苯醚甲环唑和代森锰锌复配对柑桔炭疽病菌的毒力及防治效果

韦 薇，覃义杰，和立连，何玉清，邓明学

(1 柳州市惠农化工有限公司，广西柳州，545616；2 广西特色作物研究院，广西桂林，541004)

柑桔炭疽病是柑桔生产上最常见的一种病害之一，主要为害叶、梢和果，也可为害主干、大枝和花，造成叶焦、枝枯、果落、树皮爆裂及贮藏果实腐烂，影响树势和产量，严重时整株死亡，造成严重的经济损失[1-2]。柑桔炭疽病的病菌(ColletotrichumgloeosporioidesPenz.)喜高温高湿环境，生长最适温度为21～28 ℃ ，具弱寄生性和潜伏侵染特性，即病菌入侵寄主后可处于休眠状态而不显症，当寄主组织活力下降或衰退时表现症状。通常以甜橙、椪柑、蕉柑、温州蜜柑、柠檬、红桔、年桔等品种发病较重[1，3-4]。目前柑桔炭疽病已经成为世界性分布的真菌性病害，几乎遍布于高温多湿的热带和亚热带柑桔产区，如美国、巴西、阿根廷、西班牙、日本及中国，对柑桔生产影响较大[5-6]。在广西，发生急性炭疽病严重为害的品种和时期如下：(1)金桔，9月下旬至10月上旬采前大量落果；(2)纽荷尔脐橙，采前落果、5月大量枯枝；(3)天草(又名象山红)杂柑，5月大量枯枝、落果。目前炭疽病的防治主要以化学防治为主。杀菌剂的连续使用，会导致病原菌产生抗药性从而降低防治效果。同时，农药在果实中的残留对人类健康和环境安全构成潜在威胁。据美国加利福尼亚的调查，抑霉唑连续在柑桔上使用5年以后，出现了抗抑霉唑菌株，在柑桔上长期使用苯丙咪唑类杀菌剂，使原本对其不敏感的柑桔炭疽病菌种急剧上升[7]。而农药混配则具有扩大防治谱、降低成本、提高防治效果及延缓抗药性产生等特点，因此利用现有农药进行混配已成为目前农药开发应用的一个重要方面[8]。苯醚甲环唑(difenoconazole)是三唑类广谱杀菌剂[9]，在美洲和欧洲广泛使用[10]，对子囊菌纲、担子菌纲及某些种传病原菌有持久的保护和治疗作用。其是甾醇脱甲基化抑制剂，具有高效、广谱、低毒、用量低的特点，内吸性极强，通过抑制麦角甾醇的生物合成，破坏细胞膜结构功能，达到杀菌目的[11]。代森锰锌(mancozeb)属低毒的保护性杀菌剂[12]，杀菌范围广，不易产生抗性，防治效果明显优于其他同类杀菌剂。为了明确苯醚甲环唑和代森锰锌复配对柑桔炭疽病的联合毒力与最佳配比制剂的田间防治效果，进而为生产上柑桔树炭疽病的防治提供参考，笔者开展了本试验。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试靶标：柑桔炭疽病菌采自湖南省园艺研究所柑桔园，由柳州市惠农化工有限公司生测室分离鉴定后保存株菌。

供试药剂：95%苯醚甲环唑原药，宁波三江益农化学有限公司生产；90%代森锰锌原药，山东潍坊润丰化工股份科技有限公司生产；10%苯醚甲环唑水分散粒剂，柳州市惠农化工有限公司生产；80%代森锰锌可湿性粉剂，江苏龙灯化学有限公司生产；64%苯醚甲环唑·代森锰锌可湿性粉剂，柳州市惠农化工有限公司生产；丙酮，成都市科隆化学品有限公司；吡咯，广东翁江化学试剂有限公司；吐温80，广东翁江化学试剂有限公司。

