血清miR-21、CysC及氧化应激指标联合检测在诊断糖尿病肾病中的应用效果

刘 君，王立平

〔1.山东省立医院（集团）鲁东医院检验科，山东 烟台 265500；2.山东大学齐鲁医院南山分院生物治疗中心，山东 烟台 265700〕

糖尿病是一种基础代谢疾病。此病患者常会发生糖尿病肾病。糖尿病肾病患者的主要临床表现为肾功能渐进性损伤、持续性蛋白尿等。此病患者的病情可进展为肾功能衰竭，从而可危及其生命安全。在发病初期，此病患者无显著的临床症状，对其病情进行准确诊断的难度较大[1]。胱抑素C（cystatin C，CysC）是临床上评价肾损伤的常用指标之一。有学者指出，糖尿病肾病的发生与氧化应激反应密切相关，miR-21在此病的发生发展中发挥着重要的作用。在本文中，笔者主要是探究血清miR-21、CysC及氧化应激指标联合检测在诊断糖尿病肾病中的应用价值。

1 资料和方法

1.1 一般资料

选择我院2018年4月至2020年1月期间接诊的148例糖尿病患者为研究对象。其纳入标准是：病情符合糖尿病的诊断标准；其本人和（或）其家属知情并同意参与本研究。其排除标准是：患有继发性肾病；近期内使用过肾毒性药物；患有泌尿系统疾病。将其分为单纯糖尿病组（A组，n=50）、轻度糖尿病肾病组（B组，n=53）和中重度糖尿病肾病组（C组，n=45）。A组患者中有男性24例、女性26例；其年龄为45～74岁，平均年龄（57.8±3.7）岁。B组患者中有男性28例、女性25例；其年龄为43～71岁，平均年龄（57.5±3.4）岁。C组患者中有男性25例、女性20例；其年龄为41～68岁，平均年龄（55.2±4.1）岁。选择同一时期在我院接受体检的50例健康体检者作为对照组。对照组体检者中有男性26例、女性24例；其年龄为42～70岁，平均年龄（56.3±3.9）岁。四组研究对象的基本资料相比，P＞0.05。本研究经我院医学伦理委员会批准。

1.2 方法

对四组研究对象均进行血清miR-21、CysC及氧化应激指标的检测。进行血清miR-21检测的方法是：采集受检者的空腹外周静脉血3～4 mL，以每分钟3500转的速度对血样进行10 min的离心处理，然后分离出血清。采用SYBRGreenI荧光定量聚合酶链反应技术检测血清标本中的miR-21。进行血清CysC检测的方法是：使用酶联免疫吸附法检测受检者血清CysC的水平。进行血清氧化应激反应指标检测的方法是：使用酶联免疫吸附法检测受检者血清晚期氧化蛋白产物（advanced oxidation protein products，AOPP）的水平。使用硫代巴比妥酸比色法检测受检者血清丙二醛（malondialdehyde，MDA）的水平。使用羟胺法检测受检者血清超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）的水平。

1.3 观察指标

观察四组研究对象血清miR-21、CysC、氧化应激指标（AOPP、MDA、SOD）的水平和用各项检测诊断B组患者、C组患者所患糖尿病肾病的效果。

1.4 统计学处理

采用统计软件SPSS 22.0对本次研究中的数据进行处理，计量资料采用t检验，计数资料采用χ²检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对比四组研究对象血清miR-21、CysC的水平

B组患者、C组患者血清miR-21、CysC的水平均高于A组患者和对照组体检者，P＜0.05。C组患者血清miR-21、CysC的水平均高于B组患者，P＜0.05。详见表1。

表1 对比四组研究对象血清miR-21、CysC的水平（±s）

表1 对比四组研究对象血清miR-21、CysC的水平（±s）

注：#与对照组相比，P＜0.05；*与A组相比，P＜0.05；a与C组相比，P＜0.05。

分组 miR-21（2-△△CT） CysC（mg/L）A组（n=50） 1.24±0.08 0.74±0.19 B组（n=53） 4.08±0.87#*a 1.41±0.15#*a C组（n=45） 8.58±1.07#* 2.15±0.41#*对照组（n=50） 1.11±0.10 0.68±0.22

