市售消炎镇痛膏皮肤刺激性和过敏性试验评价

郑洋滨，刘宁，艾力奇，刘波，洪燕，任琦

1.江西省药品检验检测研究院，国家药品监督管理局中成药质量评价重点实验室，江西省药品与医疗器械质量工程技术研究中心，江西 南昌 330029；2.南昌大学第一附属医院，江西 南昌 330029

消炎镇痛膏是一种含有薄荷脑、冰片、樟脑、薄荷脑、颠茄流浸膏、麝香草脑、盐酸苯海拉明等药物的中药贴膏剂［1］。主要用于神经痛，风湿痛，肩痛，扭伤，关节痛，肌肉疼痛等。辅料为橡胶、氧化锌、松香、凡士林、溶剂油等。由于橡胶膏剂透气性较差、载药量小，易引发皮肤过敏和刺激反应［2］。《中国药典》并未对中药贴膏剂进行安全性监控，为了考察其安全性，故参照国家食品药品监督管理总局颁发的《中药、天然药物局部刺激和溶血性研究的技术指导原则》《中药天然药物免疫毒性（过敏性、光过敏反应）研究技术指导原则》，对国抽品种消炎镇痛膏进行安全性评价试验。为了解消炎镇痛膏的使用安全性现状提供数据参考。

1 试验材料

1.1 试验动物

新西兰兔108 只，普通级，体质量2～3 kg，雌雄兼用，动物合格证号：NO.0001375，购于赣州市畜牧业研究所，实验动物生产许可证号：SCXK（赣）2018-0009；豚鼠560 只，普通级，体质量250～350 g，雌雄兼用，动物合格证号：NO.43006700018725，购于长沙市天勤生物技术有限公司，实验动物生产许可证号：SCXK（湘）：2019-0014。上述动物均饲养于江西省药品检验检测研究院普通级环境中，实验动物使用许可证号：SYXK（赣）：2019-0001。

1.2 试验样品

18 家不同厂家的消炎镇痛膏各1 批，共18 批；7 批生产原料（水杨酸甲酯、麝香草酚、颠茄流浸膏、薄荷脑、樟脑、冰片、苯海拉明）；2 批辅料（溶剂油、松香）；2,4-二硝基氯苯

2 试验方法

2.1 试验分组

皮肤刺激试验：采用同体左右侧自身对比法，各试验组4 只，阴性对照物为吸收性纱布；产品说明书明确写明不可用于破损皮肤，故未进行破损皮肤的皮肤刺激性试验。

皮肤过敏试验:阳性对照物为2,4-二硝基氯苯（诱导浓度：1%，激发浓度：0.1%）；阴性对照物为吸收性纱布，动物数：试验组20 只，对照组10 只。

2.2 皮肤刺激性试验［3-6］

2.2.1单次皮肤刺激性试验试验前将试验动物背部脊柱两侧被毛剪掉，去毛范围各为3 cm×3 cm，成品：取成品2.5 cm×2.5 cm；原料和辅料:取受试物约0.5 g 加到 2.5 cm×2.5 cm 大小的吸收性纱布块上。用绷带固定敷贴片4 h，另一侧用吸收性纱布作为对照。在去除药物后的第1、24、48 和72 h 肉眼观察，并记录给药部位有无红斑和水肿等情况。

2.2.2多次皮肤刺激性试验前期步骤同单次皮肤刺激性试验。每次去除药物后1 h 和再次贴敷前观察并记录红斑及水肿、涂敷部位是否有出血点、色素沉着、皮肤菲薄或皮肤粗糙等情况及其发生与消退时间，并对红斑及水肿按表1 进行评分。每天敷贴一次，连续敷贴14 d。末次贴敷后，在去除药物后1、24、48 和72 h 肉眼观察并记录涂敷部位有无红斑和水肿等情况。

2.2.3皮肤刺激结果评价（1）单次给药皮肤刺激性试验，按表1 计算每一观察时间点的各组受试物及赋形剂皮肤反应积分的平均分值。将受试物的皮肤反应平均分值减去赋形剂皮肤反应积分的平均分值得到原发性刺激指数。（2）多次给药皮肤刺激性试验，按表1 计算每个观察时间点中各组的原发性刺激积分均值，然后计算观察期限内每天每只动物刺激积分均值，即累积刺激指数。

表1 皮肤刺激反应评分

刺激强度评价：评分≤0.5 分为无刺激性，评分＞0.5～3 分为轻度刺激性，评分＞3～6 分为中度刺激性，评分＞6～8 分为强刺激性。

2.3 皮肤过敏性试验

2.3.1皮肤过敏方法试验前24 h 将豚鼠背部左侧去毛，去毛范围约为4 cm2，用75%乙醇清洁豚鼠背部去毛区，将受试物约2.5 cm2贴在每只豚鼠去毛区，以二层纱布和一层玻璃纸覆盖,再以胶布封闭固定6 h，记第0 d。在第7 d 和第14 d 同法再给药一次进行诱导。第28 d 将约2.5 cm2受试物贴在豚鼠背部右侧2 cm2去毛区，然后用二层纱布和一层玻璃纸覆盖，再以胶布封闭固定6 h 进行激发，6 h 后除去受试药物并用温水清洁给药部位。观察激发接触后24 h 和48 h 皮肤反应［7-9］。

2.3.2皮肤过敏结果评价按表3 评分，当受试物组动物出现皮肤反应积分≥2 时，判为该动物出现皮肤变态反应阳性。

判定受试物的过敏强度：过敏率≤8%为弱，过敏率＞8%～28%为轻度，过敏率＞28%～64%为中度，过敏率＞64%～80%为强度，过敏率＞80%～100%为极强度。

表2 过敏反应试验皮肤反应评分

3 试验结果

18 批成品、7 种原料、1 种辅料均未见过敏反应。（溶剂油）动物在第一次诱导后出现死亡，在第二次诱导后动物全部死亡；18 批成品、7 种原料、1种辅料在单次皮肤刺激试验后，均未见皮肤刺激反应。在进行14 天的多次皮肤刺激反应试验后，4 个厂家的样品出现轻度皮肤刺激反应，其余厂家样品未出现皮肤刺激反应；3 种原料出现轻度和中度皮肤刺激反应；1 种辅料出现中度皮肤刺激反应。见表5。

表3 各样品皮肤刺激及过敏反应（分）

4 讨论

中药外用为传统中医药治疗疾病尤其是皮肤疾病的重要手段，但近年来随着中草药的广泛应用，过敏事件时有发生。橡胶膏剂中存在过敏因素，其变态、刺激反应引起皮肤过敏问题，降低了橡胶膏剂的舒适型、安全性［10-11］。

在单次皮肤刺激反应试验中，所有成品、原料和辅料均未出现皮肤刺激反应。在皮肤过敏性试验中，成品与原料均未出现皮肤过敏反应。其中溶剂油组动物在完成诱导试验后动物死亡，可能是由于溶剂油挥发性较强，在诱导给药后，动物吸入引起的中毒反应。在多次皮肤刺激试验中发现消炎镇痛膏中有2 种原料存在轻度的皮肤刺激反应，1 种原料和1 种辅料存在中度皮肤刺激反应。而成品中仅4 个厂家生产的消炎镇痛膏出现轻度皮肤刺激反应，说明市售消炎镇痛膏具有较好的安全性。

综上所述，本次试验中，市售消炎镇痛膏仅在多次皮肤刺激试验中，显示轻度的皮肤刺激反应，具有较好的安全性。