富血小板血浆对难治性皮肤溃疡创面愈合及肉芽组织中TGF-β1及EGF表达的影响

杨丽英 罗鹏 陈玲

[摘要]目的：探讨富血小板血浆联合混合换药对难治性皮肤溃疡的治疗效果及其对肉芽组织中TGF-β1及EGF表达的影响。方法：选择68例难治性皮肤溃疡患者，随机分为对照组和观察组，每组34例。两组患者均给予混合换药治疗，观察组另给予富血小板血浆凝胶治疗。治疗12周后评估两组患者临床疗效、创面愈合时间、创面愈合美学满意度;PRP治疗前及治疗后第7天、第14天比较两组患者创面肉芽组织中转化生长因子β1（Transforming growth factor，TGF-β1）及表皮生长因子（Epidermal growth factor，EGF）表达水平。结果：观察组临床有效率为97.1%（33/34），对照组为73.5%（25/34），差异有统计学意义（P<0.05）。观察组创面愈合时间为（25.6±4.6）d短于对照组的（32.7±5.1）d，差异有统计学意义（P<0.05）。观察组创面愈合美容满意度为91.2%（31/34）高于对照组的67.6%（23/34），差异有统计学意义（P<0.05）。PRP治疗前两组肉芽组織中TGF-β1及EGF表达水平比较差异无统计学意义（P>0.05）;治疗后第7天、第14天两组患者创面肉芽组织中TGF-β1及EGF表达水平均升高，且观察组高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：富血小板血浆联合混合换药能够提高难治性皮肤溃疡临床治疗效果，改善美学外观，其可能同上调肉芽组织中TGF-β1及EGF的表达有关。

[关键词]富血小板血浆;难治性皮肤溃疡创面;创面修复;转化生长因子β1;表皮生长因子

[中图分类号]R622    [文献标志码]A    [文章编号]1008-6455（2021）05-0048-03

Effect of Platelet-rich Plasma on Wound Healing and Expression of TGF-β1 and EGF in Granulation Tissue of Refractory Skin Ulcer

YANG Li-ying1，LUO Peng2，CHEN Ling3

（1.Department of Burn and Plastic Surgery;2.Department of Radiology;3.Department of Gastroenterology，the First People's Hospital of Ziyang，Ziyang 641300，Sichuan，China）

Abstract： Objective  To investigate the clinical effect of platelet-rich plasma combined with dressing change on refractory skin ulcer and its effect on the expression of TGF-β1 and EGF in granulation tissue. Methods  68 patients with refractory skin ulcers were randomly divided into the control group and the observation group， 34 cases in each group. Two groups of patients were given mixed dressing treatment. The observation group was treated with platelet rich plasma gel treatment. After 12 weeks treatment， the clinical efficacy， wound healing time， esthetic satisfaction of wound healing of two groups were evaluated. The expression levels of TGF-β1 and EGF in granulation tissue were compared before PRP treatment and on the 7th and 14th day after PRP treatment. Results  The clinical effective rate of the observation group was 97.1%（33/34）， and that of the control group was 73.5%（25/34）， the difference was statistically significant（P<0.05）. The wound healing time of the observation group was （25.6±4.6）d， which was shorter than that of the control group[（32.7±5.1）d， P<0.05]. The satisfaction of the observation group was 91.2%（31/34）， which was higher than that of the control group[67.6%（23/34）， P<0.05]. There was no significant difference in the expression of TGF-β1 and EGF between the two groups before PRP treatment（P>0.05）. The expression levels of TGF-β1 and EGF in granulation tissue of two groups were increased on the 7th and 14th day after treatment， and the observation group was higher than that of the control group（P<0.05）. Conclusion  Platelet-rich plasma combined with dressing change can improve the clinical therapeutic effect and aesthetic appearance of refractory skin ulcer， which may be related to the up-regulation of the expression of TGF-β1 and EGF in granulation tissue.

Key words： platelet-rich plasma（PRP）; refractory skin ulcer wound; wound healing; TGF-β1; EGF

难治性皮肤溃疡在临床较为常见，多由于静脉病变、皮肤受压、创伤等原因引起，溃疡往往较深、组织活力差，临床治疗效果差，迁延不愈[1]。影响局部功能及外观，甚至导致患者的活动能力下降，降低患者生活质量。虽然临床上难治性皮肤溃疡的治疗方法较多，但临床治疗效果往往不满意，创面愈合缓慢，甚至不愈合[2-3]。富血小板血浆（Platelet-rich plasma，PRP）是血液分离物，含有丰富的血小板源性生长因子，能够诱导组织的生长[4-5]。近年来在组织修复过程中具有较好的效果，笔者医院在难治性皮肤溃疡创面治疗中采用PRP联合混合换药，取得了较好的效果，本文就其对创面愈合的效果、外观及其对肉芽组织中转化生长因子β1（Transforming growth factor，TGF-β1）及表皮生長因子（Epidermal growth factor，EGF）的调节作用进行研究。

