血清CTRP9、sRANKL、cathepsin S水平与冠心病严重程度的关系研究

石秀彩，马妹花，张海娟，吴海涛，邵丽莉

邯郸市第一医院心血管内科，河北邯郸 056001

冠心病是临床常见的严重心血管疾病，多发于中老年人，发病率呈逐年增长的趋势，严重危害人们的生命健康[1]。冠心病的病理特征为冠状动脉粥样硬化形成的斑块破裂/游离，形成动脉血栓造成动脉管腔堵塞，进而发展为心肌缺血[2]。临床研究表明，脂肪细胞因子在机体血压、胰岛素敏感程度、纤溶活性的调节中起着重要作用，且与冠心病的发生、发展密切相关[3]。也有研究表明，在冠心病的发生、发展过程中，炎性反应与粥样硬化斑块的产生、恶化、碎裂密切相关[4]。因此，研究炎性因子、脂肪细胞因子的表达水平与冠心病发生、发展及严重程度之间的关系对疾病的防治具有重要意义[5]。组织蛋白酶S(cathepsin S) 作为一种半胱氨酸蛋白，在人体内可以通过降解胶原蛋白和弹力蛋白来加速血管壁重构。相关研究发现，cathepsin S能够调节血管炎性反应，与动脉粥样硬化、冠心病、心力衰竭等心血管疾病的发生密切相关[6]。肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP9)作为一种和脂联素高度同源的新型脂肪细胞因子，主要由心血管组织和脂肪组织分泌，其在保护心肌、改善内皮功能、舒张血管等方面发挥作用，CTRP9可以通过激活AMPK通路来减少心肌细胞凋亡，缩小心肌缺血再灌注后心肌梗死范围；亦能通过AdipoR1/AMPK/eNOS/NO信号通路促进血管舒张，抑制冠心病的发生、发展[7]。可溶性核因子-κB受体活化因子配体(sRANKL)是肿瘤坏死因子(TNF)受体配体家族成员，主要由T淋巴细胞和成骨细胞分泌，可通过诱导单核、巨噬细胞聚集-浸润的途径来损伤血管，促进粥样斑块生长，诱导血管细胞凋亡并促进血管钙化，引起冠心病的发生、发展[8]。本研究对本院收治的冠心病患者进行研究，探讨血清CTRP9、sRANKL、cathepsin S水平与冠心病发生、发展及疾病严重程度之间关系，以期为冠心病的临床治疗提供研究基础。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取本院2018年1月至2019年12月收治的冠心病患者180例作为观察组。纳入标准：(1)符合美国心脏病学会2007年冠心病诊断标准[9]；(2)肝、肾功能正常；(3)无严重恶性肿瘤。排除标准：(1)既往接受冠状动脉介入治疗；(2)入组前3个月内接受过抗炎或抗凝治疗；(3)甲状腺功能异常；(4)合并严重恶性肿瘤或全身感染；(5)主动申请退出本研究。另选取同期无冠心病家族史的体检健康者100例作为对照组。观察组男79例，女101例，年龄(56.38±7.23)岁，体质量指数(24.08±1.13)kg/m2，吸烟史71例，饮酒史32例。对照组男41例，女59例，年龄(57.11±6.94)岁，体质量指数(23.99±1.09)kg/m2，吸烟史38例，饮酒史21例。两组一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准，所有受试者对本研究知情并签署知情同意书。

1.2方法 在受试者入组后采集空腹静脉血，离心后收集血清，采用酶联免疫吸附试验检测血清CTRP9、sRANKL、cathepsin S水平。所用试剂盒均购买自杭州联科生物科技有限公司并严格遵照试剂盒说明书进行操作。通过彩超检查评估冠心病患者血管病变支数，并分为单支病变组、双支病变组及三支病变组。分析CTRP9、sRANKL、cathepsin S鉴别诊断冠心病的价值，并采用Logistic回归模型分析CTRP9、sRANKL、cathepsin S与疾病严重程度的关系。

2 结 果

2.1两组血清CTRP9、sRANKL、cathepsin S水平比较 观察组血清CTRP9及sRANKL水平明显低于对照组，cathepsin S水平明显高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组血清CTRP9、sRANKL、cathepsin S水平比较

2.2不同血管病变支数患者血清CTRP9、sRANKL、cathepsin S水平比较 单支病变组、双支病变组及三支病变组患者血清CTRP9、sRANKL、cathepsin S水平比较，差异均有统计学意义(P<0.05)，其中单支病变组血清CTRP9及sRANKL水平最高，cathepsin S水平最低。见表2。

