TSGF、GGT联合、VEGF检测对原发性肝癌TACE疗效的预测价值

周永祥 首峰 张景俊 叶世富

原发性肝癌（primary hepatocellular carcinoma，PHC）即原发于肝脏的上皮性恶性肿瘤，肝细胞癌最为多见，少数为胆管细胞癌及混合型［1］。由于该病早期起病隐匿，发现时往往多数已到达晚期，手术治疗疗效不佳［2］。经肝动脉灌注化疗栓塞术（transcatheter arterial chemoembolization，TACE）已成为治疗原发性肝癌的主要非手术方法，疗效确切，但术后转移仍是目前需要解决的问题［3］。肿瘤特异性生长因子（tumor specific growth factor，TSGF）是在恶性肿瘤形成和生长时，促进肿瘤及周边毛细血管增殖并释放到外周血液中的因子［4］。γ-谷氨酰转肽酶（γ-glutamyl transpeptidase，GGT）是一种广泛分布于哺乳动物组织中的质膜结合糖蛋白，在肝脏广泛分布于肝细胞毛细胆管一侧和整个胆管系统。血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）作为迄今所发现的最重要的促血管生成因子，具有促进血管新生的作用［5］。本研究就TSGF、GGT 联合VEGF 检测对PHC 患者TACE 治疗疗效的预测价值进行研究，为临床评估VEGF 患者的预后提供帮助。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集69 例2016年5月至2018年5月于本院行TACE 治疗的PHC 患者的肿瘤组织，纳入标准：①病理、影像学和血清甲胎蛋白检查满足《原发性肝癌诊疗规范》中相关诊断标准［6］；②所有均未接受过放疗和化疗；③所有患者均有完整详细的临床资料以及治疗记录；排除标准：①合并血液疾病者；②存在除PHC 以外其他原发性恶性肿瘤者；③合并风湿免疫及结缔组织病变者；④肿瘤全身广泛转移，估计患者生存期＜3 个月；⑤肿瘤体积占全肝体积≥70%。最终66 例患者满足本研究纳入排除标准。其中男46 例，女30 例，平均年龄（48.45±5.84）岁。根据随访期间内复发情况分为未复发组（n=41）及复发组（n=25），两组一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准。

1.2 实验方法

1.2.1 VEGF、TSGF 检测［7］

采用酶联免疫吸附法检测，VEGF 和TSGF 酶联免疫试剂盒购自上海尤他生物技术有限公司严格按照试剂盒使用说明书进行操作。

1.2.2 GGT 检测

抽取入组对象清晨空腹静脉血3 mL，离心（3 500 r/m，半径15 cm，15 min）取上清置于-20℃冷藏设备中备用。采用美国贝克曼库尔特公司生产的LX-20 全自动生化分析仪进行检测，试剂购自美国贝克曼库尔特公司，严格按照试剂盒使用说明书进行操作。

1.3 随访方法［8］

所有病例主要是住院或门诊复查，小部分采用电话方式随访观察。随访截止于确定肿瘤复发日或到2020年5月31日。

1.4 统计学方法

采用SPSS 18.0 软件进行统计分析，计数资料以n（%）表示，采用χ2检验，计量资料采用（±s）描述，行t检验；采用多元Logistic 回归分析影响PHC患者TACE 治疗后复发的危险因素，采用ROC 曲线分析TSGF、GGT、VEGF 及三者联合检测对PHC 患者TACE 疗效的预测价值；以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 TACE 治疗前后TSGF、GGT、VEGF 水平比较

治疗后TSGF、GGT、VEGF 水平均低于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

2.2 影响PHC患者TACE治疗后复发的单因素分析

复发组与未复发组性别、年龄、肝硬化史、肝炎史及手术史比较差异无统计学意义（P＞0.05），复发组肝功能Child-Pugh 分级B 级、术前甲胎蛋白＞20 ng/mL、肿瘤直径＞3 cm、肿瘤位置第二肝门旁及多发性肿瘤者较未复发组多，复发组TSGF、GGT、VEGF 水平较未复发组高，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表1 TACE 治疗前后TSGF、GGT、VEGF 水平比较（±s）Table 1 Comparison of TSGF，GGT and VEGF levels before and after TACE treatment（±s）

表1 TACE 治疗前后TSGF、GGT、VEGF 水平比较（±s）Table 1 Comparison of TSGF，GGT and VEGF levels before and after TACE treatment（±s）

时间治疗前治疗1 个月后t 值P 值n 66 66--TSGF（U/mL）185.56±37.98 127.45±27.83 10.759＜0.001 GGT（U/L）159.86±27.83 115.47±24.51 10.435＜0.001 VEGF（pg/mL）379.86±96.31 243.18±97.75 8.683＜0.001

