理气逍遥丸对功能性消化不良大鼠的治疗作用研究

臧玉豹 马子君

江苏省新沂市中医医院药剂科，江苏新沂 221400

理气逍遥丸是新沂中医医院以辨证论治为基础的院内制剂。本方由柴胡、枳壳、白芍、延胡索、香附、甘草等17味中药组成。具有疏肝理气、通络的功效[1-4]。有关文献报道柴胡可促进肠蠕动，进而促进肠道吸收；枳壳中的挥发油成分可加速胃运动，但存在双向调节的情况，香附以及延胡索都具有保护胃黏膜的作用。芍药苷是主要的活性成分，此外，甘草还具有双向调节胃肠运动的作用[5-8]。经过多年临床实践，发现该制剂对气滞型胃痛有较好的治疗效果。功能性消化不良（functional dyspepsia，FD）临床上非常常见，严重影响患者的生活质量[9]。目前其发生机制尚未明确，根据有关文献记载其机制可能与胃肠功能或急速紊乱有关，因此本研究建立FD动物模型，分析胃肠运动功能，调节激素分泌，探讨理气逍遥丸治疗功能性消化不良的治疗效果，以为该制剂增加气滞型胃脘痛适应证奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

理气逍遥丸中间体（未成丸前制剂中间体），由新沂市中医医院提供；多潘立酮片（西安杨森制药有限公司，批准文号：苏药制字Z04001458，批号：170306533，规格：10 mg），wistar大鼠体重为（200±20） g（江苏艾菱菲生物科技有限公司，SCXK（苏）-2018-0010）。

1.2 试剂

激素相关试剂盒（南京建成科技有限公司），水合氯醛（北京化工厂）。

1.3 仪器

酶标仪（上海皓庄仪器有限公司，MB16-414）；万分之一电子天平（梅特勒ME204E）；紫外分光光度仪（上海元析仪器有限公司，X6）。

1.4 方法

1.4.1 动物分组与给药 将成年 wistar 大鼠随机分为4组，每组16只，空白组、模型组均每日给予生理盐水，多潘立酮组每日灌胃给予多潘立酮片2.8 mg/kg，理气逍遥丸组灌胃给予理气逍遥丸1.25 g/kg。造模后连续给予各组药物2周。

1.4.2 模型制备 本研究除空白组外，其余动物采用改良复合病因方法（慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节+夹尾激怒）复制FD模型，模型大鼠上午在束缚箱内禁闭3 h，下午游泳10 min。第一日饮食正常，二日进食，三日给足粮食，反复进行，每日夹尾激怒大鼠30 min，连续给予21 d。

1.4.3 大鼠常规形态观察 对大鼠日常形态（精神状态、毛发、气味、颜色、进食量和体重）等进行观察

1.4.4 胃排空率指标测定 最后一次给药后2 h，每组大鼠灌胃甲基纤维素酚红溶液，每只大鼠2 ml，20 min后腹腔注射10%水合氯醛麻醉，固定，打开腹腔，胃和贲门结扎，沿胃大弯切开，用蒸馏水冲洗胃内容物，将胃容积定容在20 ml容积瓶中，然后与0.5 mol/l NaOH 溶液混合，将胃置于室温下1 h，另取5 ml上清液加入三氯乙酸溶液脱蛋白，离心10 min后，在560 nm 处测定吸光度，加入10%甲基纤维素酚红溶液2 ml，依次加入NaOH溶液20 ml，再次加入三氯乙酸溶液（20%）4 ml制备成标准溶液。标准苯酚红a的吸光度在560 nm处测定。计算胃排空率[（1检测酚红a/标准酚红a）100%][4]。

1.4.5 相关激素水平测定 腹主动脉取血5 ml离心，分离血清，采用ELISA试剂盒，依据厂家说明操作，测定大鼠各组血清中Ghrelin、MTL及VIP指标含量。

1.5 统计学方法

应用SPSS 22.0版统计学软件分析数据，计量资料以（）表示，采用t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般状态观察

造模期间，自夹尾开始，大鼠情绪暴躁，存在尖叫、打架现象。模型组大鼠饮食减少，睡眠和活动减少，毛发纠结。给药前多潘立酮组、理气逍遥丸组大鼠与模型组一般状态无差异，给药后两组一般状态均不同程度低于空白组，体重与空白组接近，模型组体重最低。

2.2 四组胃消化不良大鼠胃排空率比较

模型组胃排空率明显低于空白组（P＜0.01），实验结果均表明造模成功。理气逍遥丸组及多潘立酮组的胃排空率显著高于模型组（P＜0.01），与空白组的胃排空率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。理气逍遥丸可促进胃排空率，并且其能力与多潘立酮组无异。胃排空率测定显示四组雌性与雄性大鼠实验结果比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），说明性别对胃排空率影响不大，见表1。