表2 不同血管病变支数患者血清CTRP9、sRANKL、cathepsin S水平比较

2.3CTRP9、sRANKL、cathepsin S与患者血管病变严重程度的关系 Logistic回归分析结果显示，CTRP9、sRANKL及cathepsin S是患者病变严重程度的独立影响因素(P<0.05)。见表3。

表3 CTRP9、sRANKL、cathepsin S与患者血管病变严重程度的关系

2.4各指标对冠心病的诊断价值 ROC曲线分析结果显示，CTRP9、sRANKL、cathepsin S及三者联合应用诊断冠心病的敏感度、特异度均较高，ROC曲线下面积(AUC)均大于0.85。见表4及图1。

表4 各指标对冠心病的鉴别诊断价值

图1 各指标诊断冠心病的ROC曲线

3 讨 论

冠心病是临床常见的疾病，多为冠状动脉粥样硬化斑块破溃后产生的急症，而斑块破裂则是在不稳定斑块的基础上发生的，斑块的分布形态及组成成分较为复杂，且在斑块稳定性中起着决定性作用，因而对冠心病患者疾病严重程度进行及时有效的评估具有十分重要的意义[10]。有学者指出，动脉粥样硬化斑块由覆盖的纤维帽及脂质粥样物质组成，其中富含脂质的泡沫细胞、胆固醇结晶、细胞碎片是组成脂质粥样物质的核心，斑块核心成分、大小、纤维帽厚度决定斑块稳定性，不稳定斑块多数为偏心性，其中偏心性纤维帽边缘较薄，可观察到伴随出现浸润性大量炎性细胞，如泡沫细胞、巨噬细胞。临床上，及早对冠心病患者的发生、发展及疾病严重程度进行评估，有助于及时采取手段进行干预，具有重要的临床指导意义[11-12]。传统评估冠心病患者病情的方法主要为有创性检查，包括选择性冠脉造影术、血管内超声术、光学相干断层成像技术等，但其临床接受程度较低，临床应用受限，因而选择无创检测手段对冠心病患者病情进行评估具有重要意义[13]。

CTRP9是体内重要的同脂联素(APN)结构接近的旁系同源蛋白，在脂肪细胞中CTRP9表达水平较低，但在心脏细胞中其表达水平相对较高[14]。动物实验研究结果显示，CTRP9可有效调节糖代谢并发挥抗动脉粥样硬化作用，降低肝细胞中的脂质堆积，调节胰岛素介导的葡萄糖摄取，改善新陈代谢[15]。有研究发现，RANK可与RANKL竞争性结合，二者具有较高的亲和力，RANK与RANKL相互作用可有效诱导核转录因子-κB向细胞核内转移，诱发细胞内级联反应信号[16]。RANKL存在跨膜结合蛋白和游离型多肽两种形式，有研究显示，随着心脏病患者病情加重，其功能型RANKL结合能力增强，sRANKL水平降低，急性心血管事件发生与血清RANKL水平密切相关[17]。cathepsin S蛋白可有效诱导粥样斑块内血管新生、降解细胞外基质、增加斑块不稳定性、促进泡沫细胞形成[18]。cathepsin S可有效抑制内皮细胞蛋白酶激活受体，后者可以诱发内皮功能不全并导致动脉粥样硬化，减少巨噬细胞内脂质外流，并可能加速泡沫细胞形成。

本研究结果显示，观察组血清CTRP9及sRANKL水平明显低于对照组，cathepsin S水平明显高于对照组；进一步分析发现，血管单支病变、双支病变及三支病变组患者血清CTRP9、sRANKL、cathepsin S水平差异有统计学意义(P<0.05)，其中单支病变组CTRP9及sRANKL水平最高，cathepsin S水平最低。Logistic回归模型分析结果显示，CTRP9、sRANKL及cathepsin S是冠心病患者疾病严重程度的独立影响因素。此外，各指标诊断冠心病的ROC曲线分析结果显示，CTRP9、sRANKL、cathepsin S鉴别诊断冠心病的敏感度及特异度较高，且AUC>0.85，提示CTRP9、sRANKL、cathepsin S及三者联合检测对冠心病有较好的鉴别诊断价值。此外，sRANKL及cathepsin S水平异常可能加重患者体内炎性反应及增加动脉粥样硬化纤维帽不稳定性。

综上所述，血清CTRP9、sRANKL、cathepsin S水平是影响冠心病患者病情严重程度的独立影响因素，可作为诊断冠心病的重要指标。但本研究并未对患者进行长期随访，有待后续深入研究分析。