华中枸骨根化学成分研究

路艳霞，阳 航，石 妤，李路军, 2*，胡泽华，邓雪莹，易英韬，孙可可

华中枸骨根化学成分研究

路艳霞1，阳 航1，石 妤1，李路军1, 2*，胡泽华3，邓雪莹1，易英韬1，孙可可1

1.药物高通量筛选国家与地方联合工程研究中心，生物催化与酶工程国家重点实验室，中药生物技术湖北省重点实验室，湖北大学，湖北 武汉 430062 2.甘肃百草中药材种植有限公司，甘肃 兰州 730102 3.湖北民族大学医学部，湖北 恩施 445000

研究华中枸骨根的化学成分。运用硅胶、Sephadex LH-20，ODS柱色谱及半制备HPLC等方法进行分离纯化，并通过NMR等波谱技术和理化性质鉴定结构。从华中枸骨根中分离得到13个化合物，分别鉴定为11-羰基-ɑ-香树醇-3β-棕榈酸酯（1）、3β-乙酰氧基-28-羟基-12-烯-乌苏烷（2）、儿茶酚（3）、4-乙基儿茶酚（4）、2,4,6-三甲氧基苯酚（5）、3-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-1,2-丙二醇（6）、3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1,2-丙二醇（7）、3,4-二甲氧基苯酚（8）、3,4-二羟基苯丙酸甲酯（9）、3β,19α,23-三羟基-20α()-乌苏-12-烯-28-酸3β--α--吡喃阿拉伯糖（10）、(＋)-1-羟基松脂醇-1--β--葡萄糖苷（11）、3β--[α--吡喃鼠李糖(1→2)-α--吡喃阿拉伯糖]-坡模酸（12）、rotundioic acid（13）。所有化合物均为首次从华中枸骨中分离得到，其中4～9为首次从冬青属植物中分离得到。

华中枸骨；11-羰基-ɑ-香树醇-3β-棕榈酸酯；3-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-1,2-丙二醇；(＋)-1-羟基松脂醇-1--β--葡萄糖苷

华中枸骨S.Y.Hu，又名针齿冬青，为冬青科（Aquifoliaceae）冬青属L.植物，叶和根入药，其叶在我国某些地区被用作苦丁茶的原料[1]，根具有清热解毒、祛风祛湿作用，为常用土家族药物，用于治疗类风湿性关节炎[2]。目前对其叶的研究比较多，林立冬等[3-5]从华中枸骨叶中分离鉴定出多个三萜和黄酮类化合物。本研究室前期研究证实其叶具有很强的抗炎和自由基清除作用[6]，并从中分离得到多个新的黄烷类成分[7-10]。但对其根的研究鲜有报道，为了进一步深入研究该植物资源，完善其根的药效物质基础，本研究对其根的化学成分进行研究，从其95%乙醇提取物中分离得到13个化合物，分别鉴定为11-羰基-α-香树醇- 3β-棕榈酸酯（11-carbonyl-α-amyrin-3β-palmitate，1）、3β-乙酰氧基-28-羟基-12-烯-乌苏烷（3β-acetoxy- 28-hydroxy-12-ene-urs，2）、儿茶酚（catechol，3）、4-乙基儿茶酚（4-ethyl catechol，4）、2,4,6-三甲氧基苯酚（2,4,6-trimethoxyphenol，5）、3-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-1,2-丙二醇[3-(4-hydroxy-3,5- dimethoxyphenyl)propane-1,2-diol，6]、3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1,2-丙二醇[3-(4-hydroxy-3- methoxyphenyl)propane-1,2-diol，7]、3,4-二甲氧基苯酚（3,4-dimethoxyphenol，8）、3,4-二羟基苯丙酸甲酯（3,4-dihydroxybenzenepropionic acid methyl ester，9）、3β,19α,23-三羟基-20α()-乌苏-12-烯-28-酸3β--α--吡喃阿拉伯糖 [3β,19α,23-trihydroxy- 20α()-urs-12-en-28-oic acid 3β--α--arabinopyra- noside，10]、(＋)-1-羟基松脂醇-1--β--葡萄糖苷[(＋)-1-hydroxypinoresinol-1--β--glucoside，11]、3β--[α--吡喃鼠李糖(1→2)-α--吡喃阿拉伯糖]-坡模酸（3β--[α--rhamnopyranosyl (1→2)-α-- arabinopyranosyl]-pomolic acid，12）、rotundioic acid（13）。所有化合物均为首次从华中枸骨中分离得到，其中化合物4～9为首次从冬青属植物中分离得到。