1  资料和方法

1.1 临床资料：选择笔者医院2016年10月-2019年2月收治的难治性皮肤溃疡患者68例，入选标准：①皮肤溃疡创面且经1个月以上一般换药治疗未愈合;②患者能够配合规律治疗;③未应用抗凝或抗血小板药物;④患者及授权人对研究内容知情同意。排除标准：①合并严重心肺功能障碍或凝血功能障碍;②合并血液系统疾病或其他原因引起的血小板减少;③合并感染性疾病及传染性疾病;④感染创面。

患者入选后随机分为对照组及观察组，其中对照组患者34例，男15例，女19例;年龄51～78岁，平均（64.1±5.4）岁;其中合并糖尿病11例，合并脑血管疾病6例，合并大隐静脉曲张9例;病程1～5个月，平均（1.8±0.4）个月;溃疡面积12～27cm2，平均（17.9±3.2）cm2;溃疡类型：静脉性溃疡9例，糖尿病皮肤溃疡11例，压疮14例。观察组患者34例，男16例，女18例;年龄54～79岁，平均（64.7±5.3）岁;其中合并糖尿病13例，合并脑血管疾病7例，合并大隐静脉曲张8例;病程1～7个月，平均（1.9±0.5）个月，溃疡面积13～31cm2，平均（18.2±3.5）cm2;溃疡类型：静脉性溃疡8例，糖尿病皮肤溃疡13例，压疮13例。两组患者年龄、性别、病程、面积、溃疡类型及基础疾病经统计学分析差异无统计学意义，具有可比性（P>0.05）。患者或家属均对研究内容知情同意，研究经医院伦理委员会批准，符合医学伦理学要求。

1.2 PRP制备：PRP由医院输血科制备，采集空腹静脉血18ml，加入PRP制备液2ml，加入离心管混匀，1 500r/min离心5min，弃去下层沉淀，取上层溶液，既为富血小板血浆，6h内使用，每次使用量以涂抹创面均匀为宜。

1.3 治疗方法：两组患者均按创面换药原则进行换药治疗，包括伤口处理、控制疼痛、减少渗出和异味，保护伤口周围的皮肤，选用合适的敷料，创面保护、促进肉芽组织生长。首先采用干性换药，进行组织清创，聚维酮碘消毒周围皮肤，双氧水冲洗溃疡面后生理盐水冲洗，采用镊子和剪刀去除黑色痂皮和渗出的纤维素，避免强行撕扯造成出血和疼痛。清创后溃疡伤口采用油纱布覆盖，无菌纱布包扎，以利于保护创面和渗出液的吸收，依据患者的创面渗出情况调整换药频率。继续创面换药至创面进入红色期后，对照组采用湿性换药，水凝胶+泡沫敷料外包扎，创面清洁消毒后，水凝胶涂抹覆盖创面，超过创面2～3cm，然后泡沫敷料覆盖，保持创面湿润，依据渗出情况换药至创面愈合。观察组进入红色创面期后，进行湿性换药联合PRP治疗，创面消毒冲洗后，无菌纱布吸干水分，PRP涂抹覆盖，如合并腔隙或隧道，采用专用的枪头注入PRP，然后按对照组方法采用水凝胶+泡沫敷料外包扎，依据渗出情况换药，每次换药均给予PRP涂抹覆盖，换药至创面愈合。

1.4 标本采集及检测：PRP治疗前及治疗后第7天和第14天换药时采集肉芽组织标本，采集前刮去创面肉芽组织表面渗出物，生理盐水反复冲洗创面，避免PRP残留影响检测结果，采集少许肉芽组织，深低温保存，分批检测，标本解融后制备组织匀浆，采用酶联免疫吸附法检测TGF-β1及EGF浓度，设立空白组、对照组、标准组及样品组，按试剂说明书加入抗体及亲和素，显色，采用酶标仪450nm波长检测吸光度，依据标准曲线计算TGF-β1及EGF表达浓度，检测过程严格按照试剂及仪器使用说明书进行。

1.5 评价标准

1.5.1 临床疗效：治疗12周后评价两组患者临床疗效。临床有效率依据相关文献评价[6-7]。痊愈：创面消失，表皮愈合;显效：创面减少超过50%，创面变浅，创面肉芽红润，无感染;有效：创面减小面积不足50%，创面变浅，无感染;无效：创面面积无减少，创面深度无变浅，或合并创面感染。

1.5.2 创面愈合时间：记录两组患者创面愈合时间。

1.5.3 患者创面愈合美容满意度：满意度评价采用自制评分量表评价，量表包括10个条目，包括愈合创面皮肤颜色、色素沉着情况、脱屑、感觉过敏、感觉缺失、疼痛、瘢痕形成、水疱、组织缺损、组织增生。总分100分，>90分为满意，80～90分为基本满意，<80分为不满意。满意率=（满意+基本满意）例数/总例数×100%。

