子痫前期孕妇血清中辅助性T细胞17相关细胞因子的表达水平及其相关性研究

郭霞

（濮阳市妇幼保健院 产科，河南 濮阳 457000）

据统计，孕妇发生子痫前期的概率为10%，是妊娠期的特有疾病，一旦发病就会累及多种器官功能，从而引发一系列并发症，国内外研究认为子痫前期是导致孕产妇不良妊娠结局或死亡的主要原因之一［1-2］。随着临床对该疾病研究的不断深入，医学者发现其发生与免疫因素具有密切联系，辅助性T 细胞17（Th17）属于介导炎性反应的细胞亚群，可分泌出IL-17、IL-21、IL-23 等多种细胞因子，通过大量释放活性物质（如过氧化氢、氧自由基等）损害血管内皮细胞，由此可以推测出在子痫前期孕妇的发病及发展过程中，Th17 可能参与了炎性病理机制［3］。但目前对于子痫前期孕妇血清中Th17 相关细胞因子的变化与发病机制的关系尚未明确，因此，本文通过研究检测，分析了子痫前期孕妇血清中Th17 相关细胞因子的表达水平与病情发展的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择濮阳市妇幼保健院产科2018 年10 月至2020 年6 月收治的90 例子痫前期孕妇作为此次研究的观察组。纳入标准：经诊断确诊为子痫前期者；单胎妊娠者；对此次研究的目的、方法、过程均有清晰了解并自主参与研究者。排除标准：合并免疫系统疾病、高血压、糖尿病、心脏系统疾病、恶性肿瘤、慢性血管疾病或其他产科并发症者；存在慢性肝肾功能不全者；存在腹痛、见红、阴道流血等症状者；多胎或胎儿畸形者；胎儿染色体数目存在异常者；以往存在免疫治疗史、器官移植史者。再分别选择同期入院进行孕检的健康孕妇和体检的健康女性作为对照组1、对照组2，各80 例。本次研究已获得本院伦理委员会批准。观察组年龄23～31 岁，平均（27.36±1.22）岁；孕周27～37 周，平均（31.69±2.33）周；体重指数（BMI）24～30 kg/m2，平均（27.30±2.59）kg/m2；初产妇71 例。对照组1 年龄23～32 岁，平均（27.69±1.58）岁；孕周26～37 周，平均（31.41±2.07）周；BMI 25～31 kg/m2，平 均（27.67±2.87）kg/m2；初产妇63 例。对照组2 年龄23～32岁，平均（28.13±1.50）岁；BMI 20～24 kg/m2，平均（22.38±1.61）kg/m2；均未生育。经比较，观察组与对照组1、对照组2 的年龄比较差异无统计学意义（P>0.05），观察组与对照组1 的孕周、BMI及初产妇例数比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

抽取所有入选受试者清晨空腹状态下静脉血，并以3 000 r/min 速度离心后取血清样本，置于零下80℃冰箱保存；然后由同一位技术人员采用酶联免疫吸附定量试验法（ELISA）检测受试者血清中的白细胞介素（IL）-17、IL-21、IL-23、转化生长因子-β（TGF-β）水平。具体步骤如下：使用ELISA 试剂将样本连续稀释后产生7 个点的标准曲线，将样本加入每个孔中孵育过夜，温度设置为4℃；经孵育、洗涤后，在每个孔中加入预混合的检测抗体，于室温下温育2 h，经再次洗涤后于各孔中加入辣根过氧化物酶（HRP）标记链霉亲和素，20 min 后终止温育；将终止溶液加入各孔中，使用酶标仪对各孔的光密度进行测定，酶标仪设置为450 nm，最终获得IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 含量。

1.3 观察指标

详细记录并比较3 组受试者的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平，同时根据子痫前期患者的病情严重程度划分为轻、重度，对比轻、重度患者的上述指标，分析IL-17 与IL-21、IL-23、TGF-β水平的相关性。其中，若子痫前期孕妇的血压水平>140/90 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），且尿蛋白定量>300 mg，尿蛋白/肌酐比>0.3，或随机尿蛋白>300 mg/L，则判断为轻度。若子痫前期孕妇符合以下1 条或以上条件，则判断为重度：①存在头晕、头痛、视力模糊或中枢神经系统异常，或腹部不适等情况；②血清转氨酶升高；③血压水平>160/110 mmHg；④血小板<100×109/L，24 h 尿蛋白定量>2 g，24 h 尿量<500 mL；⑤存在血管内溶血、肺水肿、脑血管意外、凝血功能障碍、婴儿生长受限等情况［4］。