1 仪器与材料

Bruker 400M、500M核磁共振仪（瑞士Buruker公司）；Q-Exactive四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱（美国Thermo Fisher Scientific公司）；LCMS-8040三重四级杆液质联用仪（日本岛津）；LC-20AR半制备型高效液相和LC-20AD分析型高效液相（日本岛津）；EZ Purifier中低压制备色谱（利穗科技有限公司）；RE-5298旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器场）、SHZ-D（III）循环水式真空泵和DLSB-5L/20低温冷却液循环泵（巩义市予华仪器责任有限公司）；DTD-6超声波清洗机（鼎泰生化科技设备制造有限公司）；FA2004B电子天平（上海天美天平仪器有限公司）；GF254薄层色谱硅胶板和柱色谱硅胶（青岛海洋化工）；0.3 mm毛细管（华西医科大学仪器厂）；D-101大孔树脂（天津市海光化工有限公司）；Sephadex LH-20（GE公司）；分析型色谱柱用Shim-pack GIST C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；半制备型色谱柱用YMC-Pack ODS-A（250 mm×10 mm，5 μm）和Shim-pack GIST（C18，250 mm ×10 mm，5 μm）；有机溶剂除色谱用甲醇为色谱级试剂，其余均为分析纯。

实验用华中枸骨根采自湖北省恩施州建始县，经湖北民族大学郜红利教授鉴定为华中枸骨S.Y.Hu的干燥根，标本（ICR20150615）保存于湖北大学中药生物技术湖北省重点实验室。

2 提取与分离

华中枸骨根5 kg，适当粉碎后加6倍量95%乙醇浸提3次，每次3 d，合并提取液，减压浓缩得到总浸膏（255.5 g），用适量水混悬，依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇等比例萃取3次，萃取液减压浓缩旋干后，分别得石油醚部位浸膏（3.2 g）、醋酸乙酯部位浸膏（23.6 g）和正丁醇部位浸膏（138.8 g）。

