不同基因分型HPV在尖锐湿疣患者中的分布情况研究

周新华，杨建峰，马逸婷

（1.郑州市第九人民医院，河南郑州450053；2.郑州市中医院，河南郑州450006）

尖锐湿疣（CA）由人乳头瘤病毒（HPV）感染所致，主要发生部位在肛门-生殖器，是一种良性增生性病变，是一种常见的性传播疾病，少部分由非性传播的密切接触而感染[1-2]。人体的皮肤、黏膜及鳞状上皮均容易被HPV感染，性接触过程中，带有病毒的脱落上皮或角蛋白可通过上皮裂隙中，进而对健康者进行感染[3-4]。CA的复发率高、传染性强，对患者的健康造成严重影响。根据HPV致病力的强弱，可分为低危型病毒和高危型病毒2种，其中低危型的感染可引起机体皮肤和黏膜的良性病变，高危型可引起感染部位的非典型增生以及恶性病变[5-6]。有40多种HPV亚型可以感染人体泌尿生殖道，绝大多数CA的感染与HPV-6型和11型有关[7-8]。因此本研究CA患者为研究对象，采用基因芯片分型技术对患者的HPV基因分型进行检测分析，探讨不同基因分型HPV在CA患者中的分布情况，以期为临床的诊断和治疗提供一定的依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

1.1.1 临床资料 以91例2017年3月—2020年2月就诊于我院的CA患者为研究组，另以60同期健康的体检者为对照组。其中研究组年龄20～73岁，平均（38.9±14.2）岁，男 52例，女 39例；对照组年龄19～70岁，平均（38.5±16.2）岁，男 33例，女 27例。2组患者基本信息比较差异无统计学意义（P＞0.05），有可比性。

1.1.2 纳入与排除标准 纳入标准：①符合诊断标准，根据CA有关文献和《尖锐湿疣治疗专家共识（2017）》制定CA的诊断标准[9-10]，通过临床表现、流行病学史以及醋酸白试验等确诊为CA患者；②年龄18～80岁；③有性生活史；④能配合检查者。

排除标准：①有流行病学史但无CA皮疹者；②皮疹不典型者；③有生殖器、肛门肿瘤病史者；④接种过HPV疫苗者；⑤合并其他性病者；⑥就诊时有外生殖器溃疡或损伤者；⑦患有免疫性疾病或消耗性疾病者等。

1.2 方法

1.2.1 样本采集 对照组患者无疣体，采用HPV采样刷于生殖器部位采集脱落细胞样本，男性为尿道口及冠状沟，女性为宫颈及外阴部位。研究组患者可见疣体，对疣体部位常规消毒，局部麻醉后，采用无菌小镊子取疣体组织。所有标本采集后均放入取样管内，4℃冰箱保存，3 d内完成检测。

1.2.2 样品检测 本研究采用基因芯片技术对所有样本进行检测，严格按试剂盒说明书进行操作。经DNA提取（于标本试管中加入适量生理盐水，经震荡混匀离心后，于沉淀中加入核酸提取液，沸水浴后离心，取适量上清液作为聚合酶链式反应（PCR）反应模板，对照品处理方式同标本）、PCR扩增、核酸分子杂交以及酶标显色后，依据芯片上HPV基因型相应得到着色位点确定基因分型，若有多点呈阳性，则为多重基因型HPV的混合感染。

本研究检测10种基因分型，分别为：其中高危型有 16、18、33、35、45、51、52、58；低危型有 6 和 11。

1.3 统计学分析 以SPSS 19.0对数据进行分析，计数资料采用率（%）表示，使用 χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2组HPV阳性检出率比较 研究组HPV阳性检出率为64.84%，显著高于对照组的3.33%（P＜0.05），见表1。

表1 2组HPV阳性检出率比较 例

2.2 不同性别HPV各亚型阳性检出率比较 不同基因型阳性检出率由高到低依次为HPV-11、HPV-6>HPV-16>HPV-18、HPV-33、HPV-58>HPV-35、HPV-45、HPV-51、HPV-52。其中男性患者 HPV-16的阳性检出率显著高于女性；女性的HPV-35阳性检出率显著高于男性（P＜0.05）。男、女性高危型、低危型阳性检出率对比差异无统计学意义（P>0.05），见表2。

表2 不同性别HPV各亚型阳性检出率比较 例（%）

2.3 不同年龄阶段HPV感染分布情况 随着年龄段的增加，HPV阳性检出率呈逐渐降低趋势：18～29岁阳性检出率为40.68%，30～39岁阳性检出率为30.51%，40～49岁阳性检出率为 16.95%，50～59岁阳性检出率为8.47%，60岁以上阳性检出率为3.39%，大部分患者集中于18～39岁范围内。感染类型的百分比由高到低依次为：单纯低危患者（44.07%）、单纯高危患者（32.20%）、高低危混合感染（23.73%），见表3。

表3 不同年龄阶段HPV感染分布情况 例

3 讨论

HPV是一种环状脱氧核糖核酸（DNA）病毒，约有5%的癌症与HPV感染有关，感染HPV后，常有几个月的潜伏期，若HPV不能被尽早清除时，可能在相应部位引起CA，甚至是癌前病变、恶性肿瘤等[11]。本研究对CA患者和健康人群的HPV阳性检出率进行比较，结果显示研究组HPV阳性检出率为64.84%，显著高于对照组的3.33%。

根据HPV病毒致病力的强弱，可分为低危型和高危型，低危型HPV感染部位表现为良性病变，常见基因型为HPV-6和HPV-11，高危型HPV感染与癌前病变、恶性肿瘤的发生密切相关，常见基因类型有 HPV-16、HPV-18、HPV-33 等[12]。因 HPV 的致病力与其基因类型密切相关，且CA在不同人群中发发病率存在一定的差异，对不同性别HPV基因分型的检测有重要意义。因此本研究对不同性别HPV各亚型检出率进行比较，结果显示，不同基因型阳性检出率由高到低依次为HPV-11、HPV-6>HPV-16>HPV-18、HPV-33、HPV-58>HPV-35、HPV-45、HPV-51、HPV-52。其中男性 HPV-16 的阳性检出率显著高于女性；女性HPV-35的阳性检出率显著高于男性。男、女性高危型、低危型阳性检出率比较差异无统计学意义。

本研究将CA患者按年龄阶段分为5个组，比较在不同年龄阶段HPV感染的分布情况，结果表明随着年龄段的增加，HPV阳性检出率呈逐渐降低趋势。感染类型的百分比由高到低依次为单纯低危患者、单纯高危患者、高低危混合感染。可能原因为，医院就诊的CA患者以18～39岁居多，且该年龄段人群处于性活跃期，同时也表明，该年龄段HPV传染风险也较高，需对患者进行健康教育，以减少HPV的传染率。