表1 四组胃消化不良大鼠胃排空率水平比较（）

表1 四组胃消化不良大鼠胃排空率水平比较（）

注：与空白组比较：*P＜0.01；与模型组比较：#P＜0.01；与雄性组比较：△P＜0.01，△△P＜0.01

组别 雄性 雌性空白组 69.00±2.55 68.02±2.06模型组 38.52±5.82* 35.45±6.28*多潘立酮组 67.57±11.12# 66.25±9.52#理气逍遥丸组 65.04±9.51# 63.34±8.95#

2.3 四组胃消化不良大鼠血清Ghrelin、MTL及VIP水平比较

模型组血清Ghrelin、MTL水平明显低于空白组（P＜0.01），血清VIP水平高于空白组（P＜0.01），实验结果均表明造模成功。

理气逍遥丸组、多潘立酮组血清Ghrelin、MTL水平显著高于模型组，血清VIP水平显著低于模型组，差异有统计学意义（P＜0.01），理气逍遥丸组与多潘立酮组三项结果均无统计学意义（P＞0.05）。理气逍遥丸组、多潘立酮组及空白组血清Ghrelin、MTL、VIP水平两两比较，差异无统计学意义（P＞0.05），结果表明理气逍遥丸促进血清Ghrelin、MTL的分泌，降低VIP的分泌水平，且其效果与阳性对照组多潘立酮无异。

雌雄性FD大鼠血清Ghrelin和VIP水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05），说明性别对血清Ghrelin及VIP分泌影响不大。雌性FD大鼠各组间血MTL水平明显高于雄性（P＜0.01）。见表2。

表2 四组血清Ghrelin、MTL及VIP水平比较（，ng/L）

表2 四组血清Ghrelin、MTL及VIP水平比较（，ng/L）

注：与空白组比较：*P＜0.01；与模型组比较：#P＜0.01；与雄性组比较：△P＜0.01，△△P＜0.05

组别 血清Ghrelin 血清MTL 血清VIP雄性 雌性 雄性 雌性 雄性 雌性空白组 1355.11±25.56 1335.33±30.25 135.23±12.58 189.63±25.36△ 80.45±3.66 79.42±2.52模型组 682.22±18.23* 689.42±16.25* 69.23±19.25* 110.23±35.26*△ 138.25±2.89* 136.21±3.22*多潘立酮组 1306.25±60.25# 1299.25±55.87# 112.25±32.65# 180.23±35.21#△ 82.23±4.66# 80.15±3.25#理气逍遥丸组 1323.36±45.23# 1305.26±48.23# 130.23±15.89# 188.89±24.56#△ 78.25±3.84# 81.25±5.45#

3 讨论

FD的症状来源于胃、十二指肠，表现为上腹疼痛、腹胀、食欲不振、打嗝、恶心、呕吐并伴有持续或反复的症状。传统医学认为属“胃痛”“痞满”“呃逆”及“呕吐”等范畴[10-12]，病位在脾胃，与肝胆功能失调关系密切。因此本研究以夹尾激怒法和慢性应激法（断食，断水）相结合的方式造模，建立FD模型。

功能性消化不良的治疗主要是消除诱因，缓解症状，提高患者生活质量，遵循综合治疗和个体化治疗的原则，部分患者需要进行心理治疗。目前中医、中药治疗手段取得了良好的疗效，提高了患者的生活品质，目前已成为治疗FD的最为宝贵的医疗手段[13-15]。

理气逍遥丸作为我院院内制剂，遵循中医、中药传统治疗方法，由柴胡、当归、赤芍、白芍、川芎、王不留行、路路通、香附、枳壳、延胡索、茯苓、丝瓜络、青皮、陈皮、合欢皮、炙甘草等17味中药组方而成，具有疏肝理气、和络调中之功效[16-18]。

结果表明，理气逍遥丸组、多潘立酮组血清Ghrelin、MTL水平显著高于模型组，血清VIP水平显著低于模型组，理气逍遥丸组、多潘立酮组及空白组血清Ghrelin、MTL、VIP水平两两比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。结果表明理气逍遥丸可促进血清Ghrelin、MTL的分泌，降低VIP的分泌水平。理气逍遥丸能使雌雄性FD大鼠血清Ghrelin、MTL及VIP分泌恢复到正常水平，在FD大鼠在性别上MTL水平分泌不同，其机制尚未明确，其他激素水平无明显差异。

理气逍遥丸能在2周内有效缓解FD大鼠的症状，改善胃功能，其机制可能与Ghrelin、MTL和VIP的激素分泌水平相关，对FD大鼠有一定的治疗效果。本研究仅在大鼠实验中证明理气逍遥丸可以有效缓解FD大鼠症状，但在实际临床试验中为测定人体血清中激素的改善情况，未来将在人体试验中药动、药效学进行进一步研究。