BRCA1、DACH1及S100A4在子宫内膜癌病情进展及治疗预后中的预测价值

潘月 郑振荣 张开红 刘雪琴 王敏

在女性生殖系统恶性肿瘤中，子宫内膜癌（Endometrial Cancer，EC）最为常见，临床治疗以手术为主，但对于晚期EC 患者来说，术后5年生存率较差，仅为5%～15%［1］。EC 的确切发病原因尚未完全阐明，但有相关研究报道，EC 的发生可能与内外源性雌激素刺激、体质因素、遗传因素等因素有关［2］。乳腺癌基因-1（breast cancer susceptibility gene 1，BRCA1）为抑癌基因，在乳腺癌、卵巢癌等恶性肿瘤中发挥负性调节作用［3］。胞命运决定因子（Cell fate determination factor Dachshund，DACH1）是近年来新发现的乳腺癌抑制基因，与乳腺癌患者不良预后有着密切联系［4］。S100A4 蛋白是钙离子结合家族成员之一，参与细胞生长、分化、凋亡等多种细胞进程［5］。有学者研究发现，S100A4 在结直肠癌、乳腺癌、胃癌等恶性肿瘤的发生、发展中发挥重要作用［6］。本研究重点分析BRCA1、DACH1 及S100A4 在EC 病情进展及治疗预后中的预测价值。现研究报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2016年3月至2018年9月收治的127 例EC 患者（127 份EC 组织）设为EC 组。纳入标准：①符合手术指征，入院后进行经腹广泛或次广泛性全子宫切除+双附件切除＋盆腔淋巴结清扫；②均经病理检查确诊为EC［7］；③治疗配合度佳，随访资料完整。排除标准：①精神障碍者、因语言障碍无法配合的作者；②合并其他妇科恶性肿瘤、其他系统恶性肿瘤者；③复发的EC 患者；④术前接受过放化疗治疗及激素治疗者。平均年龄（53.41±5.19）岁；根据国际妇产科联盟（International Federation of Gynaecology and Obstetrics，FIGO）分期［8］：Ⅰ～Ⅱ期69 例，Ⅲ～Ⅳ期58 例。选取同期于本院进行手术治疗的133 例子宫内膜非典型增生患者（133 份子宫内膜不典型增生标本）设为对照组，平均年龄（53.25±5.07）岁。2 组患者基线资料比较差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究经医院医学伦理委员会批准通过，受试者或家属均签署知情同意书。

1.2 方法

采用S-P 免疫组化染色。将EC 组、对照组标本经常规石蜡切片、脱水。BRCA1、DACH1 及S100A4 兔多克隆抗体均采购自美国Epitomics 公司。免疫组化染色结果判定［8］：结合阳性细胞百分比和染色强度判定对结果进行判定。阳性细胞百分比为0 计0 分，≤10%计1 分，＞10%～25%计2分，＞25%～50%计3 分，＞50%计4 分；细胞质无染色计0 分，淡黄色计1 分，棕黄色计2 分，棕褐色计3 分；两项评分之和≤2 分为阴性，≥3 分为阳性。

1.3 随访

自127 例EC 患者出院后开始随访，随访方式以电话随访、患者自行来院复查为主，上门随访为辅。术后1年内随访12 次，随访截止时间为2019年9月，平均随访时长（10.12±1.15）月。如患者死亡，终止随访。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0 软件进行统计分析，计量资料采用（）表示，采用t检验；计数资料采用n（%）表示，采用χ2检验；绘制ROC 曲线，计算曲线下面积（AUC），以分析不同BRCA1、DACH1 及S100A4 表达对EC预后的预测价值；以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同组织中BRCA1、DACH1 及S100A4 表达情况

EC 组BRCA1、DACH1 阴性率以及S100A4 阳性率显著高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表1、图1。

图1 BRCA1、DACH1 及S100A4 在EC 组织及子宫内膜非典型增生中的免疫组化染色图（SP，× 500）Figure 1 immunohistochemical staining of BRCA1，Dach1 and S100A4 in EC and endometrial atypical hyperplasia（SP，× 500）

表1 不同组织中BRCA1、DACH1 及S100A4 表达情况［n（%）］Table 1 expression of BRCA1，Dach1 and S100A4 in different tissues［n（%）］

