甲状腺良恶性鉴别中应用冰冻切片及石蜡切片病理检查的价值

陈海敏 江沂 刘婉 江桂英

（广州医科大学附属中医医院病理科 广东广州 510000）

甲状腺肿瘤是临床常见的头颈部肿瘤，虽然绝大部分为良性病变，但仍存在恶性病变的可能性[1]。影像学检查对一些病变不典型及病灶较小的病变难以明确诊断, 当发现甲状腺结节性病变还需要通过手术进行明确诊断。目前临床常用的治疗方法是甲状腺肿瘤切除术，并对切除的病变进行病理检查，确定良恶性，以便术中选择合适的手术范围及术后相应的治疗措施。冰冻切片和石蜡切片是当前主要的病理诊断方式，两者各有优劣，石蜡切片准确率高，是诊断肿瘤良恶性的金标准，但检查时间较长，而冰冻切片检查过程快捷，但诊断准确性低于石蜡切片[2]。甲状腺恶性肿瘤中，甲状腺乳头状癌的发病率较高，而其中的微小甲状腺乳头状癌由于体积较小，在取材和制片过程中，容易漏检，从而对冰冻切片诊断符合率造成影响。本文为了探究冰冻切片和石蜡切片病理检查在甲状腺良恶性鉴别中的应用价值，收集整理我院126 例行甲状腺切除术并进行了冰冻切片和石蜡切片病理检查的病例进行研究，现总结如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

以2019 年1 月～2020 年12 月我院126 例行甲状腺组织切除术的患者作为研究对象，其中男性22 例，女性104例；年龄21～87 岁，平均（51.32±14.26）岁；双侧甲状腺病变83 例，单侧甲状腺病变43 例；所有患者均进行冰冻切片（冰冻组）和石蜡切片（石蜡组）病理检查。

1.2 方法

患者术中切除的甲状腺组织均进行冰冻切片及石蜡切片病理检查，并进行良恶性鉴别，具体步骤如下：（1）病理组织采集：取材时选取甲状腺可疑病变组织1～2 块。（2）冰冻切片病理检查：将取好甲状腺组织放在滴有OCT 包埋剂的托头上，迅速放入温度为-20 ℃的徕卡CM1950 冰冻切片机中，用冰冻锤压平冰冻15～30s，放在切片架上，粗修组织，待需要观察的切面全切出，再细切成厚度为5～6um 的切片,用常温玻片贴取组织切片，立即用乙醚乙醇固定液快速固定60 s，进行快速HE 染色、梯度酒精脱水、透明、固封，诊断医师用光学显微镜鉴别其良恶性。（3）石蜡切片病理检查：将已制作冰冻的组织及剩余的甲状腺组织用10%中性缓冲福尔马林固定，取材医生进行充分取材后，把标本放进徕卡ASP300S脱水机进行常规脱水、浸蜡；然后对组织进行包埋，用徕卡RM2245 切片机将其切成厚度为4μm 的切片，用电热恒温鼓风干燥箱以65℃的温度烤片15min，再进行脱蜡、常规HE染色、梯度酒精脱水、透明、封片，诊断医师用光学显微镜鉴别其良恶性。

1.3 评价指标

以石蜡切片结果为最终良恶性诊断金标准，对比分析冰冻切片鉴别良恶性的准确率。其中将冷冻切片结果分为确诊、误诊和延迟确诊三类：①确诊。冷冻切片与石蜡切片良恶性一致；②误诊。冰冻切片与石蜡切片良恶性诊断不一致；③延迟确诊。冷冻切片不能明确诊断良恶性，需要等待石蜡切片结果明确诊断。

1.4 统计学处理

使用统计学软件SPSS21.0 处理和分析本文所涉及的数据，计量资料以（）表示，t 检验，计数资料以[n(%)]表示，X2检验；数据P＜0.05 表示差异存在统计学意义。

2 结果

2.1 两组甲状腺组织良恶性的鉴别结果

冰冻组良性病变确诊92 例，延迟确诊1 例；恶性病变确诊27 例，误诊3 例，延迟确诊3 例；石蜡组检查无误诊,无延迟确诊；冰冻组良性诊断率为98.92%，恶性诊断率为81.82%；总体良恶性鉴别准确率为94.44%，低于石蜡组（X2=7.200，P=0.007）。如表1 所示。

