宁夏固原地区肉母牛三种疫病免疫抗体监测分析

邓占钊，杨春莲，谢文青，赵永红，摆世林，梁小军

（1.宁夏农林科学院 动物科学研究所，银川 750002；2.彭阳县畜牧技术推广服务中心，宁夏 彭阳 756599；3.固原市畜牧技术推广服务中心，宁夏 固原 756000；4.海原县畜牧产业发展服务中心，宁夏 海原 755299；5.海原县国有林场和草原建设服务中心，宁夏 海原 755299；6.宁夏向丰农牧业开发有限公司，宁夏 西吉 756200）

口蹄疫是由口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus，FMDV）引起的，发生于偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病，世界动物卫生组织将口蹄疫列为动物A类烈性传染病［1］。口蹄疫病毒分为O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3、亚洲Ⅰ型7种血清型［2］，感染后病畜出现发热、跛行、皮肤出现泡状斑疹等症状，犊牛感染严重时可能会出现心脏麻痹并迅速死亡的情况［3］，我国农业部（现为农业农村部）规定牛羊口蹄疫的免疫效果达到70%为合格［2］。

布鲁氏杆菌病（Brucellosis）又称“波浪热”“地中海弛张热”，是由布鲁氏杆菌引起的人畜共患的自然疫源性传染病，是我国《传染病防治法》规定的需要报告的二类传染病［4］。感染后引起人的波浪热、妊娠动物流产以及公畜生殖功能障碍等病症［5］，布鲁氏杆菌病的传播对世界范围内的生命健康与社会安定造成重大威胁。

牛传染性鼻气管炎（infectious bovine rhinotracheitis，IBR）又称“坏死性鼻炎”“红鼻病”［6］，是由Ⅰ型牛疱疹病毒（BHV-1）引起的牛呼吸道接触性传染病［7］，是我国《传染病防治法》规定的需要报告的二类传染病。感染后病畜的临床表现主要以上呼吸道症状和流产为主要特点［6］，该病在世界范围内流行，对母牛产奶量、公牛繁殖力及役用牛的使役力均有较大影响。

目前，我国对动物疫病的防治采取“预防为主、防重于治”的原则，在临床上疫苗免疫为预防疫病的首要措施［8］。为了解2018—2020年宁夏回族自治区（O型、A型）口蹄疫、布鲁氏杆菌、牛传染性鼻气管炎免疫情况，试验采用ELISA检测方法对固原市两地区的肉母牛6 140份血清样本进行免疫抗体监测，以期为规模化养殖场及时调整免疫程序和制订疫病防控措施提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 样本来源

2018—2020年，从宁夏回族自治区固原市西吉县马沟村（A地区）、杨坪村（B地区）两地区共采集基础母牛血清样本6 140份，A、B两地肉牛基础母牛品种均为西门塔尔。采用真空抗凝采血管通过基础母牛尾静脉采集血液。A地区2018年采集血样900份，2019年1 140份，2020年1 500份；B地区2018年采集血样700份，2019年900份，2020年1 000份。

1.2 血液的处理

血样采用离心机在3 000 r／min离心15 min分离血清，所有血清于-80℃保存。

1.3 主要试剂仪器与试剂

移液器（Eppendorf plus）、Eppendorf Centrifuge（5418）离心机，Eppendorf公司产品；MULTISJKAN酶标仪（MK3），Thermo公司产品。所有试验仪器均来源于宁夏农林科学院动物科学研究所动物疫病实验室。

O型口蹄疫抗体阻断ELISA检测试剂盒（E310306）、A型口蹄疫抗体阻断ELISA检测试剂盒（E310307），购自深圳芬德生物技术有限公司；布鲁氏杆菌ELISA检测试剂盒（P04130-10）、牛传染性鼻气管炎ELISA检测试剂盒（99-41459），购自美国爱德士（IDEXX）生物科技股份有限公司。

1.4 检测项目和方法

在宁夏农林科学院动物科学研究所动物疫病实验室开展病原抗体ELISA检测。严格按照O型口蹄疫抗体阻断ELISA检测试剂盒、A型口蹄疫抗体阻断ELISA检测试剂盒、布鲁氏菌抗体检测试剂盒、牛传染性鼻气管炎ELISA检测试剂盒的说明书进行血清样本抗体检测。试验数据采用北京爱德士元亨生物科技有限公司提供的数据分析软件（xChek）计算平均值，并结合说明书中的阴性和阳性结果判定标准进行样品阴阳性判断。

2 结果

2.1 A地区

抗体检测结果见表1。

表1 2018—2020年固原市A地区疫病抗体检测结果

由表1可以看出：2018—2020年间，O型口蹄疫、A型口蹄疫、布鲁氏杆菌病、牛传染性鼻气管炎的总体阳性率分别为92.75%、93.64%、97.78%；其中O型口蹄疫抗体阳性率分别为95.00%、94.91%、99.27%；A型口蹄疫抗体阳性率分别为92.44%、91.23%、94.13%，布鲁氏杆菌抗体阳性率分别为93.78%、98.77%、100%，牛传染性鼻气管炎抗体阳性率为89.78%、89.65%、97.73%。

2.2 B地区

抗体检测结果见表2。

由表2可以看出：O型口蹄疫、A型口蹄疫、布鲁氏杆菌病、牛传染性鼻气管炎的总体阳性率分别为93.96%、95.19%、96.33%，其中O型口蹄疫抗体阳性率分别为95.29%、98.89%、98.90%，A型口蹄疫抗体阳性率分别为92.57%、92.44%、96.00%，布鲁氏杆菌抗体阳性率分别为97.14%、99.22%、99.00%，牛传染性鼻气管炎抗体阳性率为90.86%、90.22%、91.40%。

表2 2018—2020年固原市B地区疫病抗体检测结果

3 讨论与建议

2018—2020年免疫抗体检测结果显示，固原市两地区肉牛O型口蹄疫、A型口蹄疫、布鲁氏杆菌病、牛传染性鼻气管炎的整体抗体阳性率均在92%以上，呈逐年增长的趋势。说明这两地区的基层动物防疫工作职责落实到位，制定的肉牛免疫程序正确有效。A、B地区整体抗体阳性率有一定的差异，分析原因可能有以下几点：一是肉牛个体间存在差异；二是防疫人员技术水平不一，不同类型抗体疫苗及疫苗注射方式也会影响疫苗免疫效果［9］；三是各地采集方式和保存血清条件不一致，不同运输条件和时长都会对血清抗体有不同程度的影响［10］。

宁夏回族自治区家畜养殖规模逐年扩大，为巩固当前动物疫病防控工作成效，建议在今后的防疫工作中注意以下几点：一是加强基层兽医队伍建设，定期对基层技术人员进行培训，提高基层技术人员的理论知识和实际操作能力；二是养殖场需建立更加全面合理的免疫程序机制，提高动物对重大疫病的抵抗力；三是持续做好重大疫病的抗体监测工作，定期抽检，发现问题及时补免，确保免疫到位；四是在进行动物免疫时，免疫剂量、免疫部位及免疫注射部位等要求一定要按照规范的免疫程序进行；五是规范样品的采集及运输条件，避免因运输条件不当影响血清抗体效价。