2.2 BRCA1、DACH1 及S100A4 与EC 患者病理特征的关系

组织学分级为G1、FIGO 分期为Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移的EC 患者BRCA1、DACH1 阴性率、S100A4 阳性率更高（P＜0.05）。不同年龄、组织类型、肌层浸润深度、病理类型的EC 患者BRCA1、DACH1、S100A4 阳性表达率及阴性表达率比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 BRCA1、DACH1 及S100A4 与EC 患者病理特征的关系［n（%）］Table 2 Relationship between BRCA1，Dach1，S100A4 and pathological features of EC patients［n（%）］

2.3 BRCA1、DACH1 及S100A4 不同表达的患者预后情况

随访结果显示：127 例EC 患者术后1年生存率为82.67%（105/127）。BRCA1 及DACH1 阴性表达、S100A4 阳性表达死亡率显著高于BRCA1 及DACH1 阳性表达、S100A4 阴性表达死亡率，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 BRCA1、DACH1 及S100A4 不同表达的患者预后情况［n（%）］Table 3 prognosis of patients with different expression of BRCA1，Dach1 and S100A4［n（%）］

2.4 BRCA1、DACH1 及S100A4 联合检测对EC患者预后的预测价

联合BRCA1、DACH1、S100A4 检测灵敏度、特异度、AUC 分别为89.65%、90.73%、0.962，各指标检测灵敏度、特异度、AUC 以三者联合检测最大（P＜0.05）。见表4。

表4 BRCA1、DACH1 及S100A4 联合检测对EC 患者预后的预测价值Table 4 the predictive value of combined detection of BRCA1，Dach1 and S100A4 in the prognosis of EC patients

3 讨论

EC 是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，大多数早期EC 患者在经过手术治疗后预后较好，但晚期EC 患者因存在淋巴结转移后较差，术后复发率较高［9］。EC 的病因曾引起广泛深入的探索，但尚难得到肯定的结论。随着分子生物学的进展，有学者发现EC 的发生可能与癌基因、抑癌基因等异常表达有关［10］。

本研究中，EC 组BRCA1、DACH1 阴性率以及S100A4 阳性率显著高于对照组，与既往研究结果相符［11］。BRCA1 于1990年首次被发现后，广大学者立即对BRCA1 进行研究，发现BRCA1 的结构、功能、突变与卵巢癌、乳腺癌等联系密切［12］。以往文献分析了DACH1 与乳腺组织、前列腺组织等多种恶性肿瘤的关系，发现DACH1 与多种肿瘤相关信号传导途径耦联，并对肿瘤细胞生长、分化发挥重要作用［13］，但DACH1 与EC 病情进展的关系尚不清楚。S100A4 蛋白被称为钙离子结合蛋白，主要存在于细胞内，能通过与靶蛋白相结合发挥相应的生物学效应［14］。既往研究发现，S100A4 在多种肿瘤组织中均存在高表达，包括膀胱癌、胰腺癌等，并可作为有价值的肿瘤预后标志物［15］。

国外学者发现，BRCA1 作为基因组的看护者，可通过多种途径发挥抑制肿瘤生长、增殖、转移，并可修复DNA 双链断裂，调节细胞周期，参与基因转录活化及抑制等，具有多种生物功能［16］。刘建捷等［17］报道，S100A4 可通过与细胞凋亡、增殖相关蛋白相互作用，调控细胞存活、凋亡、增殖、迁移等功能。本研究结果进一步证实BRCA1、DACH1、S100A4 对肿瘤细胞异常增殖、恶性转化的过程发挥重要作用，三者可作为评估EC 病情进展的主要生化指标。

随访结果表明，BRCA1、DACH1、S100A4 在EC 的发生、发展、浸润转移及预后中发挥着重要的作用，三者均可作为评估EC 侵袭转移能力、评估预后的重要生物学指标。通过比较单一指标及联合三项指标检测，表明联合三项指标检测可评估提高评估EC 患者病情的准确性，可有效预测EC 患者预后情况。

综上所述，BRCA1、DACH1 及S100A4 与EC发生、发展、预后关系密切，临床可通过联合三项指标检测评估EC 患者病情，预测预后。