结核患者痰结核杆菌检验的要点探讨

于杰

（吉林省吉林市龙潭区结核病防治所，吉林 吉林 132000）

0 引言

结核并具有较强的传染性和危害性，由结核分枝杆菌诱发，可经由呼吸道传播。该病多为老年群体高发，在慢性呼吸道疾病、糖尿病患者中有较高发病率，会导致患者出现盗汗、低热、消瘦等症，对人们的生命健康造成非常严重的威胁。从现阶段的现状来看，结核病的发病率逐年上升，已成为重点防治传染病之一。该病中的大部分患者均可经及时治疗后获得痊愈，故需及早予以诊断[1]。该病症在临床诊断过程中，常常需要根据患者的胸部X线来判定，但影像特异性不够明显，而且PPD实验的假阴性问题比较多，加之结核杆菌耐药性不断增强，因此采取更为合适的方法获得准确的检验结果非常重要。痰结核杆菌检验的方法主要为痰涂片显微镜检查（分为普通显微镜和荧光显微镜），这两种方法在临床的应用范围均比较广泛，为进一步了解两种方法的检测差异，本次研究选取70例研究对象进行对比分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料。选择2020年1月至2020年12月吉林省吉林市龙潭区结核病防治所进行痰结核杆菌检验的患者70例，其中男40例，女30例，年龄16～70岁，平均（42.16±3.46）岁。分别进行普通显微镜检查（普通显微镜组）和荧光显微镜检查（荧光显微镜组），所有患者均存在不同程度的乏力、午后低热、盗汗等症状，最终均在病理报告、痰片或荧光显微镜检查检查下确诊。

1.2 方法。收集患者晨起痰液标本，如果患者不能有效咳出痰液，则收集其咽拭子标本，即肺部分泌物。采集完毕后将痰涂片均送往实验室检验[2]。普通显微镜组：将酒精浸泡的玻璃片用镊子取出，将其放置与酒精灯上进行烘干，以有效消除载玻片上的油脂、酒精等。载玻片温度恢复到室温后，则可以将痰液标本涂成2 cm大小，厚薄适宜的痰膜，抗酸染色，将其放在光学显微镜下检查，若显示为3～9条/100条视野则可以判定为阳性，然后玻片经脱油干燥后进行有序保存。荧光显微镜组：对涂片进行干燥处理，取0.1%金胺0染色，15 min后，行5%盐酸酒精脱色，时间控制在3 min，予以0.5%高锰酸钾染色1 min，于室温下予以干燥处理，行以LED荧光显微镜镜检。需要注意的是，需控制好涂层的厚度，避免涂过厚，否则无法观察到单个的菌体，也不可涂太薄，防止出现找不到生物组织的情况，同时，也避免用力过猛对载玻片造成损害[3]。

1.3 统计学分析。在SPSS 20.0中完成本次研究数据，计量数据用（±s）表示，施以t检验，计数资料用（%）表示，施以χ2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

普通显微镜组发现阳性患者14例，占总人数20.00%；荧光显微镜组检查发现阳性患者52例，占总人数的74.29%，两组差异具有统计学意义（P＜0.05），详见表1。

表1 比较两组痰涂片显微镜检验结果

3 讨论

肺结核属于临床常见的呼吸系统疾病，发病后需要及时进行对症治疗，尽可能避免病灶发生转移现象。通常情况下，病灶会转移到肠道、肾脏等部位，导致临床治疗难度加大。此类患者随着病程的不断延长，大部分会出现多器官相应功能的减退[4]。相关调查研究显示，结核病的发病人群主要为青年。发生结合杆菌感染后，一般会有4～8周的潜伏期，这其中，主要以肺部感染结合杆菌为主，该病菌可侵入皮肤、骨骼、脑膜、颈淋巴等，主要通过呼吸道进行传染[5]。结核杆菌进入人体后，极易诱发结核病，对患者的神经系统、呼吸系统等会造成严重损害，进而对生活及正常工作造成严重影响。结核杆菌诱发呼吸系统疾病后，患者通常会出现低热、恶心呕吐、食欲不振等症状，严重者可能出现上腹部疼痛、反复高热等症状，不但危害到患者的身体健康，也会对其生命安全造成威胁[6]。近些年来，人们的生活质量不断提升，医疗机构相关规定也在不断完善，肺结核在临床的治疗效果也取得了极大程度的改善。不过，由于肺结核的早期临床症状不明显，在临床诊断过程中非常容易出现误诊问题，从而对临床治疗造成延误。所以，对于肺结核疾病，早期进行有效的诊断极其重要。

在以往的临床检验中，主要采用痰液涂片方式进行检验，这种检验方法操作简单，费用也比较低。对于结核病患者，结核杆菌是临床诊断该病的极其重要的指标，可以采用痰液抗酸染色法、痰培养法等方式检查。痰液涂片检验法对于痰液样本的质量要求比较高，灵敏度不高，阳性的检出率也不高，并不能为结核病患者提供有效的诊断意见，对于其病情的恢复及预后效果均不利[7]。在临床治疗方面，由于肺结核的治疗周期比较长，而斑菌转阴率是此类患者临床治疗效果判定的一个非常重要的依据，所以临床上需采取合理手段，来较为准确判断临床预后，从而为临床治疗提供有价值的参考意见[8]。现阶段，随着医疗技术的不断进步，荧光显微镜在临床已经得到非常成熟的发展。采用此种检验方式，可使工作人员在更短的时间内观察到更多视野，减轻了工作人员的负担。而且，发光柔和，对人的亲近性较好，不易产生视觉疲劳。此外，荧光显微镜检查法在暗色环境中会使抗酸杆菌发出橙黄色荧光，更易被发现，更为有效的探测特异性荧光，进而有效改善临床诊断准确率。