2.2 对比四组研究对象血清氧化应激指标的水平

A组患者血清AOPP、MDA的水平均高于对照组体检者，其血清SOD的水平低于对照组体检者，P＜0.05。B组患者血清AOPP、MDA的水平均高于A组患者，其血清SOD的水平低于A组患者，P＜0.05。C组患者血清AOPP、MDA的水平均高于B组患者，其血清SOD的水平低于B组患者，P＜0.05。详见表2。

表2 对比四组研究对象血清氧化应激指标的水平（±s）

表2 对比四组研究对象血清氧化应激指标的水平（±s）

注：#与对照组相比，P＜0.05；*与A组相比，P＜0.05；a与C组相比，P＜0.05。

分组 AOPP（μmol/L）MDA（μmol/L） SOD（U/mL）A组（n=50） 79.87±7.88# 5.74±0.47# 128.77±12.58#B组（n=53） 96.87±10.04#*a 7.01±0.67#*a 95.78±10.87#*a C组（n=45） 156.35±12.47#* 12.25±1.49#* 78.99±7.69#*对照组（n=50）62.64±5.78 4.57±0.66 228.59±28.89

2.3 对比四组研究对象血清miR-21、CysC、氧化应激反应指标联合检测结果的阳性率

B组患者、C组患者血清miR-21、CysC、氧化应激反应指标联合检测结果的阳性率均高于A组患者和对照组体检者，P＜0.05。B组患者与C组患者血清miR-21、CysC、氧化应激反应指标联合检测结果的阳性率均高于90.00%，二者相比，P＞0.05。详见表3。

表3 对比四组研究对象血清miR-21、CysC、氧化应激反应指标联合检测结果的阳性率[例(%)]

3 讨论

糖尿病肾病是一种发病机制复杂、发病隐匿的糖尿病并发症。此病属于微血管病变，发病后会损伤患者的肾小管功能和血管内皮功能，影响其肾小球滤过率。尿白蛋白排泄率是目前临床上诊断糖尿病肾病的常用指标。但该指标易受多种因素的影响，用其诊断糖尿病肾病的灵敏性较差。人体的所有细胞核内均可以生成CysC。CysC在血液中有较高的稳定性，其水平可反映肾小球基底膜的滤过能力。相关的临床研究显示，在患者发生肾功能受损后，其血清CysC的水平会出现明显的变化，且损伤的程度越严重，其血清CysC的水平就越高[2]。本研究的结果显示，B组患者、C组患者血清CysC的水平均高于A组患者和对照组体检者，P＜0.05。C组患者血清CysC的水平高于B组患者，P＜0.05。miR-21属于小分子RNA，是临床上诊断肿瘤常用的血清标志物。其在血清中有较高的稳定性。有研究显示，糖尿病肾病患者肾组织中miR-21的含量较高[3]。有学者指出，该物质是一种肾组织的保护因子，在肾脏出现损伤后其水平会明显增高。本研究的结果显示，B组患者、C组患者血清miR-21的水平均高于A组患者和对照组体检者，P＜0.05。C组患者血清miR-21的水平高于B组患者，P＜0.05。这表明，血清miR-21检测在诊断糖尿病肾病中的应用价值较高。多项临床研究证实，糖尿病肾病的发生、发展与氧化应激反应密切相关。此病患者的抗氧化能力会随着其病情的加重而逐渐降低[4]。本研究的结果显示，A组患者血清AOPP、MDA的水平均高于对照组体检者，其血清SOD的水平低于对照组体检者，P＜0.05。B组患者血清AOPP、MDA的水平均高于A组患者，其血清SOD的水平低于A组患者，P＜0.05。C组患者血清AOPP、MDA的水平均高于B组患者，其血清SOD的水平低于B组患者，P＜0.05。

本研究的结果表明，血清miR-21、CysC及氧化应激指标联合检测在诊断糖尿病肾病中的应用价值较高。此法值得在临床上推广应用。