1.2 试验方法

1.2.1 室内毒力测定

采用平皿法[13]进行药剂的毒力测定。用电子天平称取苯醚甲环唑和代森锰锌原药，分别用丙酮和吡咯溶解，用0.1%吐温80水溶解稀释，有机溶剂最终含量不超过2%，配比和浓度设置见表1。含药平板的制备、空白对照的设置、病菌(菌饼)的接种、菌落直径的调查及菌丝生长抑制率的计算均参考文献[13]。每药剂各浓度重复3次，接种后的平板置于(25±1) ℃恒温培养箱中培养3 d。根据各单剂及各个混配的浓度对数值及对应的菌丝生长抑制率机率值做回归分析，采用DPS 软件求回归方程y=bx+a、计算EC50、EC90及相关系数等。根据孙云沛法[14]计算混剂的共毒系数(CTC)(标准药剂为苯醚甲环唑)，以此比较增效情况(CTC≥120为增效作用，CTC≤80为拮抗作用，80

表1 供试单剂及混剂的配比和浓度设置

1.2.2 田间防治试验

1.2.2.1 试验园条件 广西：2018年4—6月在广西灵川县大境乡登明村进行，品种为春甜桔，枳砧，树龄9年生，株行距3.0 m×3.5 m，667 m2栽80株左右，平均株高1.75 m，冠幅1.70 m，果园已封行，树势旺盛，所有试验小区的栽培条件一致。该园柑桔炭疽病发生比较严重，年用药防治6～8次。砂壤土，pH值5.2，有机质含量中等。

重庆：2018年4—5月在中国农业科学院柑桔研究所试验场进行，品种为沃柑，枳砧。果园平坦，光照条件好，长势均匀，肥水管理一致，树龄7～8年，株行距2.5 m×4 m，667 m2栽66株。壤土，pH值6.8，土壤肥力中等。试验期间未施肥也未进行灌溉。

福建：2018年8—9月在福建省闽清县梅溪镇樟洋村进行，供试品种为雪柑，株行距3.0 m×4.0 m，树势中等，肥水管理水平中等，土壤肥力中等，历年柑桔炭疽病发生严重，叶、果症状明显。

1.2.2.2 试验设计 10%苯醚甲环唑水分散粒剂1 000倍液，80%代森锰锌可湿性粉剂600倍液，64%苯醚甲环唑·代森锰锌可湿性粉剂(苯醚甲环唑和代森锰锌1∶7复配)1 500、1 000和500倍液，清水对照，共6个处理。每个处理4次重复(每小区供试树2株)，24个小区，随机区组排列。在柑桔新梢抽发期发病前开始进行施药，间隔10～15 d一次，共施3次。采用“MATABI”超绿16型背负式电动喷雾器喷雾，喷雾器工作压力3巴(约3个大气压)，喷孔口径1.0 mm，每分钟喷水量0.5 L，喷雾直径80～100 μm，喷幅1.0～1.2 m，每株树喷洒药液量1.0 kg，全株喷雾均匀。

1.2.2.3 调查方法 于第3次施药后15 d调查防治效果，并对药剂的安全性进行观察。参考《农药田间药效试验准则(二)》第102部分：杀菌剂防治柑桔疮痂病(GB/T17980.102—2004)，并结合柑桔炭疽病症状特点，对柑桔树炭疽病的发生情况进行分级调查[15]。每小区调查2株树，每株树按东、南、西、北、中5点取样，每点分级调查2个当年生夏梢的全部叶片，2株共查20个梢，统计病情指数和计算防治效果。病害分级：0级：无病；1级：病斑相连面积占整个叶片面积的5%以下；3级：病斑相连面积占整个叶片面积的6%～10%；5级：病斑相连面积占整个叶片面积的11%～25%；7级：病斑相连面积占整个叶片面积的26%～50%；9级：病斑相连面积占整个叶片面积的51%以上。