取醋酸乙酯部位浸膏（23.6 g）经（200～300目）硅胶柱色谱进行分离，以石油醚-醋酸乙酯（100∶0～83∶17）、二氯甲烷-甲醇（100∶0～0∶100）依次进行梯度洗脱，得11个流分Fr.1～11。Fr.1经重结晶（二氯甲烷）得到化合物1（30.0 mg），Fr.2经硅胶柱分离，以石油醚-醋酸乙酯（20∶1～1∶1）梯度洗脱，得7个次级流分（Fr.2.1～2.7），Fr.2.4经sephadex LH-20凝胶柱二氯甲烷-甲醇（1∶1）洗脱及重结晶（石油醚-醋酸乙酯）得到化合物2（6.2 mg）。Fr.3经HPLC（20%甲醇，R＝35.0 min）制备得到化合物3（6.8 mg）。Fr.4经硅胶柱分离，以石油醚-醋酸乙酯（50∶1～1∶1）梯度洗脱，合并得3个次级流分（Fr.4.1～4.3），Fr.4.3经HPLC（45%甲醇，R＝37.5 min）制备得到化合物4（27.0 mg）。Fr.5经硅胶柱色谱，以石油醚-醋酸乙酯（10∶1～1∶1）梯度洗脱得4个次级流分（Fr.5.1～5.4），Fr.5.1经Sephadex LH-20凝胶柱色谱甲醇洗脱得24个流分（Fr.5.1.1～5.1.24），Fr.5.1.17经HPLC（30%甲醇，R＝45.0 min）制备得到化合物5（35.1 mg）。Fr.6经硅胶柱色谱，以二氯甲烷-甲醇（40∶1～15∶1）梯度洗脱，得到4个组分（Fr.6.1～6.4），Fr.6.1经HPLC（17%甲醇）制备得到化合物6（10.7 mg，R＝54.5 min）和7（12.8 mg，R＝41.5 min）。Fr.7经硅胶柱色谱，以二氯甲烷-甲醇（80∶1～50∶1）梯度洗脱得到5个次级流分（Fr.7.1～7.5），Fr.7.4经HPLC（27%甲醇，R＝36.0 min）制备得化合物8（9.5 mg）。Fr.8经Sephadex LH-20凝胶柱色谱甲醇洗脱得25个次级流分（Fr.8.1～8.25），Fr.8.11经HPLC（29%甲醇，R＝44.5min）制备得到化合物9（12.4 mg）。Fr.9经Sephadex LH-20凝胶柱色谱甲醇洗脱得20个流分（Fr.9.1～9.20），Fr.9.7经甲醇重结晶得到化合物10（6.2 mg），Fr.9.8经HPLC（36%甲醇，R＝54.5 min）制备得到化合物11（5.6 mg）。Fr.10经反相C18硅胶柱色谱，以甲醇-水（90∶10～10∶90）梯度洗脱得3个次级流分（Fr.10.1～10.3），Fr.10.3经半制备HPLC（69%甲醇，R＝22.5 min）制备得到化合物12（7.0 mg）。正丁醇部位（138.8 g）通过大孔树脂柱色谱，以乙醇-水（30∶70、50∶50、90∶10）洗脱得到3个流分（Sr.1～3），将Sr.2过硅胶色谱柱，以甲醇-水（10∶1～1∶1）梯度洗脱，得6个次级流分（Sr.2.1～2.6），Sr.2.1经Sephadex LH-20凝胶柱色谱甲醇洗脱，得到化合物13（12.3 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：无色针晶（二氯甲烷）。ESI-MS/: 701 [M＋Na]+。1H-NMR (500 MHz, CDCl3): 5.54 (1H, s, H-12), 4.52 (1H, dd,= 11.7, 4.7 Hz, H-3), 1.29, 1.19, 1.16, 0.94, 0.88, 0.87, 0.81, 0.81, 0.79 (3H, s, CH3×9)；13C-NMR (125 MHz, CDCl3): 38.2 (C-1), 25.3 (C-2), 80.4 (C-3), 39.0 (C-4), 55.1 (C-5), 17.6 (C-6), 32.9 (C-7), 41.1 (C-8), 61.6(C-9), 37.0 (C-10), 199.8 (C-11), 130.5 (C-12), 165.1 (C-13), 45.3 (C-14), 23.8 (C-15), 25.3 (C-16), 34.1 (C-17), 59.0 (C-18), 39.4 (C-19), 39.4 (C-20), 31.0 (C-21), 41.1 (C-22), 27.6 (C-23), 16.7 (C-24), 18.7 (C-25), 16.9 (C-26), 20.7 (C-27), 28.2 (C-28), 17.6 (C-29), 21.3 (C-30), 173.8 (C-1′), 35.0 (C-2′), 32.1 (C-3′), 29.8 (C-4′), 29.8 (C-5′), 29.8 (C-6′), 29.7 (C-7′), 29.6 (C-8′), 29.5 (C-9′), 29.5 (C-10′), 29.4 (C-11′), 29.3 (C-12′), 29.0 (C-13′), 27.4 (C-14′), 22.8 (C-15′), 14.3 (C-16′)。以上数据与文献报道对照基本一致[11]，故鉴定化合物1为11-羰基-α-香树醇- 3β-棕榈酸酯。

