hz,2H),6.66 (d,J=2.8 Hz,1H),5.33 (s,2H),5.05 (s,2H),3.70 (s,3H) ppm.13C NMR(101 MHz,DMSO-d6) δ166.83,159.05,153.97,136.99,134.61,130.52,130.48,128.95,128.63,127.93,127.04,126.53,125.87,125.41,122.31,121.80,121.06,114.39,111.85,107.39,105.99,99.20,68.00,55.53,49.24ppm.HRMS:m/z calcd for C28H24N2O3[M+H]+437.1860,found 437.1868。

5.6 N-（1-（4-氰基苄基）-1H-吲哚-4-基）-2-（萘-1-基氧基）乙酰胺（27k）的合成及表征

将4-硝基吲哚23（207 mg,1.28 mmol）、4-（溴甲基）苄腈24k（500 mg,2.55 mmol）、碳酸钾（528 mg,3.83 mmol）称入到反应瓶中，用N,N 二甲基甲酰胺DMF（10 mL）溶解后，升温至80 ℃下回流反应2 h 左右。经TLC 检测反应完全后经类似萃取，硅胶柱色谱分离得黄色固体中间体25k。后续步骤同合成27f 类似，得目标化合物27k，总收率为43%，纯度为98.4%。1H NMR (400 MHz,DMSOd6) δ 9.94 (s,1H),8.37—8.35 (m,1H),7.91—7.89(m,1H),7.79—7.76 (m,2H),7.62 (d,J=7.6 Hz,1H),7.58—7.51 (m,4H),7.44 (t,J=8.0 Hz,1H),7.29 (d,J=8.4 Hz,2H),7.21 (d,J=8.0 Hz,1H),7.07 (t,J=8.0 Hz,1H),6.99 (d,J=8.0 Hz,1H),6.73 (d,J=2.8 Hz,1H),5.55 (s,2H),5.06 (s,2H) ppm.HRMS:m/z calcd for C28H21N3O2[M+H]+432.1707,found 432.1703。

5.7 N-（1-（4-甲基苄基）-1H-吲哚-4-基）-2-（萘-1-基氧基）乙酰胺（27l）的合成及表征

将4-硝基吲哚23（102 mg,1.24 mmol）、1-（溴甲基）-4-甲基苯24l（500 mg,2.49 mmol）、碳酸钾（513 mg,3.72 mmol）称入到反应瓶中，用N,N 二甲基甲酰胺DMF（10 mL）溶解后，升温至80 ℃下回流反应2 h 左右。经TLC 检测反应完全后经类似萃取，硅胶柱色谱分离得黄色固体中间体25l。后续步骤同合成27f 类似，得目标化合物27l，总收率为41%，纯度为98.3%。1H NMR (400 MHz,DMSOd6) δ 9.90 (s,1H),8.38—8.36 (m,1H),7.93—7.90(m,1H),7.62 (d,J=8.0 Hz,1H),7.59—7.52 (m,3H),7.46—7.43 (m,2H),7.24 (d,J=8.0 Hz,1H),7.14—7.05 (m,5H),7.01 (d,J=8.0 Hz,1H),6.69 (d,J=2.4 Hz,1H),5.37 (s,2H),5.06 (s,2H),2.25 (s,3H)ppm.13C NMR (101 MHz,DMSO-d6) δ 166.84,153.98,137.06,136.99,135.59,134.61,130.49,129.52,128.75,127.93,127.48,127.04,126.53,125.87,125.42,122.32,121.83,121.07,111.87,107.36,106.00,99.25,68.01,49.54,21.10 ppm.HRMS:m/z calcd for C28H24N2O2[M+H]+421.1911,found 421.1905。

5.8 N-（1-（3,5-二溴苄基）-1H-吲哚-4-基）-2-（萘-1-基氧基）乙酰胺（27m）的合成及表征

将4-硝基吲哚23（74 mg,0.46 mmol）、1,3-二溴-5-（溴甲基）苯24m（300 mg,0.91 mmol）、碳酸钾（190 mg,1.38 mmol）称入到反应瓶中，用N,N 二甲基甲酰胺DMF（10 mL）溶解后，升温至80 ℃下回流反应2 h 左右。经TLC 检测反应完全后加入水(100 mL),然后用乙酸乙酯萃取（50 mL×3）,合并有机相，经无水硫酸钠干燥后，浓缩，经硅胶柱色谱分离（PE 与EA 体积比为5：1）得黄色固体中间体25m。后续步骤同合成27f 类似，得目标化合物27m，总收率为41%，纯度为98.0%。1H NMR (400 MHz,DMSO-d6) δ 9.93 (s,1H),8.43—8.31 (m,1H),7.90 (d,J=9.4 Hz,1H),7.73 (t,J=1.6 Hz,1H),7.63 (d,J=7.6 Hz,1H),7.58—7.51 (m,4H),7.45 (t,J=7.9 Hz,1H),7.39 (d,J=1.6 Hz,2H),7.29 (d,J=8.2 Hz,1H),7.12 (d,J=7.9 Hz,1H),7.01 (d,J=7.6 Hz,1H),6.72 (d,J=3.0 Hz,1H),5.45 (s,2H),5.05 (s,2H).13C NMR (101 MHz,DMSO-d6)) δ 166.89,153.97,143.51,136.95,134.60,132.83,130.63,129.40,128.76,127.92,127.03,126.53,125.86,125.41,123.07,122.33,122.26,121.06,112.26,107.16,106.00,99.98,67.98,48.35 ppm.HRMS:m/z calcd for C27H20BrN2O2[M+H]+562.9964,found 562.9975。

