兽用疫苗抗原分离纯化技术要点探究

侯俊 徐春晓

关键词：抗原；分离；兽用疫苗；纯化；技术

相较于一些西方发达国家而言，我国兽用疫苗的研制水平和相关技术应用还存在一定的差距，难以满足畜禽养殖业迅猛发展的需求，亟待加强相关技术研究与宣传推广力度，不断完善兽用疫苗体系建设，持续提升免疫效果和疫苗质量。其中，抗原的分离纯化技术占据重要地位，直接影响着兽用疫苗的运用价值，所以兽用疫苗抗原分离纯化技术要点非常必要。

一、我国兽用疫苗抗原分离纯化技术现状

研究国内兽用疫苗市场现状可以发现，国外企业投放了大量的兽用疫苗产品，且处于销量持续增长的态势，由于其疫苗产品具有高效、安全、形状稳定等优势，所以给国内兽用疫苗企业和产品生存带来极大压力以及挑战。最近两年，国内兽用疫苗企业积极学习借鉴国外先进技术、经验，在疫苗抗原处理技术上获取了很多新突破与新成就，不过受生产条件有限、基础设施不完善、管理模式传统单一等诸多因素影响，兽用疫苗产品依旧存在着过于同质化、结构不合理等问题，难以将疫苗中杂蛋白含量降低，抗原有效含量也无法有效提高，纯化工艺落后，这些都是国内兽用疫苗抗原分离纯化技术发展面临的亟待解决的问题。

二、兽用疫苗抗原分离纯化技术应用要点

（一）提前处理兽用抗原的要点

想要將兽用疫苗产品中的蛋白分离纯化出来，就要做好提前处理兽用抗原工作，此过程既要将原有活性保持住，也要按照目标料液自身的性质差异，选择适合的处理技术。常见的处理技术包括酶处理、高压挤压处理、研磨处理、超声波振荡处理、反复冻融处理、渗透破碎处理、机械破碎处理等，在达到破碎目标后，蛋白提取需通过相应缓冲系统进行，运用微滤、过滤、离心等技术清除其中的不溶物大颗粒。

（二）分离纯化兽用抗原的要点

分离纯化技术可按照分子大小差异开展，为了将其他物质和蛋白质分开，实现分离效果，可采取凝胶过滤、密度梯度离心、超滤、透析等技术。

凝胶过滤法，其应用原理为大小不同分子在凝胶作用下进行有效分离的过程，现阶段常见的凝胶包括琼脂糖凝胶、交联葡聚糖凝胶等，此技术在国内兽用疫苗生产中尚未达到普及应用状态，目前在人用疫苗领域的应用相对更多。

密度梯度离心法，其应用原理为借助离心力场和重力作用分离、分层细胞的过程。该技术包括密度沉降平衡与速度沉降技术，多聚蔗糖、蔗糖、氯化铯是常见的密度梯度离心技术应用介质，经过此技术处理的山羊痘病毒纯化效果非常好，具有完整颗粒。

超滤法，其应用原理为小分子溶剂与溶质在相应压力作用下被膜隔住进而纯化出大分子的过程。相关实验表明，此技术可以去除90%的杂蛋白。

透析法，其应用原理为在透析袋内分离混合物的过程，是最为常见的分离技术。

为了增强分离纯化效果，还可采取以下四种分离纯化方法。其一，分离纯化按照不同溶解度进行；其二，分离纯化按照不同电荷进行；其三，分离纯化按照蛋白质吸附情况进行；其四，分离纯化按照分子亲和力特异性进行。

三、结束语

总而言之，虽然我国兽用疫苗产业整体上呈现出良好发展的积极态势，不过依旧存在生产力有待提升、技术水平有待提高、疫苗质量参差不齐等问题，动物接种疫苗后难以形成充足抗体，获取的免疫保护效果不强，疫苗抗原性较低，具有较高蛋白质，应不断优化疫苗产业，与时俱进开展兽用疫苗抗原分离纯化技术要点的探究工作，不断积累实践经验，采用科学可行的纯化步骤和分离手段，推进我国畜禽养殖业的健康前进。