新血压分类人群外周血辅助性T细胞/调节性T细胞的变化及临床意义

熊 上，王瑞英，路申潞，郑晓斌

继2003年JNC-7提出“高血压前期”这一概念将高血压的防治线前移之后，2017年美国心脏协会/美国心脏病学会(AHA/ACC)指南又重新定义了血压分类标准，收缩压<120 mmHg(1 mmHg =0.133 kPa)且舒张压>80 mmHg为正常血压，120 mmHg≤收缩压<129 mmHg且舒张压>80 mmHg为血压升高，130 mmHg≤收缩压≤139 mmHg和(或)80 mmHg≤舒张压≤89 mmHg为高血压1级，收缩压≥140 mmHg和(或)舒张压≥90 mmHg为高血压2级。明确指出在之前未纳入高血压标准的高血压前期时已有较高的心肌梗死、脑卒中等风险，该分类进一步加强了人们对高血压的重视，尽早进行高血压的防治工作，以延缓高血压疾病的发展，减少未来心脑血管事件发生的风险。目前已有研究表明，代表免疫平衡的外周血辅助性T细胞(Th17)/调节性T细胞(Treg)比值(Th17/Treg)与细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)水平均与高血压有密切联系[1-4]。但在新的高血压分类标准中，Th17/Treg与细胞因子水平变化是否在血压不同时期有不同的表现以及血压升高过程中Th17/Treg与该3种细胞因子水平之间是否有关联尚未得知。本研究观察血压各分类组外周血Th17细胞绝对计数、Treg细胞绝对计数、Th17/Treg及细胞因子IL-6、TNF-α、IFN-γ水平的变化，探究血压与Th17/Treg及细胞因子的相关性、Th17/Treg与细胞因子的相关性，了解免疫状态与细胞因子对血压的评估情况，为高血压临床干预提供有效证据。

1 资料与方法

1.1 研究对象 入选2019年1月—2019年7月就诊于山西医科大学第二医院门诊及住院的病人共288例，排除继发性高血压、肝肾功能不全、急慢性感染、糖尿病、肿瘤、免疫系统疾病、近期服用激素及免疫调节剂等情况。按血压值分为正常血压组(94例)、血压升高组(78例)、高血压1级组(61例)、高血压2级组(55例)。

1.2 研究方法

1.2.1 收集资料 收集所有符合研究要求观察对象的一般资料：性别、年龄、心率、身高、体重、体质指数(BMI)、收缩压、舒张压。血压测量使用台式水银血压计测量血压，被检者均为服用降压药并在测量血压前30 min内禁止吸烟、喝浓茶或咖啡等，在安静环境中休息至少5 min，间隔2 min重复测量同侧肱动脉血压3次取平均值。

1.2.2 观察指标 禁食10 h后于清晨空腹抽取静脉血，使用Beckman LX 20分析仪测量丙氨酸氨基转移酶(alanine transaminase，ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate amino transferase，AST)、尿素、肌酐、空腹血糖(fasting blood-glucose，FBG)、总胆固醇(cholestenone，TC)、三酰甘油(triglyceride，TG)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)等血清学指标，试剂均由Beckman公司提供。采用流式细胞仪测定血清Th17细胞绝对计数(3.07～14.00个/μL)、Treg细胞绝对计数(17.70～54.20个/μL)，计算Th17/Treg。采用CBA流式细胞仪微球捕获芯片技术方法测定血清IL-6、TNF-α、IFN-γ浓度。检测相关仪器及材料均购自美国Calibur BD。

2 结 果

2.1 4组研究对象临床资料比较 4组性别、年龄、心率、ALT、AST、尿素、肌酐、HDL水平比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。4组收缩压、舒张压、BMI、FBG、TC、TG、LDL、Th17细胞绝对计数、Treg细胞绝对计数、Th17/Treg、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平比较差异有统计学意义(均P<0.05)。详见表1。

表1 4组临床资料比较

2.2 Th17/Treg及细胞因子与收缩压、舒张压的相关性分析 Pearson相关性分析显示Th17/Treg及细胞因子与收缩压及舒张压均呈正相关。详见表2、表3。

表2 Th17/Treg及细胞因子与收缩压的相关性

表3 Th17/Treg及细胞因子与舒张压的相关性

2.3 Th17/Treg与细胞因子的相关性分析 Pearson相关性分析显示Th17/Treg与细胞因子IL-6、TNF-α、IFN-γ水平均呈正相关。详见表4。

表4 Th17/Treg与细胞因子的相关性

2.4 多元线性回归分析 以BMI、FBG、TC、TG、LDL、Th17细胞绝对计数、Treg细胞绝对计数、Th17/Treg、IL-6、TNF-α、IFN-γ为自变量，以收缩压、舒张压为因变量行多元线性回归分析，结果显示BMI、TC、Th17/Treg、IL-6、TNF-α、IFN-γ与收缩压、舒张压存在线性关系。详见表5。

表5 多元线性回归分析结果

3 讨 论

高血压是既广泛又难以预测的慢性疾病之一，而其又易引起心、脑、肾、血管等多种靶器官损伤，导致许多不可逆的器官功能障碍，严重影响人们生活质量。因此，积极预防与控制疾病的发展为当下的首要任务，而重新定义的高血压分类及诊断正是为了警醒人们进行早期监测与预防。

Th17细胞是CD4+T细胞亚群的一种，产生的IL-17可诱导多种炎性因子释放；而Treg细胞则可产生抗炎因子白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因-β(TGF-β)并进行负向免疫调节，即抑制其他免疫或非免疫细胞。目前认为其二者之间并不是单独的排斥作用，它们之间还存在相互刺激、促进、调和的作用，Th17/Treg恰好可以反映这种免疫/炎症的动态平衡。Taylor等[1]发现在大鼠模型中随着血压升高Th17细胞比例也在增加，研究发现原发性高血压病因之一可能就与Treg比例的降低有关[2]，而高血压中微血管损伤亦与Treg细胞的降低有关[5]，Du等[6]证明Th17与Treg的免疫失衡参与了血管紧张素Ⅱ诱导高血压并造成靶器官受损的过程。本研究表明Th17/Treg水平的变化在血压升高的不同时期均有差别，进一步证明了其随血压升高而增加的趋势，并提示在血压升高时期已有免疫失衡的表现。

IL-6、TNF-α、IFN-γ均为活化的T细胞产生的促炎因子。IL-6不仅可以诱导Th17的发育并抑制 Treg 细胞的分化形成，而其本身还能诱导黏附因子和趋化因子的表达，活化炎症细胞，诱导单核-巨噬细胞释放TNF-α，参与血管的炎症反应。IFN-γ的分泌受T细胞盐皮质激素受体的调节从而进行血压的控制[7]。本研究结果显示，IL-6、TNF-α、IFN-γ水平在高血压2级之前已存在随血压而升高的趋势，在高血压标准之前便出现炎性因子的增加，故在未诊断高血压人群中有很大一部分需密切关注血压的发展。

本研究结果显示，Th17/Treg、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平与血压有线性回归关系，且Th17/Treg又与IL-6、TNF-α、IFN-γ相关性，可推断在血压升高的早期就已经存在细胞因子的紊乱与免疫失衡，它们之间有相互联系并且参与了血压的升高过程，是导致高血压形成的原因之一。提示可将Th17/Treg、IL-6、TNF-α、IFN-γ作为血压升高的早期预测、评估指标，提早进行高血压的防治工作，而以此为靶点发展高血压治疗的新方法有待进一步的研究与探讨。