甲基百里香酚蓝分光光度法测定大豆中微量锌的研究与应用

金文斌，赵鑫，刘瑞华

(南通职业大学化学与生物工程学院,江苏南通 226007)

目前，测定锌（Ⅱ）方法主要有原子吸收光谱法和分光光度法等，分光光度法操作简便、灵敏度高，有较高的实用价值，在微量锌（Ⅱ）含量的测定中仍有很多应用。甲基百里香酚蓝作显色剂测定铅，但甲基百里香酚蓝分光光度法测定锌未见报道。实验研究了在邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲溶液中，TritonX-100存在下，锌（Ⅱ）与甲基百里香酚蓝显色反应的适宜条件，建立了测定微量锌（Ⅱ）的显色光度法，用于大豆中微量锌（Ⅱ）的测定，方法简单、快速、灵敏，结果满意。

1 试验部分

1.1 仪器和试剂

UV—1800PC型紫外可见分光光度计（上海美谱达仪器有限公司）pH计PB-10（北京赛多利斯科学仪器有限公司）。

锌（Ⅱ）标准储备溶液:1.000 g/L，称取1.000 g锌粉（纯度99.99%）于烧杯中，加入30 mL盐酸（1+1），溶解完全后，移入1000mL容量瓶中，以水稀至刻度，摇匀；锌（Ⅱ）标准工作溶液：10.00μg/mL，吸取10.00 mL锌（Ⅱ）标准储备溶液，用水稀释定容至1000mL；甲基百里香酚蓝乙醇溶液：0.05%，静置10 min；曲拉通-100（TritonX-100）：1%；邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲溶液：pH 6；硫脲溶液：10 g/L。

试剂为分析纯，用水为去离子水。

1.2 实验方法

在25mL容量瓶中，加入一定量的锌（Ⅱ）标准工作溶液，依次加入2 mL pH为6邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲溶液，3 mL 0.05%甲基百里香酚蓝乙醇溶液，1.5 mL 1%曲拉通-100溶液，加水稀释至刻度线，摇匀，常温放置5 min。在波长520nm处，用1 cm的比色皿，以试剂空白为参比，测定吸光度。

2 结果与讨论

2.1 测定波长

按照实验方法，在不同波长下测定试剂空白和配合物的吸收光谱，由图1可见：试剂空白的最大吸收波长440nm，锌（Ⅱ）与甲基百里香酚蓝的配合物最大吸收波长520nm，对比度为80nm，配合物与显色剂之间的颜色差异大。实验选择520 nm为测定波长。

图1 吸收光谱

2.2 缓冲介质的影响

实验了醋酸-醋酸钠和邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠等缓冲介质对锌（Ⅱ）测定的影响，结果表明，当pH为6的邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲溶液用量在2mL时，配合物的吸光度大，实验选取2mL pH值为6的邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲溶液(见表1)。

表1 pH值的选择

2.3 甲基百里香酚蓝溶液用量

按照实验方法，考察了显色剂甲基百里香酚蓝乙醇溶液用量对测定的影响，结果表明，0.05%显色剂用量在3 mL时，显色体系吸光度大，实验选取3 mL 0.05%甲基百里香酚蓝乙醇溶液（见表2）。

表2 甲基百里香酚蓝用量的选择

2.4 增敏剂的选择

考察了1%非离子表面活性剂聚氧乙烯特辛基酚醚（TritonX-100）、1%阳离子表面活性剂溴化十六烷基吡啶（CPB）对体系灵敏度的影响。结果表明，1%的TritonX-100增敏性好，其用量在1.5 mL时测得体系的吸光度最高，实验选取1.5mL 1%的TritonX-100溶液（见表3）。

表3 TritonX-100用量的选择

2.5 反应时间

实验表明，室温下锌（Ⅱ）与甲基百里香酚蓝显色生成朱砂红色配合物，溶液静置3～5 min后体系吸光度达最大值，显色体系至少可稳定120min，实验选择室温下5 min后测定。

2.6 干扰实验

实验表明,在25 mL容量瓶中，测定0.5 mg/L锌(Ⅱ)标准溶液，相对误差不超过±5%时，共存离子的允许量（以被测锌(Ⅱ)倍数计）为，Na+、K+、Ca2+、Mg2+、、、(2000)；硫脲、柠檬酸根、酒石酸根(1000)；Al3+、Fe3+、Ni2+(40)；Pb2+、Cd2+（5）；Cu2+(2)。加入1mL10 g/L的硫脲溶液，Pb2+、Cd2+、Cu2+允许量可增加到5倍以上。

2.7 校准曲线与检出限

依照实验方法测定锌标准溶液系列，结果表明：锌(Ⅱ)的质量浓度在0～1.6 mg/L范围内符合比耳定律，线性回归方程A=0.573ρ（mg·L-1）+0.007，相关系数为0.9994，表观物质的量吸光系数4.9×104L·moL-1·cm-1。

2.8 样品分析

称取1.00 g碾碎的大豆样品于烧杯中，加浓硝酸5.0 mL，消化溶解后，稍冷加高氯酸1.0 mL，加热至溶液近无色，用水稀释后用0.1 moL/L氢氧化钠溶液调至中性，定溶于25 mL容量瓶中，移取试样溶液5.00 mL，按实验方法进行测定。平行测定6次，计算测定值的相对标准偏差（RSD），同时采用原子吸收光谱法（AAS）进行测定，结果见表4。

表4 样品中锌（Ⅱ）的测定结果（n=6）

3 结论

从样品锌的测定结果可知：加标回收实验满意，本法与AAS测定值接近，甲基百里香酚蓝分光光度法测定大豆中锌（Ⅱ）含量的方法准确度高，可用于大豆中微量锌的测定。