5.9 N-（1-苄基-1H-吲哚-4-基）-2-（萘-1-基氧基）乙酰胺（27n）的合成及表征

将4-硝基吲哚23（237 mg,1.46 mmol）、卞溴24n（500 mg,2.92 mmol）、碳酸钾（604 mg,4.38 mmol）称入到反应瓶中，用N,N 二甲基甲酰胺DMF（10 mL）溶解后，升温至80 ℃下回流反应2 h 左右。经TLC 检测反应完全后加入水(100 mL)，然后用乙酸乙酯萃取（50 mL×3），合并有机相，经无水硫酸钠干燥后，浓缩，经硅胶柱色谱分离（PE 与EA 体积比为5∶1）得黄色固体中间体25n。后续步骤同合成27f 类似，得目标化合物27n，总收率为45%，纯度为98.3%。1H NMR (400 MHz,DMSOd6) δ 9.24 (s,1H),8.37—8.35 (m,1H),7.91—7.89(m,1H),7.62 (d,J=7.6 Hz,1H),7.56—7.53 (m,3H),7.48 (d,J=3.2 Hz,1H),7.43 (t,J=8.0 Hz,2H),7.31—7.17 (m,6H),7.06 (t,J=8.0 Hz,1H),6.99 (d,J=8.0 Hz,1H),6.70 (d,J=2.8 Hz,1H),5.42 (s,2H),5.05 (s,2H) ppm.HRMS:m/z calcd for C27H22N2O2[M+H]+407.1754,found 407.1749。

5.10 2-（萘-1-基氧基）-N-（1-（噻吩-2-基甲基）-1H-吲哚-4-基）乙酰胺（27o）的合成及表征

将2-噻吩甲醇（500 mg,4.38 mmol）用二氯甲烷（10 mL）溶解在反应瓶中，缓慢加入二氯亚砜（1.5 mL,21.9 mmol）继续常温下搅拌1 h 左右。经TLC 检测反应完全后，旋干溶剂，得中间体粗产品2-氯噻吩。将4-硝基吲哚23（309 mg,1.90 mmol）、2-氯噻吩（500 mg,3.80 mmol）、碳酸钾（787 mg,5.70 mmol）称入到反应瓶中，用N,N 二甲基甲酰胺DMF（10 mL）溶解后，升温至80 ℃下回流反应2 h 左右。经TLC 检测反应完全后经相似后处理得黄色固体中间体25o。后续步骤同合成27f 类似，得目标化合物27o，红色固体，总收率34%，纯度为98.2%。1H NMR (400 MHz,DMSO-d6) δ 9.90(s,1H),8.37—8.35 (m,1H),7.91—7.89 (m,1H),7.72 (t,J=2.4 Hz,1H),7.62 (d,J=7.6 Hz,1H),7.58—7.52 (m,4H),7.44 (d,J=8.0 Hz,1H),7.38(d,J=1.6 Hz,2H),7.28 (d,J=8.0 Hz,1H),7.10 (t,J=8.0 Hz,2H),7.00 (d,J=7.6 Hz,1H),6.72 (d,J=3.2 Hz,1H),5.61 (s,2H),5.05 (s,2H) ppm.13C NMR(101 MHz,DMSO-d6) δ 166.85,153.98,141.13,136.84,134.61,130.54,128.22,127.93,127.33,127.04,126.80,126.53,126.21,125.87,125.42,122.32,121.95,121.70,121.07,112.06,107.27,106.00,99.69,68.00,44.61 ppm.HRMS:m/z calcd for C25H20N2O2S [M+H]+413.1318,found 413.1305。

6 总结与展望

本文以化合物14a 为先导化合物，根据生物电子等排体原理将吲唑环的2-位N 原子用C 原子代替而成吲哚环，然后再在吲哚环1-N 上引入疏水基团，从而合成了10 个新型吲哚类目标化合物。其中，抑制效果较好的是化合物27m，其在10 μmol·L−1下其抑制率为42%，在100 μmol·L−1下为56%，这可能是溴原子的电负性降低了苯环电子云密度，与SIRT2 的静电效应增强使得结合更牢固。本文通过合理药物设计并合成了一系列全新SIRT2 抑制剂，通过酶水平活性评价获得了较好抑制活性的化合物27m，为靶向SIRT2 的抗肿瘤药物研究提供了更多的SIRT2 新骨架选择，并为课题后期进一步的结构修饰奠定了基础。