表2 影响PHC 患者TACE 治疗后复发的单因素分析［n（%）］Table 2 Univariate analysis of recurrence in PHC patients after TACE［n（%）］

2.3 影响PHC患者TACE治疗后复发的多因素分析

经Logistic 回归分析发现：术前甲胎蛋白、TSGF、GGT、VEGF 水平为影响PHC 患者TACE治疗后复发的独立危险因素（P＜0.05）。见表3。

表3 影响PHC 患者TACE 治疗后复发的多因素分析Table 3 Analysis of multiple factors influencing recurrence of PHC patients after TACE

2.4 TSGF、GGT、VEGF 及三者联合检测对PHC患者TACE 疗效的预测价值

ROC 曲线结果显示，TSGF、GGT、VEGF 及三者联合曲线下面积分别为0.800、0.725、0.656、0.883，各指标曲线下面积以三者联合最大，见表4及图1。

表4 TSGF、GGT、VEGF 及三者联合对PHC 患者TACE疗效的预测价值（%）Table 4 Predictive value of TSGF，GGT，VEGF and their combination on TACE efficacy in PHC patients（%）

图1 TSGF、GGT、VEGF 及三者联合对PHC 患者TACE疗效的预测价值ROC 曲线分析Figure 1 ROC curve analysis of predictive value of TSGF，GGT，VEGF and their combination in PHC patients with TACE

3 讨论

TACE 是采用介入方法将导管经血管送达肿瘤供血动脉，注入药物进行治疗的一种方法［9］。相比于传统化疗方法，经肝动脉治疗局部化疗药物浓度高，可避免全身大剂量用药及首过效应，降低化疗副作用［10］。临床实践表明，TACE 治疗可缓解PHC 患者的病情，减轻痛苦延长患者的生命，提高其生活质量，目前已成为国内外公认较为成熟的不可切除肝癌首选治疗方法［11］。相关学者指出，转移复发已成为进一步延长HCC 患者生存、改善预后的主要障碍，故寻求有效指标对疗效进行评估有重要意义［12］。

TSGF 的受体呈跨膜分布，结构分为突出在细胞外能识别特异的生长因子与之结合的区域、连接区、面向细胞内部具有酪氨酸蛋白激酶活性的结构区［13］。研究发现，在恶性肿瘤形成早期，TSGF 可明显升高。肝癌介入治疗的理论基础为阻断肿瘤的供血血管，从而减少肿瘤血供。而肿瘤的复发和肝内转移则是由于肿瘤组织再次获得肝动脉及外周门静脉的供血，产生新的肿瘤血管，滋养肿瘤组织而成［14］。因此，TSGF 作为肿瘤血管生长的指标，可以评价TACE 治疗的疗效，其变化可能能够反映肝癌的复发及转移。

GGT 是γ-谷氨酰循环中的关键酶，常见于具有分泌和吸收功能的上皮细胞膜上。血清中的GGT 主要由肝细胞线粒体产生，局限于细胞浆及肝内胆管上皮中，从胆管排泄。本研究结果提示GGT 在PHC 复发转移的检测具有重要意义，可用于发现TACE 治疗后的亚临床复发和转移。

VEGF 是目前已知作用最强、专属性最高的促血管生长因子，其对内皮细胞的增生有强烈的刺激作用，可增加血管通透性，加速肿瘤血管内皮细胞的增殖和迁移，进而促进肿瘤血管形成［15］。本研究结果说明其机制可能是TACE 治疗后肿瘤血管被栓塞，在无血供的条件下，瘤体终止生长，进入休眠期，肿瘤细胞生长被抑制，故分泌VEGF 明显下降。其原因可能是VEGF 可以特异性地与肿瘤细胞表面的血管内皮细胞生长因子受体（Vascular Endothelial Growth Factor Receptor，VEGFR）相互作用，激活VEGF-VEGFR-NFκB 信号通路，进一步下调抑制细胞迁移的靶基因，促进肿瘤细胞的迁移。

值得注意的是，肝癌转移复发转移作为一个多步骤、多因素参与并且相互作用的复杂过程，仅用单一指标无法进行准确预测。本研究经ROC 曲线分析显示，各指标曲线下面积以TSGF、GGT 及VEGF 三者联合最大，这提示临床需同时参考多项具有预后价值的生物学指标，进而提高预测价值。

综上所述，TSGF、GGT 及VEGF 水平为影响PHC 患者TACE 治疗后复发的独立危险因素，联合三者检测可增加对PHC 患者TACE 治疗疗效的预测价值。