化合物2：白色絮状晶体（石油醚-醋酸乙酯）。1H-NMR (500 MHz, CDCl3): 5.13 (1H, t,3.6 Hz, H-12), 4.50 (1H, m, H-3), 3.51 (1H, d,11.0 Hz, H-28b), 3.20 (1H, d,11.0 Hz, H-28a), 2.05 (3H, s, OCOCH3), 1.09, 0.99, 0.97, 0.93, 0.87, 0.86, 0.81 (各3H, s, 7×CH3)；13C-NMR (125 MHz, CDCl3):38.6 (C-1), 28.2 (C-2), 81.1 (C-3), 37.9 (C-4), 55.4 (C-5), 18.4 (C-6), 32.9 (C-7), 40.2 (C-8), 47.7 (C-9), 36.9 (C-10), 23.7 (C-11), 125.1 (C-12), 138.9 (C-13), 42.2 (C-14), 26.1 (C-15), 23.5 (C-16), 38.2 (C-17), 54.2 (C-18), 39.5 (C-19), 39.6 (C-20), 30.8 (C-21), 35.3 (C-22), 29.9 (C-23), 16.9 (C-24), 15.9 (C-25), 17.5 (C-26), 23.4 (C-27), 70.1 (C-28), 16.9 (C-29), 21.5 (C-30), 21.5 (OCOCH3), 171.2 (CO)。以上数据与文献报道基本一致[12]，故鉴定化合物2为3β-乙酰氧基-28-羟基-12-烯-乌苏烷。

化合物3：黄色油状物。ESI-MS/: 109 [M－H]−。1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 6.75 (2H, dd,5.9, 3.5 Hz, H-4, 5), 6.65 (2H, dd,5.8, 3.6 Hz, H-3, 6)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 146.3 (C-1, 2), 116.4 (C-3, 6), 120.9 (C-4, 5)。以上数据与文献报道基本一致[13]，故鉴定化合物3为儿茶酚。

化合物4：黄色油状物。ESI-MS/: 137 [M－H]−。1H-NMR (500 MHz, CDCl3): 6.71 (1H, d,= 7.9 Hz, H-6), 6.68 (1H, s, H-3), 6.51 (1H, d,= 7.3Hz, H-5), 2.47 (2H, q,= 7.6 Hz, H-7), 1.13 (3H, t,= 7.6 Hz, H-8)；13C-NMR (125 MHz, CDCl3):143.8 (C-1), 145.8 (C-2), 115.8 (C-3), 136.6 (C-4), 119.7 (C-5), 116.0 (C-6), 28.8 (C-7), 16.4 (C-8)。以上数据与文献报道基本一致[14-15]，故鉴定化合物4为4-乙基儿茶酚。

化合物5：白色无定形粉末。1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 6.10 (2H, s, H-3, 5), 3.77 (6H, s, 2, 6-OCH3), 3.67 (3H, s, 4-OCH3)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 132.0 (C-1), 93.9 (C-3, 5), 154.9 (C-2, 6), 155.6 (C-4), 61.3 (4-OCH3), 56.3 (2, 6-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[16]，故鉴定化合物5为2,4,6-三甲氧基苯酚。

化合物6：棕黄色无定形粉末。1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 6.53 (2H, s, H-2, 6), 4.00 (1H, s, H-8), 3.51 (1H, dd,11.1, 4.4 Hz, H-9b), 3.45 (1H, dd,11.1, 6.2 Hz, H-9a), 2.74 (1H, dd,13.8, 5.6 Hz, H-7b), 2.60 (1H, dd,13.7, 7.4 Hz, H-7a)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 130.7 (C-1), 107.6 (C-2, 6), 149.1 (C-3, 5), 135.0 (C-4), 41.0 (C-7), 74.6 (C-8), 66.5 (C-9)。以上数据与文献报道基本一致[17]，故鉴定化合物6为3-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)- 1,2-丙二醇。