2 结果与分析

2.1 室内毒力

在离体条件下，苯醚甲环唑和代森锰锌对柑桔炭疽病菌有较好的室内活性，对菌丝生长的有效抑制中浓度(EC50)分别为0.583 2和1.224 3 mg/L。两者9种配比的混剂，共毒系数介于98和151之间。其中，苯醚甲环唑∶代森锰锌=1∶3、1∶1、3∶1、5∶1和7∶1等5种配比的混剂，共毒系数介于80到120之间，表现为相加作用；其余4个配比的混剂，共毒系数均大于120，表现为增效作用，尤其是苯醚甲环唑∶代森锰锌=1∶7的共毒系数最大，为150.25，此配比选为防治柑桔炭疽病的最佳配比(见表2)。

表2 苯醚甲环唑和代森锰锌不同配比复配对柑桔炭疽病联合毒力测定结果

2.2 防治效果

在广西，64%苯醚甲环唑·代森锰锌可湿性粉剂427、640和1 280 mg/kg对柑桔炭疽病的防治效果均在92%以上，比较理想，并且相互间及与对照药剂(10%苯醚甲环唑水分散粒剂100 mg/kg和80%代森锰锌可湿性粉剂1 333 mg/kg)之间防治效果的差异均无显著性(见表3)。

在重庆，64%苯醚甲环唑·代森锰锌可湿性粉剂427～1 280 mg/kg的防治效果在82.92%～88.51%之间，有较好的防治效果，其中，1 280 mg/kg的防治效果优于对照药剂的防治效果(接近80%)(见表3)。

在福建，64%苯醚甲环唑·代森锰锌可湿性粉剂427～1 280 mg/kg的防治效果在81.52%～85.23%之间，效果良好，分别与对照药剂相当(见表3)。

表3 64%苯醚甲环唑·代森锰锌可湿性粉剂防治柑桔炭疽病田间试验结果

据观察，苯醚甲环唑、代森锰锌单剂及复配剂田间施药后，均未发现对柑桔树生长及果实有不良影响，对捕食螨等有益生物也未产生不良影响，表明在柑桔树上使用安全。同时还发现对柑桔树脂病有兼治作用。

3 结论与讨论

本研究室内毒力测定显示，苯醚甲环唑与代森锰锌对柑桔炭疽病菌均具有很高的抑菌活性，EC50值分别仅为0.583 2和1.224 3 mg/L，两者不同比例复配对柑桔炭疽病菌表现为相加或增效作用，不存在拮抗作用，其中，苯醚甲环唑∶代森锰锌=1∶7的共毒系数最大，为150.25。本研究中苯醚甲环唑与代森锰锌复配的联合作用类型，与朱卫刚等[16]研究结果一致，与胡茂林等[17]部分一致。说明苯醚甲环唑与不同药剂复配可能出现不同类型的联合作用。

在室内，苯醚甲环唑和代森锰锌对柑桔炭疽病菌的抑菌活性都比较高，两者相比，苯醚甲环唑的毒力指数比代森锰锌要高出两倍；但在田间，苯醚甲环唑的防治效果与代森锰锌差不多。这可能与以下因素相关：一是柑桔炭疽病菌具有主要为害幼嫩枝条和果实而很难侵染老熟枝条的特性；二是试验园炭疽病情压力大，试验主要调查药剂对新梢的防治效果；三是代森锰锌田间有效成分用药量比苯醚甲环唑高很多。

本试验表明，在田间，代森锰锌对柑桔炭疽病具有良好的防治效果，最高达95.55%，苯醚甲环唑与代森锰锌(1∶7)复配对柑桔炭疽病菌的防治效果最低在81%以上、最高达97.62%。苯醚甲环唑与代森锰锌具有不同的作用机制，两者复配对柑桔炭疽病菌未表现出拮抗作用，且代森锰锌的价格远低于苯醚甲环唑，两者的复配既能充分利用苯醚甲环唑高抑菌活性和代森锰锌广谱性的特点，又能降低田间用药成本，有利于延缓抗药性产生，达到有效控制柑桔炭疽病为害的目的。供试浓度对柑桔安全，无药害，杀菌谱广，对柑桔树脂病有兼治作用。两者复配药剂在防治柑桔炭疽病上具有较好的应用前景。