翼状螺旋转录因子3及白细胞介素-10联合临床特征预测男性肛管内尖锐湿疣复发的价值

段宝学, 吴要群

(湖北省襄阳市第一人民医院 皮肤科, 湖北 襄阳, 441000)

尖锐湿疣是一种人乳头瘤病毒(HPV)感染引发的皮肤黏膜增生性疾病，大多通过性接触传播，多发于生殖器及肛周部位，严重影响患者的生活质量[1]。研究[2]显示，尖锐湿疣的复发率高达30%～70%, 因此如何预防尖锐湿疣并减少复发是临床医学较为关注的课题。目前，研究[3]认为，尖锐湿疣的发生及复发与局部细胞免疫功能低下有关，其中调节性T细胞(Treg)作为一类具有免疫负性调节作用的CD4+T细胞亚群，可能在尖锐湿疣的复发中发挥了重要的作用。翼状螺旋转录因子3(Foxp3)是Treg中的特异性转录因子，可直接反映Treg细胞功能状态，Treg则可以通过抑制白细胞介素-10(IL-10)而发挥感染耐受和免疫抑制的双重功能[4]。本研究探讨Foxp3、IL-10与尖锐湿疣复发的关系，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析本院2016年10月—2019年10月收治的160例男性肛管内尖锐湿疣患者的临床资料，按照3个月内复发情况分为复发组98例(肉眼可见疣体在初次治疗消除后3个月内在原部位复现)和未复发组62例(肉眼可见疣体在初次治疗消除后3个月内未复现)。所有患者出院前均进行物理治疗或免疫治疗，疣体消除范围及深度均较为满意，调查期间均进行严格的消毒隔离。

纳入标准: ① 复发组患者均符合《尖锐湿疣诊疗指南(2014)》[5]肛管内尖锐湿疣诊断标准，未复发组经检查未发现明显异常; ② 年龄18～65岁; ③ 复发组患者醋酸白实验结果显示为阳性[6]; ④ 患者临床病理资料完整。排除标准: ① 心、肝、肾功能检查存在明显异常者; ② 随访期间仍有性生活者; ③ 非肛管内尖锐湿疣患者或因同性性行为致病者; ④ 存在认知功能障碍或其他精神性疾病者; ⑤ 女性尖锐湿疣患者或合并梅毒、艾滋病等性行为相关疾病者; ⑥ 不愿意接受实验室检查或不能按时复诊者。

1.2 研究方法

收集2组患者年龄、病程、治疗方案、熬夜史、嗜酒史、吸烟史、人类乳头瘤病毒-脱氧核糖核酸(HPV-DNA)分型、合并症、皮损数量、疣体直径、安全套使用情况、药物中断情况、Foxp3水平、IL-10水平等临床资料。HPV-DNA分型依据手术时获取的疣体表面上皮细胞组织的实时荧光定量聚合酶链反应定位法检测结果进行判断，本研究共检测出21种亚型，低危型包括HPV-6、11、42、43、44、81等亚型，高危型包括HPV-16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68等亚型。抽取患者术后空腹静脉血检测Foxp3、IL-10水平，离心后采用聚合酶链反应(PCR)定位法检测Foxp3水平，仪器为美国Bio-Rad公司生产的实时荧光定量PCR仪，酶联免疫吸附法检测IL-10水平，仪器为日立7060型全自动生化分析仪及配套试剂盒。安排患者每隔2周来院进行复检，3个月内复现肉眼可见疣体的患者进行病理组织染色检查，将呈现阳性结果的患者定义为复发。

1.3 观察指标

① 比较2组患者年龄、病程、治疗方案、熬夜史、嗜酒史、吸烟史、HPV-DNA分型、合并症、皮损数量、疣体直径、安全套使用情况、药物中断情况、Foxp3水平、IL-10水平等临床指标。② 利用受试者工作特征(ROC)曲线分析Foxp3、IL-10水平预测尖锐湿疣复发的价值。③ 将2组有统计学差异的指标纳入Logistic回归分析模型，进行量化赋值，明确尖锐湿疣复发的危险因素。

1.4 统计学方法

2 结 果

2.1 尖锐湿疣患者复发的影响因素分析

2组年龄、病程、吸烟比率、皮损数量比较，差异无统计学意义(P>0.05); 复发组单纯手术切除、熬夜、嗜酒、HPV-DNA分型为高危及混合、合并其他性病、疣体直径≥0.5 cm、药物中断患者比率以及Foxp3、IL-10水平高于未复发组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 尖锐湿疣患者复发的影响因素分析

