尿酸和血清蛋白电泳比例成分在湿热蕴结型痛风诊断中的应用

王 健，吴嘉怡，赵 威

（广州医科大学附属中医医院检验科1，肾病科2，广东 广州 510130）

痛风（gout）是嘌呤代谢紊乱和（或）尿酸（uric acid，UA）排泄障碍致使血尿酸增高而引发的一组异质性晶体相关性关节病。血液中尿酸长期维持在超饱和浓度以上时，尿酸盐与Alb 及α1球蛋白、α2球蛋白的结合减少，过饱和的尿酸盐析出形成痛风石，沉积到身体各个部位尤其是四肢关节中，引发急性炎性反应，严重者影响肢体外形，甚至关节畸形、功能障碍。痛风在梁代陶弘景《名医别录》中描述为“历节”“白虎”，在中医学属“痹证”范畴，主要证型为湿热蕴结型[1]。目前，超声、CT、X 线、显微镜等检查已应用于痛风患者的检查诊断，但由于技术限制，临床仍然以检测血尿酸，结合患者临床表现来诊断痛风。然而，高尿酸血症（hyperuricemia，HUA）患者因无症状表现，况且仅一小部分发展为临床痛风，容易被忽视。尽管痛风有治愈的可能，但其治疗仍不理想[2]。寻找简便的检测方法，实现痛风的早诊断早干预是目前的一个研究热点。通过血清蛋白电泳（serum protein electrophoresis，SPE）可以把血清蛋白（serum protein，SP）分为Alb、α1球蛋白、α2球蛋白、β 球蛋白及γ 球蛋白，从而测定各种血清蛋白成分占总蛋白的百分比。这些血清蛋白成分在炎症、肿瘤、肝硬化等疾病的中呈现出不同的变化。本研究旨在探讨上述血清蛋白成分在湿热蕴结型痛风的变化，以期为湿热蕴结型痛风的辅助诊断提供实验依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019 年1 月～2020 年5 月在广州医科大学附属中医医院就诊的湿热蕴结型痛风患者60 例作为观察组，另外选取同期来院辨证为湿热体质型高尿酸血症无痛风症状患者40 例作为对照组。纳入标准：①《中国高尿酸血症与痛风诊疗指南(2019)》[3]的诊断标准；②年龄≥18 岁。排除标准：①妊娠或哺乳期妇女；②合并心、脑血管、肝、肾、血液病、肿瘤及精神病；③入院前3 个月未使用某些药物如噻嗪类利尿药、呋塞米、水杨酸盐、吡嗪酰胺等影响血尿酸代谢药物。观察组中男49 例，女11 例，年龄20～77 岁，平均年龄（46.02±16.01）岁，病程0.3～10年，平均病程（8.03±2.12）年。对照组中男32 例，女8例，年龄22～87 岁，平均年龄（41.45±15.01）岁，病程0.5～9 年，平均病程（7.89±1.97）年。两组性别、年龄及病程比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 诊断标准 痛风中医分型依据《中医病证诊断疗效标准》[4]症候分类的湿热蕴结：下肢小关节卒然红肿热痛、拒按，触之局部灼热，得凉则舒。伴发热口渴，心烦不安，溲黄。舌红，苔黄腻，脉滑数。高尿酸血症中医分型依据《中医学》[5]制定的中医证型诊断标准，湿热体质：食少、呕恶，身重困倦，口干粘腻，心胸烦闷、脘腹痞满，小便短赤，大便黏腻不爽，外阴湿痒，舌红，苔黄腻。

1.3 方法 两组研究对象前空腹12 h 后采集静脉采血3 ml 于清洁促凝试管中，3000 r/min 离心10 min后吸取1 ml，血清UA 采用尿酸酶法在西门子ADVIA 2400 全自动分析仪上进行检测，血清蛋白检测采用琼脂糖凝胶电泳法在法国Sebia 全自动毛细管电泳仪上进行检测，均采用其配套试剂。比较两组血清UA 水平及SP 电泳成分Alb、α1球蛋白、α2球蛋白、β 球蛋白、γ 球蛋白比例，分析其对湿热蕴结型痛风的诊断价值。

1.4 统计学方法 数据采用SPSS 20.0 软件统计分析，计量资料以（）表示，比较均值采用独立样本t检验；计数资料以[n（%）]表示，比较用χ2检验。绘制受试者工作特征（ROC）曲线评估诊断价值，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血UA、SP 成分比较 观察组UA 水平、α2球蛋白、β 球蛋白比例高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；两组Alb、α1球蛋白、γ 球蛋白比例比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 两组血UA、SP 成分比较（）

表1 两组血UA、SP 成分比较（）

2.2 α2球蛋白、β 球蛋白的诊断价值 ROC 曲线显示，α2球蛋白、β 球蛋白诊断痛风湿热蕴结证的AUC 高于0.70，说明α2球蛋白≥13.09%、β 球蛋白≥11.05%在诊断痛风湿热蕴结证有一定的价值，见表2。

