选择性溶剂提取—旋光法测定薄荷油-β-环糊精包合物油利用率*

陈恺悦 闫福鹏 王家雯 邵欣怡 李 菲

山东第一医科大学(山东省医学科学院)，山东 泰安 271016

薄荷油系从唇形科植物薄荷Mentha haplocalyx Briq.的新鲜茎、叶中提取的挥发油，具有清凉止痒、抗炎镇痛、抗真菌、抗病毒、祛痰等多种药理作用[1-3]。薄荷油等挥发油在中成药制剂中应用广泛，采用传统喷加方式易于挥发，在制剂储存期间含量明显降低[4-5]。为了减少薄荷油的挥发，并有利于与固体物料的混合，通常将薄荷油制成薄荷油-β-环糊精包合物，然后制成固体制剂[6-8]。在制备过程中，一般采用水蒸气蒸馏法进行提取，测定包合物的油利用率[9-10]。水蒸气蒸馏法是一种提取薄荷油等挥发油的有效方法，但该法所需时间长[11]。本研究利用薄荷油的旋光性和溶剂对薄荷油的选择性溶解，建立了准确、快速的选择性溶剂提取旋光法测定薄荷油-β-环糊精包合物中油利用率的方法。

1 材料

LXT-IIB高速离心机(天津市泰斯特仪器有限公司)；KQ-600VDB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；WZZ-2B型自动旋光仪(上海精密科学仪器有限公司)；薄荷油(安徽太和县药用薄荷总厂)；薄荷油-β-环糊精包合物(自制)；其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 溶液的配制

2.1.1对照品溶液的制备[12]取薄荷油适量，精密称定，加无水乙醇制成质量浓度为640 mg·ml-1的对照品溶液。

2.1.2供试品溶液的制备 取薄荷油-β-环糊精包合物2 g置于离心管中，加入10 ml无水乙醇，超声10 min，5000 r·min-1离心5 min。取上清液6 ml，加无水乙醇至10 ml，即得。

2.2 实验方法

2.2.1标准曲线的制备 取对照品储备液适量，加无水乙醇分别制得质量浓度为20、40、80、160、320、640 mg·ml-1的标准溶液，按照《中国药典》2015年版[7]旋光度测定法，用长度1 dm旋光管，以无水乙醇为对照，于(20±0.5)℃测其在589.3 nm下的旋光度。将旋光度(ψ)对质量浓度(C)进行回归，线性方程为=-0.017 C+0.201(r=0.9997)，表明薄荷油质量浓度在20～640 mg·ml-1内与旋光度二者线性关系良好。

2.2.2精密度实验 取质量浓度为20.0、160.0、640.0 μg·ml-1对照品溶液，分别连续测定旋光度5次，低、中、高三个浓度的溶液日内RSD分别为0.39%、0.31%、0.72%，表明精密度良好。

2.2.3稳定性实验 取质量浓度为20.0、160.0、640.0 μg·ml-1对照品溶液，室温放置0、2、4、8、12、24 h测定旋光度，计算低、中、高三个浓度的溶液旋光度的RSD分别为0.91%、1.19%、1.76%，RSD均小于2%，表明供试品溶液在室温放置24 h内稳定性良好。

2.2.4重复性实验 精密称取薄荷油-β-环糊精包合物样品5份，每份2 g，按照“2.1.2”项方法操作制成供试液，测定旋光度，计算油利用率的RSD为0.89%，表明本方法重复性良好。

2.2.5加样回收率实验 取已知含量的薄荷油-β-环糊精包合物9份，每份2 g，3份为一组，分别精密加入一定量的薄荷油对照品，按照“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，测定旋光度并计算加样回收率，结果见表1。

表1 加样回收率测定结果(n=3)

由表1可见，该法加样回收率95%～105%，RSD均小于2%，符合测定要求。

2.3 样品测定

精密称取薄荷油-β-环糊精包合物适量，按照“2.1.2”项方法制备供试品溶液，按照“2.2.1”项方法测定其旋光度，根据标准曲线计算薄荷油的浓度。另取样品采用水蒸气蒸馏法进行测定，与选择性溶剂提取旋光法进行比较。按照《中国药典》2015年版四部通则中挥发油测定法甲法[13]，精密称取薄荷油-β-环糊精包合物适量，置于1000 ml圆底烧瓶中，加入300 ml蒸馏水，连接挥发油提取器，加热回流5 h，提取薄荷油。根据如下公式计算油利用率和包合物收率，见表2。

表2 样品测定结果(n=3)

由表2可见，与水蒸气蒸馏法相比，本法测定薄荷油-β-环糊精包合物收率和油利用率的RSD小，测定结果准确，且测定快速。

3 讨 论

环糊精分子的空腔外部亲水，内部疏水，且乙醇分子尺寸远小于β-环糊精的空腔尺寸，乙醇分子可进入空腔。因此，乙醇可作为竞争剂，将客分子从β-环糊精的空腔中全部置换出来[14-15]。薄荷油-β-环糊精包合物中加入无水乙醇，可将包合物中的薄荷油竞争性置换出来并在无水乙醇中完全溶解。β-环糊精不溶于无水乙醇[16]，因此，可利用无水乙醇对薄荷油的选择性溶解，采用高速离心法分离薄荷油和β-环糊精。薄荷油为旋光性物质，比旋光度为-19.05°，可采用旋光法测定薄荷油的含量[17]。实验结果表明，选择性溶剂提取—旋光法与常用的水蒸气蒸馏法相比，虽然测定结果相差不大，但是水蒸气蒸馏法耗时长，且样品量的要求较大(相当于含有薄荷油0.5～1.0 ml以上)。实验测得水蒸气蒸馏法的回收率为90%，而选择性溶剂提取—旋光法的回收率大于95%，测定结果更准确。因此，本实验建立的选择性溶剂提取—旋光法测定薄荷油包合物油利用率的方法效率高，对样品量的要求低，且定量方法简便、准确。