甘肃陇东南规模养牛场常发二三类牛病的血清流行病学调查

王 玙 ， 王建强

(天水市动物疫病预防控制中心 ， 甘肃 天水 741000)

近年规模养牛场越来越多，养殖密度越来越大，牛和牛产品间的交流活动越来越频繁，使得牛传染性疫病的传播、发生以及多病原混合感染的机率也随之增加。疫病的发生不仅造成动物生产性能、畜产品品质下降，还造成了环境污染、防治费用增加等损失，同时还对人们的健康和食品安全带来严重威胁。为了解甘肃陇东南地区规模养牛场常发二三类疫病的流行状况，本试验采用ELISA试验、胶体金试验、虎红平板凝集试验和试管凝集试验等检测方法，对甘肃省天水市养殖密集县区及与天水周边接壤地区(如陇南、平凉、定西等)的32个临床表现健康的未免疫牛产气荚膜梭菌、牛巴氏杆菌病、牛支原体肺炎病、牛布鲁氏菌病、大肠埃希菌病，牛传染性鼻气管炎、牛流行热、牛流行性腹泻、牛病毒性关节炎和弓形虫病的规模养牛场的2 520份血清样本分别进行了相应的疫病检测。初步摸清了当前甘肃陇东南地区主要传染性牛病的感染种类及流行现状，为今后牛病的防控提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试剂 牛产气夹膜梭菌(A型) ELISA检测试剂盒、牛产气荚膜梭菌(C型)ELISA检测试剂盒、牛产气荚膜梭菌(D型)ELISA检测试剂盒、牛鼻气管炎(BR)ELISA试剂盒、牛巴氏杆菌抗原ELISA试剂盒、牛支原体肺炎抗体(CBPP-Ab)ELISA试剂盒、大肠埃希菌O157志贺毒素ELISA检测试剂盒，均购自上海江莱生物科技有限公司；牛流行性腹泻ELISA检测试剂盒、牛病毒性关节炎ELISA检测试剂盒，均购自上海雅浦生物科技有限公司；牛流行热病毒抗体EFV-Ab ELISA检测试剂盒，购自南京海克尔生物科技有限公司；牛弓形虫抗体检测卡，购自上海快灵生物科技有限公司；牛布鲁氏菌病虎红平板凝集试验抗原及试管凝集试验抗原，购自青岛易邦生物科技有限公司。

1.2 血清采集与分离 选择32个临床表现健康、未免疫产气荚膜梭菌、牛巴氏杆菌、放线菌、牛布鲁氏菌、大肠埃希菌等细菌性疫病，牛传染性鼻气管炎、牛流行热、牛流行性腹泻、牛病毒性关节炎、弓形虫等病的规模养牛场，对其奶牛及肉牛进行颈静脉采血，每头牛采集血液2～2.5 mL。将采集的新鲜血液加到1.5 mL 无菌 EP 管中，放入 37 ℃ 恒温培养箱中静置 30 min，自行析出血清后再将 EP 管放入 4 ℃ 冰箱中，充分析出血清。3 000 r/min 离心5 min后，用移液枪吸取上层血清至另一个新的无菌的 EP 管中，做好标记后置于-20 ℃ 保存，待检。共采集血液样本2 520份。

1.3 感染抗体及抗原检测 采用 ELISA 方法对采集的样品进行产气荚膜梭菌(A型)、牛产气荚膜梭菌(C型)、牛产气荚膜梭菌(D型)、牛鼻气管炎、牛巴氏杆菌抗原、牛支原体肺炎抗体、大肠埃希菌O157志贺毒素，牛流行性腹泻、牛病毒性关节炎、牛流行热病毒抗体检测。采用胶体金技术对采集的样品进行牛弓形虫病检测、采用虎红平板凝集和试管凝集方法对采集的样品进行牛布鲁氏菌病检测。