表2 UA、α2 与β 球蛋白在痛风湿热蕴结证的诊断价值

2.3 痛风湿热蕴结证诊断指标α2球蛋白、β 球蛋白的Logistic 回归分析 把观察组设置为1，把对照组设置为0 作为因变量，把α2球蛋白≥13.09%设置为1、反之设置为0，β 球蛋白≥11.05%设置为1、反之设置为0 作为协变量，进行向前逐步法Logistic 回归分析，结果显示，α2球蛋白、β 球蛋白升高是湿热蕴结型痛风发生的风险因素，见表3。

表3 α2、β 球蛋白的Logistic 回归分析

3 讨论

痛风属代谢性或者免疫性风湿病范畴。我国痛风患病率为1%～3%，患者可出现关节破坏、肾功能损害，常伴发糖脂代谢紊乱、高血压、动脉硬化及冠心病等[6]。痛风常伴有高尿酸血症，然而多数高尿酸血症患者却并没有痛风的症状，单纯检验尿酸辅助痛风的诊断已不能适应临床。研究发现，高频超声[7]、双能CT 成像技术[8]可以辅助诊断痛风，部分尿酸正常的痛风患者亦可检出，但是有的尿酸盐结晶细小或隐匿在关节腔内不易发现。此外，痛风石的确诊需要关节抽吸滑液的偏光显微镜检查，限制了镜检在诊断痛风的应用[9]。中医认为痛风系饮食劳倦、外感风寒湿热之邪，湿浊痰瘀相阻、气血不畅所致[10]。痛风湿热蕴结证临床表现为下肢小关节卒然红肿热痛、拒按，触之局部灼热，得凉则舒。伴发热口渴，心烦不安，溲黄。舌红，苔黄腻，脉滑数。痛风湿热蕴结证的症候分型与炎症与免疫相关[11]，血清蛋白各成分比例在炎症、免疫反应中会发生改变[12]，因此反映炎症免疫的血清蛋白成分指标在痛风湿热蕴结证中的变化值得探讨。

通过研究血清蛋白质总量以及各种蛋白质之间的关系可对疾病的发生进行判断[13]。本研究发现，痛风湿热蕴结证患者UA、α2、β 球蛋白比例高于对照组。痛风湿热蕴结证患者中，UA 是诱导的炎症发生的致病因素。α2蛋白带主要由铜蓝蛋白、α2巨球蛋白、结合珠蛋白和急性相反应物构成。α2球蛋白比例升高的原因为患者固有免疫被激活，释放白细胞介素（IL）-1β，IL-6 及肿瘤坏死因子（TNF）-α 等多种，炎症介质进而引起关节红肿热痛等急性发作表现[14]。β 球蛋白主要由转铁蛋白组成，含有β-脂蛋白，与LDL-C、ApoB 等脂类高度相关,同时含有一部分凝血因子、IgA、IgM 以及补体蛋白，C 反应蛋白（CRP）位于β 和γ 成分之间。β 球蛋白比例升高的原因是患者嗜食膏粱厚味，过量油脂（尤其饱和脂肪酸类油脂）的摄入，可造成LDL-C、ApoB 等脂类蓄积，出现代谢综合征[15]。

本研究结果显示，UA 因曲线下面积小于0.7，用于痛风湿热蕴结证的诊断价值不大。EULAR 痛风诊断循证专家建议[16]，通过采用德尔菲共识的研究方法，突出了关节影像学检查的必要性及重要性，包括X 线、超声和双源CT，强调了影像学的发展在诊断痛风中的应用，但检查的灵敏度和特异度与检查者技术密切相关。有研究认为[17-19]，尿酸钠结晶活化炎性细胞，使IL-1β、IL-6 和TNF-α 等促炎细胞因子产生增加，脂代谢物质增加核转录因子-κB（NFκB）、NOD 样受体蛋白3（NALP3）基因表达，进一步使炎性反应级联放大。α2球蛋白区间内的结合珠蛋白反应性升高，参与抗炎症及组织损伤修复功能。β球蛋白区间内的补体、IgM、IgA 升高，作为机体抗感染免疫的重要参与因子，参与炎症免疫反应。本次研究结果显示，α2球蛋白、β 球蛋白对湿热蕴结型痛风的诊断价值较高，曲线下面积分别为0.709、0.726，α2球蛋白≥13.09%、β 球蛋白≥11.05%是湿热蕴结型痛风发生的风险因素。提示当呈现α2、β 球蛋白区带波峰双高峰时，即急性相反应物所在的α2球蛋白与炎性因子所在的β 球蛋白升高，痛风湿热蕴结证发生的可能性增大。

本研究是对单个机构的病例进行分析，纳入的观察对象标本数相对有限，以后应该扩大样本量进行分析，可排除可能混杂因素的影响。另外纳入痛风的中医证候分型相对较少，一定程度上限制了血清蛋白成分在临床痛风诊断中的适用范围，往后进一步纳入痛风的其他症候分型，以证实该结论。

综上所述，α2、β 球蛋白比例对于痛风湿热蕴结证的辅助诊断有一定的价值，具有简便、廉价、广谱等优点，当出现α2、β 球蛋白双高峰时，应留意痛风湿热蕴结证的发生。