2.2 Foxp3、IL-10预测尖锐湿疣复发的ROC曲线分析

ROC曲线分析发现, Foxp3、IL-10预测尖锐湿疣复发的曲线下面积分别为0.881、0.910, 见表2、图1。

A: Foxp3的预测价值; B: IL-10的预测价值。图1 Foxp3、IL-10水平预测尖锐湿疣复发的ROC曲线

表2 Foxp3、IL-10水平预测尖锐湿疣复发的ROC曲线分析

2.3 尖锐湿疣患者复发的多因素Logistic回归分析

将有统计学差异的变量纳入Logistic回归分析模型，并进行量化赋值，见表3。Logistic回归分析显示, Foxp3≥0.195%、IL-10≥394.210 ng/L、单纯手术切除、熬夜、嗜酒、HPV-DNA分型为高危及混合、合并其他性病、疣体直径≥0.5 cm、药物中断是尖锐湿疣患者复发的危险因素(P<0.05), 见表4。

表3 量化赋值表

表4 尖锐湿疣患者复发的多因素Logistic回归分析

3 讨 论

研究[7]报道，全球每年感染尖锐湿疣病例超过3 000万，而近10年来中国尖锐湿疣的发病率逐年增长，约为12.94%, 位居性传播疾病的第2位。HPV是引发尖锐湿疣的感染病毒，是一种7 900 bp的环状、双链、嗜上皮性的DNA病毒，对宿主有高度种属特异性，目前发现的亚型有200余种[8]。目前，国内治疗尖锐湿疣的方法包括局部药物治疗(5%酞丁胺、5%咪喹莫特等)、物理治疗(CO2激光、冷冻等)、免疫治疗(皮损内注射干扰素)，但均存在较易复发的情况，因此需要深入研究尖锐湿疣复发的高危因素[9]。

本研究结果显示，复发组单纯手术切除、熬夜、嗜酒、HPV-DNA分型为高危及混合、合并其他性病、疣体直径≥0.5 cm、药物中断患者比率及Foxp3、IL-10水平高于未复发组，差异有统计学意义(P<0.05), 提示治疗方式、熬夜、嗜酒、HPV-DNA分型、合并症、疣体直径、药物中断及Foxp3、IL-10水平均可能成为影响尖锐湿疣复发的危险因素。对肛周湿疣进行普通外科治疗干预时，临床通常只会对肉眼可见的疣体组织进行清除，但对于亚临床感染病灶却难以根治，且既往研究[10]表明湿疣皮损周围1 cm以内皮肤均存在HPV感染风险，即使经过外科干预，亚临床型也会生出新的疣体而导致复发。应用免疫抑制剂、抗病毒药物、中药等可以增强患者术后免疫力，提高机体对HPV的抵抗能力，从而降低复发风险。刘波等[11]研究表明，熬夜和嗜酒会影响机体免疫力，降低机体对病毒的抵抗能力，增高尖锐湿疣复发风险。

不同类型的HPV在不同部位可能产生不同的损害，根据诱发生殖系统肿瘤的概率通常分为高危型和低危型。本研究显示，复发组多为高危及混合型，可能是因为高危的变异亚型会破坏宿主免疫系统，导致病毒持续存在，不仅能引起湿疣反复发作，还可能促使良性病变组织转化为恶性。高危和低危合并感染的混合型病毒载量更高，致病能力更强，能更快速地引起病变发展[12]。合并其他性病时，患者往往因为已行湿疣切除术而造成误诊，治疗时机被延误，而其他性病感染的分泌物溢出并污染原皮损部位，给HPV的滋生创造了有利条件，增高了复发的风险。疣体较大时，其引起的HPV亚临床感染越不容易被消除，因而术后生出新疣体的风险增高，这与蔡光辉等[13]关于疣体大小影响尖锐湿疣复发的相关描述一致。常用药物治疗方案包括间歇性治疗和长期抑制性治疗，通常长期抑制性治疗可减少发作次数、加速皮损愈合、抑制HPV排毒，从而减少尖锐湿疣的复发。

Treg是细胞免疫的主要效应细胞，对于抑制细胞介导免疫、发挥免疫监视、免疫稳定及免疫防御功能具有重要的作用。当机体受到病毒感染时, Treg会因为抑制过度免疫反应造成组织损伤，同时在抑制某些病原体感染宿主时发挥保护性免疫反应，不利于宿主清除病原体[14]。因此, HPV感染时诱导机体细胞免疫和体液免疫，导致系统及局部细胞介导的免疫反应减弱。Foxp3作为Treg最特异的分子标记，其表达增多可能增强局部微环境的免疫抑制和耐受状态，使局部抗病毒免疫应答受到抑制，引起局部细胞免疫功能缺陷，从而造成HPV持续性感染[15]。IL-10作为Treg分泌的具有广泛免疫效应的细胞因子，能抑制单核细胞、巨噬细胞等释放促炎因子。研究[16-17]表明，患者感染尖锐湿疣后，其外周血IL-10水平会显著增高，激活了免疫反应的负向调节，使得机体对HPV的特异性细胞免疫反应受到抑制，增高了患者感染及复发的风险。

综上所述, Foxp3≥0.195%、IL-10≥394.210 ng/L、单纯手术切除、熬夜、嗜酒、HPV-DNA分型为高危及混合、合并其他性病、疣体直径≥0.5 cm、药物中断是尖锐湿疣患者复发的危险因素，需引起临床医师的早期关注，并尽早实施对症干预。