化合物7：黄色油状物。1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 6.82 (1H, d,1.7 Hz, H-2′), 6.72 (1H, d,8.0 Hz, H-5′), 6.66 (1H, dd,8.0, 1.7 Hz, H-6′), 3.84 (3H, s, 3′-OCH3), 3.80 (1H, s, H-2), 3.51 (1H, dd,11.2, 4.3 Hz, H-1b), 3.44 (1H, dd,11.1, 6.2 Hz, H-1a), 2.73 (1H, dd,13.8, 5.8 Hz, H-3b), 2.61 (1H, dd,13.8, 7.4 Hz, H-3a)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD)131.5 (C-1′), 114.1 (C-2′), 148.8 (C-3′), 145.9 (C-4′), 116.1 (C-5′), 122.9 (C-6′), 66.5 (C-1), 74.7 (C-2), 40.5 (C-3), 56.3 (OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[18]，故鉴定化合物7为3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1,2-丙二醇。

化合物8：无色油状物。1H-NMR (400 MHz, CD3OD): 6.77 (1H, d,= 8.6 Hz, H-5), 6.46 (1H, d,= 2.7 Hz, H-2), 6.30 (1H, dd,= 8.6, 2.7 Hz, H-6), 3.78 (3H, s, 3-OCH3), 3.74 (3H, s, 4-OCH3)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD)153.4 (C-1), 101.9 (C-2), 151.5 (C-3), 143.7 (C-4), 115.1 (C-5), 107.2 (C-6), 57.6 (4-OCH3), 56.3 (3-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[19]，故鉴定化合物8为3,4-二甲氧基苯酚。

化合物9：棕黑色油状物。1H-NMR (400 MHz, CD3OD):6.66 (1H, d,8.0 Hz, H-5), 6.62 (1H, d,2.0 Hz, H-2), 6.50 (1H , dd,8.0, 2.0 Hz, H-6), 3.63 (3H, s, OCH3), 2.75 (2H, t,7.6 Hz, H-8), 2.55 (2H, t,7.6 Hz, H-7)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD): 133.5 (C-1), 116.3 (C-2), 144.6 (C-3), 146.2 (C-4), 116.4 (C-5), 120.5 (C-6), 31.4 (C-7), 37.0 (C-8), 175.4 (C-9), 52.0 (10-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[20]，故鉴定化合物9为3,4-二羟基苯丙酸甲酯。

化合物10：无色针晶（甲醇）。1H-NMR (400 MHz, DMSO-6): 11.82 (1H, s, COOH), 5.13 (1H, s, H-12 ), 4.78 (1H, s, Ara-H-1 ), 4.36 (1H, brs, H-23b ), 4.19 (1H, d,6.5 Hz, H-3), 3.60 (1H, brs, H-23a), 1.27, 1.04, 0.90, 0.89, 0.69, 0.59 (各3H, s, CH3×6)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-6): 38.0 (C-1), 25.2 (C-2), 79.9 (C-3), 42.4 (C-4), 46.5 (C-5), 17.3 (C-6), 32.2 (C-7), 39.2 (C-8), 45.9 (C-9), 36.0 (C-10), 23.1 (C-11), 126.0 (C-12), 138.2 (C-13), 41.2 (C-14), 28.0 (C-15), 25.8 (C-16), 46.7 (C-17), 46.1 (C-18), 72.3 (C-19), 41.4 (C-20), 23.9 (C-21), 31.3 (C-22), 62.7 (C-23), 13.0 (C-24), 15.6 (C-25), 16.7 (C-26), 23.6 (C-27), 179.0 (C-28), 28.9 (C-29), 15.6 (C-30), 104.8 (Ara-C-1), 71.1 (Ara-C-2), 72.7 (Ara-C-3), 67.6 (Ara-C-4), 65.0 (Ara-C-5)。以上数据与文献报道基本一致[21]，故鉴定化合物10为3β,19α,23-三羟基- 20α()-乌苏-12-烯-28-酸3β--α--吡喃阿拉伯糖。