2 结果

2.1 不同疫病的感染情况 见表1。本次共检测牛二三类传染性疫病共计12种，其中阳性感染的疫病11种。血清学检测结果及数据统计分析显示，12种疫病的感染率由高到低的排序分别为牛巴氏杆菌病61.9%>牛流行性腹泻42.80%>牛大肠埃希菌病34.52%>牛病毒性关节炎18.75%>牛鼻气管炎9.17%>牛产气荚膜梭菌-A 6.23%>产气荚膜梭菌-D 5.45%>产气荚膜梭菌-C 3.89%>牛流行热2.98%>牛支原体肺炎2.38%>牛布鲁氏菌病0.12%>牛弓形虫病0。

2.2 不同疫病的场感染情况 见表1。本次血清学调查场感染率由高到低的排序分别是牛巴氏杆菌病100%>牛大肠埃希菌病53.13%>牛病毒性关节炎37.50%>牛产气荚膜梭菌-A 31.25%>牛鼻气管炎25.00%=产气荚膜梭菌-D 25.00%>牛流行性腹泻21.88%>产气荚膜梭菌-C 18.75%>牛流行热9.38%>牛支原体肺炎3.13%=牛布鲁氏菌病3.13%>牛弓形虫病0。

表1 32个规模养牛场常发二三类疫病感染统计Table 1 Statistics on the infection of common class Ⅱ and Ⅲ diseases in 32 lavge-scale cattle farms

2.3 不同疫病的混合感染情况 见表2。通过实验室检测分析，混合感染主要以牛大肠埃希菌以及牛巴氏杆菌与其他疫病感染情况最多，其次为牛传染性鼻气管炎混合其他疫病感染。其中2种疫病混合感染的血清数量为64份，3种疫病混合感染的血清数量为20份，4种疫病混合感染的血清数量为6份。

表2 32个规模养牛场常发二三类疫病混合感染统计Table 2 Statistics of mixed infection of common class Ⅱ and Ⅲ diseases in 32 large-scale cattle farms

3 讨论

本试验采取流行病学调查及血清学检测，对甘肃省天水市养殖密集县区及天水周边接壤地区(如陇南、平凉、定西等)的牛传染性疫病进行调查与评估。通过询问养殖户主、诊治兽医、附近居民等疫病知情者，采用座谈的方式，调查涉及到传播源、传播媒介等相关问题，在询问调查的基础上，根据疫病发生情况，广泛收集历年疫病发生相关信息资料，并进行系统分析，概括出甘肃陇东南地区规模养牛场近年来常发二三类疫病的病种及发病规律，从而选择有代表性的32个规模养牛场采集血清样本并有针对性的进行牛二三类传染性疫病的检测。

检测表明，目前甘肃陇东南地区主要流行及危害严重的二三类牛传染性疫病主要有11种，即牛流行热、大肠埃希菌病、巴氏菌病、布鲁氏杆菌病、产气荚膜梭菌、牛支原体肺炎和副结核病等，病毒性传染病如牛病毒性腹泻/黏膜病、牛传染性鼻气管炎、病毒性关节炎等；混合感染主要以牛大肠埃希菌以及牛巴氏杆菌与其他病感染情况最多，其次为牛传染性鼻气管炎混合其他疫病感染。由此说明要解决好辖区内规模养牛场疫病混合感染问题首先要做好牛大肠埃希菌、牛巴氏杆菌、牛鼻气管炎这3种疫病的防控。

由于甘肃陇东南本地区少数民族较多，养牛业是本地区畜牧产业中的重要产业，在养牛产业发展的同时必须重视牛病的防控工作，这是关乎国民经济快速发展的关键[1]。因目前二三类动物疫病非国家强制免疫病种，加之部分养殖户尚且缺乏疫病防范与控制的相关知识，主动性积极性不足，故要想彻底净化控制这些疫病的发生和传播是一项长期的任务，必须制定并实施科学有效的预防控制措施，同时以病原学检测为重点，开展相应的防控实验研究，以达到长期有效的控制动物疫病的发生和流行。