随着临床研究的不断深入，荧光显微镜检查方法在结核杆菌检验中的应用逐渐广泛起来。金胺0为盐酸氨基四甲二氨基苯甲烷，为荧光染色的染色剂，需在24 h内完成镜检。将其置于棕色瓶内，保存于暗处，在荧光显微镜下进行观察，可扩大观察范围，使结果更易于判读，从而在临床检测中可以为疾病的诊断提供准确的诊断依据，可有效指导临床治疗工作。本次研究结果显示，普通显微镜组发现阳性患者14例，占总人数20.00%；荧光显微镜组发现阳性患者52例，占总人数的74.29%，两组差异明显。这一结果表明，结核患者在检验痰结核杆菌时，荧光显微镜检查法对于痰结核杆菌的检出率更高。荧光显微镜检查法是现阶段新兴分子与基因结合的诊断方法，具有诊断速度快、特异性高、费用低等优点，相比痰液涂镜片检验方法，更值得在临床进行应用。可为临床治疗工作的开展提供重要参考依据，最终使疾病治疗预后得以强有力的改善。但需注意的是，虽然LED荧光显微镜镜检方法的应用，可使痰涂片检测阳性率提高，并使痰涂片检测阳性率提高，减轻实验室人员工作量。然而，若镜检人员缺乏经验，则会使结果出现失误。因此，需对阅片人员进行系统化的培训，并在有经验的人员协助下展开阅片，为确保痰涂片的质量，需要避免阳光直射，将其放在不透明玻片盒里进行保存，以盲法质量控制，以免有错误出现时，可对错误痰涂片进行重新脱色与复染，进而进行再次检测，获取结果。空气传播是结核病传播的主要途径，想要有效控制结核病的流行，需要加强对病原体经空气传播进行控制，在日常生活中养成良好的生活习惯，对于已经确诊的患者，需要严格做好痰液传播防护措施，不可随意吐痰，加强卫生消毒工作及个人防护工作。结核患者所处的环境，应保持良好的通风，减少空气中的结核杆菌，并勤换衣物，做好个人卫生。同时对于结核病，早发现早治疗是关键，及时就诊，依据医师要求规律服药治疗，以最大限度的控制病情进展，推进机体康复。

痰结核杆菌检验过程中为提高阳性率，也需要注意下述内容。不管是初治还是反复住院患者，其入院后的痰标本检查均非常重要，需要让患者意识到采集痰标本的重要性，不可随便吐痰留取，痰标本是否合格为疾病得到准确诊断的重要条件，故需充分重视标本采集环节。对患者进行针对性的健康教育，为其讲解肺结核相关知识，明确阳性检出率与痰标本质量的关系，以及检验结果对治疗方案的影响，从而使患者在留取痰标本过程中具有良好的自觉性和依从性。在采集痰标本期间，应当选择平坦、宽敞的标本盒，便于检验人员进行观察和挑出可疑的部分，以提升痰涂片抗酸杆菌的阳性检出率。护士是否正确指导患者留取痰标本，也会对痰菌的检出率产生影响，因此，护士必须向患者正确讲解留取痰标本的方法。正确的方法应是，晨起用清水漱口，深呼吸后用力咳嗽，咳出呼吸道深部的痰液，每天采集一次，连续采集三天。对于咳嗽无痰、痰少或无力咳痰的患者，应当通过诱导方式进行排痰，临床检验工作中主要采用胸部叩击排痰法、雾化吸入、人工采集法。相对而言，晨痰的抗酸杆菌阳性率高于夜间痰及即时痰，所以需要指导患者连续3天留取晨痰，以提升涂片阳性率。标本采集成功后需要进行全面检查，对于不合格的标本需要进行重新采集。而采集后的标本必须尽快送检，如果不能立即进行送检，可以将标本放在4℃的冰箱中。

另外，不同性状的痰标本阳性检出率也有明显差异。通常痰液性状分为干酪痰、血痰、黏液痰、水样痰，黄色、脓样、团块状肺部分泌物属于干酪痰，是最有价值的痰标本。血痰和黏液痰相比干酪痰，检出率明显较低，水样痰检出率次之。在肺结核患者痰结核杆菌检验过程中，也需要采用正确的检验操作方法。按照实验室的操作规定，在涂片过程中要尽量选择干酪痰，而含血标本属于破坏的肺组织，在选取时应尽可能选择含血部分。在加热染色过程中不能让染液沸腾，脱色时间也不能过长，因为脱色后的染液中很难辨认出抗酸杆菌。在痰液冲洗过程中应保持缓慢的水流，须从一侧进行冲洗，不可直接冲洗[9]。而在患者痰标本构成方面，黏液痰和唾液痰所占比例比较大，脓样痰比例相对较少，这主要与患者未掌握咳痰技巧和方法有关。肺结核患者痰液标本主要来自上呼吸道，其成分构成主要为口腔分泌物、咽部分泌物，而脓样痰主要来自下呼吸道，主要是由肺部病变部分的坏死组织及支气管分泌物构成，其中结核分支杆菌的含量比较高，所以，在留取标本过程中，非常有必要对患者留痰行为进行干预和指导。此外，在引痰前需要初步评估患者的病情、治疗情况、心理状况等各项因素，需要向患者解释10%的浓盐引痰不会造成痛苦，也不会引起毒副作用。这种引痰方法比较经济适用，安全性也较高，患者的接受度及配合度也较高。做好各项引痰前的护理干预措施，才能有效保证痰液标本的合格率。

综上所述，荧光显微镜检查法能够有效提升结核患者阳性率，可以为临床工作提供非常科学的指导，在患者的临床治疗及预后中起着非常重要的作用，这种检验方法值得在临床中进行普及。