化合物11：白色无定形粉末。1H-NMR (400 MHz, CD3OD): 7.11 (1H, d,1.7 Hz, H-2′), 7.04 (1H, d,= 1.7 Hz, H-2′′), 6.88 (2H, td,= 8.1, 1.8 Hz, H-6′, 6′′), 6.81 (1H, d,= 8.1 Hz, H-5′′), 6.73 (1H, d,8.1 Hz, H-5′), 4.70 (1H, s, H-2), 4.50 (1H, t,8.6 Hz, H-4a), 4.40 (1H, d,10.4 Hz, H-8a), 4.34 (1H, d,= 7.7 Hz, H-1′′′), 3.94 (1H, d,10.4 Hz, H-8b), 3.89 (3H, s, 3′-OCH3), 3.85 (3H, s, 3′′-OCH3), 3.81 (1H, dd,9.1, 5.9 Hz, H-4b), 3.69 (1H, dd,= 12.0, 2.2 Hz, H-6a′′′), 3.52 (1H, dd,12.0, 5.7 Hz, H-6b′′′), 3.41 (1H, m, H-5), 3.15 (2H, dd,6.8, 2.5 Hz, H-3′′′, 4′′′), 3.03 (1H, m, H-2′′′), 2.89 (1H, m, H-5′′′), 1.29 (1H, s, H-6)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD):99.2 (C-1), 90.0 (C-2), 72.2 (C-4), 60.3 (C-5), 86.8 (C-6), 73.2 (C-8), 128.5 (C-1′), 114.0 (C-2′), 148.4 (C-3′), 147.4 (C-4′), 115.2 (C-5′), 122.4 (C-6′), 133.1 (C-1′′), 110.7 (C-2′′), 149.3 (C-3′′), 147.5 (C-4′′), 116.3 (C-5′′), 119.9 (C-6′′), 100.1 (C-1′′′), 74.8 (C-2′′′), 78.3 (C-3′′′), 71.2 (C-4′′′), 78.0 (C-5′′′), 62.4 (C-6′′′), 56.6 (3′-OCH3), 56.5 (3′′-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[22]，故鉴定化合物11为(＋)-1-羟基松脂醇-1--β--葡萄糖苷。

化合物12：白色无定形粉末。HR-ESI-MS/:773.444 40 [M＋Na]+（C41H66O12Na，计算值773.769 58），推测其分子式为C41H66O12。1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 5.25 (1H, s, H-12), 5.10 (1H, d,1.3 Hz, Rha-H-1), 4.55 (1H, d,4.5 Hz, Ara-H-1), 3.12 (1H, dd,11.6, 4.2 Hz, H-3), 1.32 (3H, s, H-24), 1.23 (3H, d,6.2 Hz, Rha-H-6), 1.14 (3H, s, H-27), 1.02 (3H, s, H-23), 0.99 (3H, d,5.4 Hz, H-30), 0.96 (3H, s, H-25), 0.85 (3H, s, H-26), 0.81 (3H, d,10.3 Hz, H-29)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 39.9 (C-1), 27.0 (C-2), 90.7 (C-3), 40.3 (C-4), 57.1 (C-5), 17.1 (C-6), 33.0 (C-7), 43.3 (C-8), 49.6 (C-9), 37.9 (C-10), 24.7 (C-11), 128.4 (C-12), 139.8 (C-13), 42.6 (C-14), 29.7 (C-15), 28.7 (C-16), 49.9 (C-17), 54.8 (C-18), 74.4 (C-19), 41.0 (C-20), 29.7 (C-21), 34.3 (C-22), 24.5 (C-23), 17.7 (C-24), 16.0 (C-25), 16.3 (C-26), 25.4 (C-27), 27.4 (C-29), 19.5 (C-30), 104.8 (Ara-C-1), 76.8 (Ara-C-2), 73.1 (Ara-C-3), 68.4 (Ara-C-4), 63.7 (Ara-C-5), 102.0 (Rha-C-1), 72.2 (Rha-C-2), 72.2 (Rha-C-3), 73.9 (Rha-C-4), 70.2 (Rha-C-5), 18.0 (Rha-C-6)。以上数据与文献报道基本一致[23]，故鉴定化合物12为3β--[α--吡喃鼠李糖(1→2)-α--吡喃阿拉伯糖]-坡模酸。