1.4 统计学方法

使用SPSS 22.0 统计学软件进行数据分析。符合正态分布的计量资料以均数±标准差（）表示，采用t检验；计数资料以百分率（%）表示，采用χ2检验；相关性分析采用Spearman 进行。P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3 组的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平比较

3 组的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平如表1所示，观察组的IL-17、IL-21、TGF-β 均高于对照组1、对照组2，差异有统计学意义（P<0.05），而对照组1、对照组2 比较差异无统计学意义（P>0.05）；观察组的IL-23 水平与对照组1 比较差异无统计学意义（P>0.05），但明显低于对照组2，差异有统计学意义（P<0.05）。

表1 3 组的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平比较（）

表1 3 组的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平比较（）

注：†与观察组比较，P<0.05。

2.2 轻、重度子痫前期患者的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平比较

轻、重度子痫前期患者的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平如表2 所示，轻度患者的IL-17、TGF-β均低于重度患者，差异有统计学意义（P<0.05），轻、重度患者的IL-21、IL-23 水平差异无统计学意义（P>0.05）。

表2 轻、重度患者的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平比较（）

表2 轻、重度患者的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平比较（）

2.3 相关性分析

由表2 可知，子痫前期患者的血清IL-17 与IL-21、IL-23 无相关性（r=0.08、0.11,P=0.521）；IL-17 与TGF-β 呈正相关（r=0.57,P=0.006）。

3 讨论

子痫前期是一种母体与胎盘之间的免疫失衡反应，以往认为免疫答应所介导的炎症反应是被母体的Th1/Th2 失衡所介导，而本文研究结果显示，通过对比子痫前期患者、健康孕妇和健康女性的IL-17、IL-21、IL-23、TGF-β 水平，发现观察组的IL-17 水平均高于对照组1、对照组2，由此可见，Th17 细胞亚群与子痫前期的发生、发展有关。此外，本文结果还显示，轻度子痫前期患者的IL-17 水平低于重度患者，说明Th17 还可反映子痫前期患者的病情严重程度。子痫前期患者的IL-17 与TGF-β 呈正相关，表明患者的Th17 功能主要由TGF-β 介导。有研究发现［5］，在子痫前期患者的临床检测中，IL-17 水平提升会促进广泛性血管内炎症反应的发展，从而将该指标作为诊断子痫前期的主要指标。因为IL-17 水平升高会使炎症效应因子、细胞因子的表达抗原、多种趋化因子等细胞因子也随之升高，相互之间发挥作用，形成促炎状态。以往研究也表示［6］，子痫前期患者血液中的多种促炎症相关因子均有所升高，所以由此得出，子痫前期患者的炎症反应在发展过程中有IL-17 的参与。TGF-β 因子是促使Th17 细胞诱导、分化的主要刺激，这可能是两者呈正相关的主要机制与原因。在本次研究中，虽然子痫前期患者的IL-21 水平较对照组1、对照组2 高，但是却与患者的病情严重程度无关，虽然IL-21 水平在某些疾病中可以对CD4+细胞中的IL-17 进行诱导，但在本次研究中，IL-21 并未参与到Th17细胞的调控中。子痫前期患者和健康孕妇的IL-23水平均低于对照组2，以往有研究表明该指标水平下降可能是因为孕妇在孕期的Th2 细胞发挥主导功能，从而产生反应，但是并未参与到子痫前期的病情发生、发展中［7-8］。

综上所述，在孕妇子痫前期的发病和发展过程中，血清中的Th17 相关细胞因子发挥了重要作用，TGF-β 升高会促使IL-17 升高，两者呈正相关，从而促进Th17 活化，并参与到子痫前期孕妇的炎症反应中，是导致疾病发生的主要原因。