表1 两组甲状腺组织良恶性的鉴别结果

2.2 两组在甲状腺恶性病变的鉴别结果

冰冻组甲状腺微小乳头状癌确诊18 例，误诊3 例，延迟确诊3 例，诊断符合率为75.00%，误诊率为12.50%，延迟确诊率为12.50%；甲状腺乳头状癌确诊7 例，无误诊及延迟确诊；甲状腺髓样癌确诊1 例，无误诊及延迟确诊；甲状腺低分化癌确诊1 例，无误诊及延迟确诊。

3 讨论

由于人们生活方式的改变，甲状腺肿瘤的发病率不断上升，虽多为良性病变，但仍有小部分为恶性病变。甲状腺乳头状癌是最常见的一种甲状腺癌，恶性程度低，预后较好。石蜡切片是当前临床诊断甲状腺肿瘤的金标准，具有极高的准确率，但检查时间过长，无法在术中进行病理检查[3]。冰冻切片是在低温条件下快速冷冻组织至一定硬度后切片并行病理检查的一种方式，相比如石蜡切片，制作过程更为方便，可以在30 min 内获得诊断结果，可以在手术中为手术医师提供有效的病理参考[4]。但冰冻切片的诊断结果受制作时间和制作方法、取材数量和大小局限以及诊断医师的经验和病理技术员的操作等影响较大，所以取材医师要注意全面观察标本，选取可疑的病变组织，病理技术员在制片过程中要注意组织的完全切出，特别是微小的病变部位，以及染色均匀等，以提高诊断准确性。本次研究发现：冰冻组良恶性鉴别准确率为94.44%，低于石蜡组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。这与洪丽华[5]的研究相反，其研究以石蜡切片结果为最终甲状腺良恶性诊断金标准，分析了甲状腺组织冰冻切片的诊断准确率，发现冰冻切片的诊断准确率为97.18%，与石蜡切片病理诊断准确率无明显差异。造成两者研究差异的原因可能是本次研究的本院的126 例病例中以甲状腺微小乳头状癌为主，占了总恶性病例的72.73%。本次研究的石蜡组诊断为恶性病变33 例，其中微小乳头状癌24 例，乳头状癌7 例；而冰冻组确诊为微小乳头状癌18 例，误诊3 例，延迟确诊3 例，诊断符合率为75.00%，误诊率为12.50%，延迟确诊率为12.50%。石蜡组微小乳头状癌和乳头状癌共占恶性病变总数的93.94%，微小乳头状癌占恶性病变75.00%，占误诊病例及延迟确诊病例的100.00%。与徐国新[6]的研究结果相近，其微小乳头状癌的冰冻切片诊断准确率为76.67%。可见甲状腺微小乳头状癌与乳头状癌在甲状腺恶性病变中所占比例最高，也是最易漏诊和延迟诊断的恶性病变。微小乳头状癌（直径≤1.0cm 的乳头状癌）是临床常见疾病，其病变灶微小，善于隐匿，不容易被发现，因此常会出现漏诊误诊的情况[7]。冷冻切片由于制片时间短，组织没有经过脱水处理，细胞体积比石蜡切片中的细胞大，乳头状结构更加拥挤密集，结构也更加不好辨认[8]。在冰冻切片中，微小乳头状癌的诊断困难，甲状腺乳头状癌的病理诊断主要依据核的特征，而冰冻切片不出现毛玻璃样核，还会存在人工假象[9]。所以，诊断医师需要熟练掌握甲状腺乳头状癌镜下结构特征及其核特征，病理技术员在制片过程中也多注意经验的积累，以提高微小乳头状癌的确诊率。

表2 两组在甲状腺恶性肿瘤的鉴别结果

由此可见，虽然冰冻切片鉴别甲状腺良恶性的准确率较高，但仍低于石蜡切片，尤其是在微小乳头状癌的诊断中，由于受多种因素影响仍有一定误诊及延迟诊断，故切除的组织标本在术后仍需进行石蜡切片病理诊断，为临床医生提供更加准确的诊断结果，更好地指导临床治疗。