标本溶血对干式免疫荧光法检测CRP的影响

李 进 祁从辉 郭美玲

（建湖县第三人民医院检验科，江苏 盐城224700）

C反应蛋白（creation protein，CRP）是机体一种重要的急性期蛋白，在健康人血液中含量极微，当机体细菌感染和组织损伤时，CRP的浓度显著增高，因而是体内各种炎症和组织损伤的敏感性指标，对鉴别病毒与细菌感染有重要价值[1-3]。临床选用干式免疫荧光定量法检测超敏C反应蛋白的原因是其具有快速、简便、结果可靠、敏感性高的特点，可广泛适用于门急诊的需求[4]。在日常检验工作中，常会遇到一些检验结果与临床表现不符的现象，影响病人的救治，甚至会引起特别严重的后果[5-6]，究其原因发现标本的溶血就是其中原因之一，约占分析前误差的60%[7]。溶血对CRP的检测造成怎样的影响，本文将对此进行实验探讨。而CRP存在于血浆中[8]，故本试验将观察干式免疫荧光法检测不同程度溶血标本对血浆CRP的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院2019年9月至11月份门诊和住院的60名诊断为急性炎症患者标本，其中男性35例，女性25例。选取的标本应将脂血、黄疸、溶血等样品排除，所有检测均按实验标准操作规程完成，并尽量减少外界因素的干扰，且每人采集4管血液于EDTA-K2的抗凝真空管中[9]。

1.2 溶血程度分级 以血浆中血红蛋白的含量来分级，轻度溶血（Hb1.0～10.0g/L）、中度溶血（Hb 10.1～20g/L），重度溶血（Hb 20.1～30g/L）。

1.3 仪器与试剂 使用的检测仪器包括基蛋生物Geteln1100免疫荧光定量分析仪、湘仪低速离心机TDZ5-WS、迈瑞全自动血液分析仪BC-5180。所用试剂及反应物件均为各自厂家配套产品。

1.4 检测方法 测定上述选取的60位患者血标本中CRP所得的数据设为对照组；用带针头的注射器抽打1～3次的标本至轻度溶血后所测得的数据设为轻度溶血组；用带针头的注射器抽打5～7次的标本至中度溶血后所测得的数据设为中度溶血组；用带针头的注射器抽打10次以上的标本至重度溶血后所测得的数据设为重度溶血组。第1管用于正常检测CRP的含量并记录所有数据。第2管用带针头的注射器抽打1～3次后，用湘仪TDZ5-WS离心（3000r/5min），再用BC-5180全自动血细胞分析仪检测血浆中血红蛋白的含量，使其在轻度溶血的范围内，然后用Geteln1100免疫荧光定量分析仪检测CRP含量并记录所有数据；第3管用带针头的注射器抽打5～7次后，用湘仪TDZ5-WS离心（3000r/5min），再用BC-5180全自动血细胞分析仪检测血浆中血红蛋白的含量，使其在中度溶血的范围内，然后用Geteln1100免疫荧光定量分析仪检测CRP含量并记录所有数据；第4管用带针头的注射器抽打10次以上，用湘仪TDZ5-WS离心（3000r/5min），再用BC-5180全自动血细胞分析仪检测血浆中血红蛋白的含量，使其在重度溶血的范围内，然后用Geteln1100免疫荧光定量分析仪检测CRP含量并记录所有数据，最后进行比较相关数据。所有实验均按照我院检验科SOP文件和厂家的说明书操作。

1.5 观察指标 本次研究中的观察指标为轻、中、重度溶血标本对应的CRP检验结果与其未溶血前的CRP结果的差异。

1.6 统计学方法 采用临床医师统计学助手10.1软件对数据进行处理，实验数据以均数±标准差（±s）来表示，组间比较采用t检验。

2 结果

轻度溶血组和对照组的检查结果比较，无显著性差异，（P＞0.05）；中度溶血标本和对照组比较，差异显著，（P＜0.05），有统计学意义。重度溶血标本和对照组比较，差异显著，P＜0.01，有统计学意义。见表1

表1 溶血对CRP检测的影响

3 讨论

本实验将轻、中、重度溶血分别和溶血前标本中的CRP含量进行比较，以研究不同程度的溶血标本对检查结果的影响。轻度溶血与溶血前血浆中含有的CRP比较，无显著差异；中、重度溶血与溶血前血浆中含有的CRP比较，有显著差异，有统计学意义；本研究结果显示轻度溶血的标本对CRP的测定无明显影响，但中、重度溶血对其结果会产生影响。

在试剂厂家说明书和网络学术资料中无法获悉严重溶血的标本影响干式免疫荧光测定CRP的原因，而溶血因素干扰免疫荧光法测定各类项目常见的原因主要有以下三种（1）严重溶血的血标本，其红细胞膜被破裂，使其释放出血红蛋白来[10]，造成反应混合物颜色背景变暗，阻碍了仪器比色的光路传导和透射，使仪器光路接收器对检测光线接收的识别力和敏感性下降，从而使仪器接收到的信号减弱，导致结果偏低；（2）标本溶血时破坏了红细胞，细胞中的内液被释放到血液中，使血浆量增多，稀释了被检物质，当用仪器检测后，结果低于未溶血时的结果；（3）严重溶血的血标本，可能释放出可以与抗体发生交叉反应的抗原或其他干扰物质，使测试带上的复合物积聚增多（或减少），从而影响检验结果的准确性。本试验中重度溶血引起CRP结果减低可能涉及前两种原因较多，尤其是第二种原因，因此，溶血的标本会稀释和干扰被检物质，无论全血还是血浆或血清检测CRP时均应避开标本溶血。如果遇到中、重度溶血标本必须重新采集血液标本检测，以确保检测结果的准确性[11-12]。

干式免疫荧光法检测中、重度溶血标本中CRP有显著影响，致使检验结果偏低，可能会耽误临床医生的诊断，甚至造成严重后果。溶血标本对不同的检查项目影响不同，而且对检查结果的影响和溶血的轻重程度还有关，因此血标本检测时检查是否溶血很有必要。在日常工作中，需加强对血液标本采集、保存、转运、检验等各个环节都要规范性操作，并加强培训和管理，减少检验误差和偏倚，更好地服务于临床，为患者后续治疗提供可靠的参考依据[13-15]。