化合物13：白色无定形粉末。ESI-MS/: 501 [M－H]−。1H-NMR (400 MHz, CD3OD):5.24 (1H, s, H-12 ), 3.98 (1H, m, H-3), 2.83 (1H, s, H-18), 1.01 (3H, d,= 7.2 Hz, H-30), 1.30, 1.15, 1.05, 0.93, 0.83 (各3H, s, 5×CH3)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD):39.8 (C-1), 27.6 (C-2), 77.2 (C-3), 56.7 (C-4), 52.4 (C-5), 22.3 (C-6), 33.2 (C-7), 41.2 (C-8), 43.4 (C-9), 37.6 (C-10), 24.7 (C-11), 128.0 (C-12), 140.4 (C-13), 42.7 (C-14), 30.0 (C-15), 25.5 (C-16), 49.3 (C-17), 52.4 (C-18), 74.8 (C-19), 42.7 (C-20), 27.5 (C-21), 37.6 (C-22), 180.8 (C-23), 12.8 (C-24), 16.2 (C-25), 17.9 (C-26), 24.7 (C-27), 180.8 (C-28), 29.8 (C-29), 16.4 (C-30)。以上数据与文献报道基本一致[24]，故鉴定化合物13为rotundioic acid。

利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突

[1] 舒任庚, 姚敏娜, 闵雷.不同植物来源苦丁茶的化学成分及药理作用研究进展 [J].江西中医学院学报, 2008, 20(6): 91-94.

[2] 方志先, 赵晖, 赵敬华.土家族药物志(上下册) [M].北京: 中国医药科技出版社, 2006.

[3] 林立东, 秦国伟, 徐任生.华中冬青化学成分的研究 [J].植物学报, 1994, 36(5): 393-397.

[4] 林立东, 秦国伟, 徐任生.华中冬青化学成分的研究II华中冬青醇和华中冬青素的结构 [J].化学学报, 1995, 53(1): 98.

[5] 林立东, 秦国伟, 徐任生.华中冬青化学成分的研究(III) [J].中草药, 1996, 27(2): 75.

[6] Li L, Zhang Y, Zhang P,.Appraisal of anti-inflammatory and free radical scavenging activities of ethanol extract ofHemsl andS.Y.Hu [J]., 2011, 32(2): 122-127.

[7] Li L J, Zhang Y, Zhang P,.Flavans from the leaf of[J]., 2011, 13(4): 367-372.

[8] Li L J, Zhang Y, Zhang P,.Two new 5, 8-quinoflavans from the leaf of[J]., 2011, 13(4): 341-345.

[9] Long H, Yan Q F, Hu Z H,.A new Para-quinone-type flavan from the leaves ofand its anti-inflammatory activities [J]., 2019, 21(1): 86-92.

[10] Long H, Chen Y, Hu Z H,.A pair of new diastereoisomeric phenylpropanoid-substituted flavan from the leaves of[J]., 2020, 34(19): 2703-2708.

[11] 欧阳明安, 汪汉卿, 苏军华, 等.苦丁茶冬青化学成分的结构研究 [J].天然产物研究与开发, 1997, 9(3): 19-23.

[12] 梁娟, 李胜华, 陈超群.川东獐牙菜的化学成分研究 [J].中草药, 2014, 45(7): 919-923.

[13] 卢丹, 刘金平, 赵轶卓, 等.穿龙薯蓣地上部分的化学成分(II) [J].中草药, 2010, 41(5): 700-703.

[14] Lang R, Mueller C, Hofmann T.Development of a stable isotope dilution analysis with liquid chromatography- tandem mass spectrometry detection for the quantitative analysis of di-and trihydroxybenzenes in foods and model systems [J]., 2006, 54(16): 5755-5762.

[15] 万仲贤, 吴建国, 吴飞, 等.白花鬼针草化学成分研究[J].世界中医药, 2020, 15(10): 1391-1394.

[16] 袁谱龙, 王雪萍, 陈凯先, 等.水茄茎化学成分的研究 [J].中成药, 2016, 38(1): 104-107.