1.6 统计学分析：数据分析采用SPSS 13.0统计学软件，计量资料采用t检验，计数资料采用卡方检验，P<0.05认为差异具有统计学意义。

2  结果

2.1 两组临床疗效比较：观察组临床有效率为97.1%，对照组为73.5%，组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。

2.2 两组创面愈合时间比较：本次两组患者换药治疗创面均愈合，愈合时间2～19周。观察组创面愈合时间为（25.6±4.6）d，对照组为（32.7±5.1）d，观察组创面愈合时间短于对照组，差异有统计学意义（t=4.074，P=0.002）。

2.3 两组创面愈合美容满意度比较：观察组创面愈合美容满意率为91.2%，对照组为67.6%，差异有统计学意义（P<0.05）。

2.4 两组肉芽组织中TGF-β1和EGF表达情况比较：两组患者PRP治疗前肉芽组织中TGF-β1和EGF表达水平比较差异无统计学意义（P>0.05）;治疗第7天及第14天两组患者肉芽组织中TGF-β1和EGF表达水平均升高，且观察组高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。

3  讨论

难治性皮肤溃疡多在皮肤营养障碍、循环障碍或长期受压以及假体置入等基础上发生。创面的基底组织营养及循环均较差，甚至合并感染，愈合能力极差，往往经过反复治疗创面无明显生长，甚至加深、加重，为临床治疗带来困难。难治性皮肤溃疡的临床治疗仍以换药治疗为主，巨大的创面可采用转移皮瓣等治疗，换药治疗的方法较多，如混合换药法、负压引流换药、中西医结合换药治疗等[8-10]。目前临床报道较多，但治疗效果多不满意，需要长期治疗，可给患者带来较大压力，影响患者的生活质量。

近年来在组织修复过程中，PRP在临床开始应用，如关节、肌腱、组织缺损修复中，PRP能够促进组织的增生修复和愈合[11-13]。PRP是血液分流的富含血小板的血浆与凝血酶的复合物，其中含有丰富的血小板，一般含量超过正常血浆的3倍以上，含有丰富的内源性生长因子，如血小板源性生长因子、类胰岛素生长因子、转化生长因子、血管内皮生长因子等，能够诱导细胞增殖，促进组织修复[14]。本次在难治性创面治疗过程中，采用混合换药联合PRP治疗，在皮肤溃疡进入红色创面期肉芽组织开始增生后，观察组在创面上应用PRP促进创面生长，同时采用湿性换药保持创面湿润[15]。在对两组患者创面的愈合情况观察发现，观察组的临床有效率高于对照组，且创面愈合时间明显缩短，创面的外观修复效果也明显优于对照组，美容满意度明显提高。进一步研究中发现，两组患者治疗后肉芽组织中TGF-β1和EGF表达水平均增高，且观察组升高更为明显，说明在皮肤溃疡创面愈合过程中，TGF-β1和EGF参与创面的修复过程，而PRP能够诱导肉芽组织中TGF-β1和EGF的表达。TGF-β1能够促进细胞的增殖、分化，同时能够抑制细胞外基质的降解，为细胞的增殖提供条件[16]，进而促进组织的修复。EGF能促进上皮细胞、成纤维细胞的增殖，促进表皮生长，PRP能够通过诱导肉芽组织中TGF-β1和EGF的表达促进创面的修复[17]。

在研究中发现，难治性溃疡创面治疗过程中，早期可采用清创、溶痂等方法去除坏死组织，对失活的创面或肉芽组织进行刮除，保证创面的新鲜度，而在进入红色创面期后，无论是否采用PRP换药，都要注意对创面的保湿，保持局部湿润环境，有利于创面的生长，同时也要注意适当延长换药间隔，避免对创面肉芽组织的反复干扰，而影响创面愈合。应用PRP时，要注意新鲜度，最好现用现制，存储时间6h内最好，以免延长时间降低使用效果或者增加感染风险，而且进入湿性创面期后，对患者的换药也不宜过于频繁，每周1～2次为宜，减少对创面肉芽的干扰，促进肉芽组织的生长，但是仍需注意创面包扎敷料的渗出情况及邻近部位皮肤色泽等，及时发现创面感染等并发症。

综上所述，PRP能够诱导难治性皮肤溃疡创面肉芽组织中TGF-β1和EGF的表达，促进肉芽组织的生长，加速创面修复，提高创面修复美容效果，具有较好的临床疗效。

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[收稿日期]2019-08-15

本文引用格式：杨丽英，罗鹏，陈玲.富血小板血浆对难治性皮肤溃疡创面愈合及肉芽组织中TGF-β1及EGF表达的影响[J].中国美容医学，2021，30（5）：48-51.