[17] Zhu J X, Ren J, Qin J J,.Phenylpropanoids and lignanoids from[J]., 2012, 35(10): 1739-1747.

[18] Kikuzaki H, Hara S, Kawai Y,.Antioxidative phenylpropanoids from berries of[J]., 1999, 52(7): 1307-1312.

[19] 谢章巧, 丁林芬, 王德升, 等.山玉兰叶化学成分研究 [J].中草药, 2018, 49(21): 5040-5045.

[20] 孟令杰, 刘百联, 张英, 等.地骨皮化学成分研究 [J].中草药, 2014, 45(15): 2139-2142.

[21] Wang W L, Zhou X, Liu Y L,.Two new 20α()-ursane-type triterpenoids fromand their cytotoxic activities [J]., 2014, 16(2): 175-180.

[22] Kang H S, Chung H Y, Byun D S,.Further isolation of antioxidative (+)-1-hydroxypinoresinol-1--beta--glucoside from the rhizome ofthat Acts on peroxynitrite, total ROS and 1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical [J]., 2003, 26(1): 24-27.

[23] Baykal T.Two monodesmosidic triterpenoid saponins from[J]., 1999, 16: 1-6

[24] 王海龙, 吴立君, 雷雨, 等.岗莓叶的化学成分[J].沈阳药科大学学报, 2009, 26(4): 279-281.

Chemical constituents from roots of

LU Yan-xia1, YANG Hang1, SHI Yu1, LI Lu-jun1, 2, HU Ze-hua3, DENG Xue-ying1, YI Ying-tao1, SUN Ke-ke1

1.National & Local Joint Engineering Research Center of High-throughput Drug Screening technology, State Key Laboratory of Biocatalysis and Enzyme Engineering, Hubei Key Laboratory of Biotechnology of Chinese Traditional Medicine, Hubei University, Wuhan 430062, China 2.Gansu Herbal Medicine Planting Co., Ltd., Lanzhou 730102, China 3.Medical School, Hubei Minzu University, Enshi 445000, China

To investigate the chemical constituents from the roots of.The chemical constituents were isolated and purified by silica gel, Sephadex LH-20, ODS and semi-prepared high performance liquid chromatography and their structures were elucidated on the basis of NMR technique and physicochemical property.Thirteen compounds were obtained from the roots of, and named as 11-carbonyl-ɑ-amyrin-3β-palmitate (1), 3β-acetoxy-28-hydroxy-12-ene-urs (2), catechol (3), 4-ethyl catechol (4), 2,4,6-trimethoxyphenol (5), 3-(4-hydroxy-3,5- dimethoxyphenyl)propane-1,2-diol (6), 3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)propane-1,2-diol (7), 3,4-dimethoxyphenol (8), 3,4- dihydroxybenzenepropionic acid methyl ester (9), 3β,19α,23-trihydroxy-20α()-urs-12-en-28-oic acid 3β--α--arabinopyranoside (10), (+)-1-hydroxypinoresinol-1--β--glucoside (11), 3β--[α--rhamnopyranosyl(1→2)-α--arabinopyranosyl]-pomolic acid (12), rotundioic acid (13).All compounds were isolated fromfor the first time, and compounds 4—9 were isolated fromfor the first time.

S.Y.Hu; 11-carbonyl-α-amyrin-3β-palmitate; 3-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)propane-1,2-diol; (＋)-1-hydroxypinoresinol-1--β--glucoside

R284.1

A

0253 - 2670(2021)22 - 6790 - 06

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.22.003

2021-03-12

国家自然科学基金资助项目（81560703）；深圳市基础研究计划自由探索项目（JCYJ20170306171157738）；药物高通量筛选技术国家地方联合工程研究中心开放基金（M20181007，M20202003）；药学“荆楚卓越人才”协同育人计划大学生创新训练计划项目（M20191002）

路艳霞（1996—），女，硕士研究生，研究方向为天然产物活性成分研究。

通信作者：李路军（1974—），副教授。E-mail: lilujunhuda@163.com

[责任编辑 王文倩]