山橙茎中非生物碱类化学成分研究

李玉洁，李 娟，谢 澜，周俊宇，李秋璇，刘艳萍*，付艳辉*

山橙茎中非生物碱类化学成分研究

李玉洁1, 2, 3，李 娟2, 3，谢 澜2, 3，周俊宇2, 3，李秋璇2, 3，刘艳萍2, 3*，付艳辉1, 2, 3*

1. 福建中医药大学药学院，福建 福州 350122 2. 海南师范大学 南药资源产业化关键技术研究海南省工程研究中心，海南 海口 571158 3. 海南师范大学 热带药用资源化学教育部重点实验室，海南 海口 571158

研究夹竹桃科山橙属植物山橙茎中的非生物碱类化学成分。综合运用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及制备型高效液相色谱等色谱学方法进行系统分离和纯化，根据化合物的理化性质及其波谱学数据，并通过与文献中报道的波谱数据进行对照，鉴定化合物的化学结构。从山橙茎的90%乙醇提取物的石油醚萃取部位中分离得到了18个非生物碱类化合物，分别鉴定为lyoniresinol（1）、4--larreatricin（2）、curcasinlignan B（3）、pinnatifidanin C I（4）、-guaiacylglycerol- 8--4′-(coniferyl alcohol) ether（5）、cephafortin B（6）、vladinol D（7）、tripterygiol（8）、蔷薇酸（9）、30-醛基羽扇豆醇（10）、古柯二醇（11）、β-香树酯酮（12）、豆甾-7-烯-3β-醇（13）、豆甾-3,6-二酮（14）、α-波菜甾酮（15）、blumenol A（16）、4,5-dihydroblumenol（17）和去氢催吐萝芙木醇（18）。其中化合物1～8为木脂素类化合物，化合物9～12为三萜类化合物，化合物13～15为甾体类化合物，16～18为倍半萜类化合物。所有化合物均为首次从山橙属植物中分离得到。

山橙；木脂素；三萜；甾体；倍半萜；蔷薇酸；30-醛基羽扇豆醇；古柯二醇；β-香树酯酮；去氢催吐萝芙木醇

夹竹桃科（Apocynaceae）山橙属J. R. et G. Forst.植物全世界约有53种，集中分布于亚洲的热带、亚热带以及大洋洲地区。分布于我国的山橙属植物有11种，主要分布于华南、西南以及台湾等省区。山橙属植物大多为民间药用植物，在民间常用于治疗腹痛、消化不良、小儿疝气、小儿疳疾、小儿脑膜炎、睾丸炎、风湿性心脏病以及骨折等疾病[1-2]。现代植物化学研究表明山橙属植物中富含结构多样的单萜吲哚生物碱类化合物，现代药理学研究表明山橙属植物中分离得到单萜吲哚生物碱类化合物具有广泛的生物活性，包括抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗结核杆菌、舒张血管以及神经保护活性等多种生物活性[3-10]。山橙Champ. ex Benth.为夹竹桃科山橙属植物，主要分布于我国海南、广东和广西等地。山橙的果实具有行气、除湿、止痛、杀虫等功效，可用于治疗腹痛、消化不良、疝气、小儿疳积以及睾丸炎等[1-2]。山橙的茎和叶为海南黎族民间常用药，常用于肿瘤和炎症性疾病的治疗。目前有关山橙的研究主要集中在其所含的单萜吲哚生物碱类化学成分及其生物活性[8-10]，关于其所含的非生物碱类化学成分的研究报道较少[11-12]，为了进一步阐明山橙的药效物质基础，同时为了更合理地开发利用该植物资源，充分发挥其药用价值，本课题组对山橙茎的90%乙醇提取物中的非生物碱类化学成分进行了系统研究，从中分离得到了18个化合物，分别鉴定为lyoniresinol（1）、4--larreatricin（2）、curcasinlignan B（3）、pinnatifidanin C I（4）、-guaiacylglycerol-8--4′-(coniferyl alcohol) ether（5）、cephafortin B（6）、vladinol D（7）、tripterygiol（8）、蔷薇酸（euscaphic acid，9）、30-醛基羽扇豆醇（30-oxo-lupeol，10）、古柯二醇（erythrodiol，11）、β-香树酯酮（β- amyrenone，12）、豆甾-7-烯-3β-醇（stigmast-7-en- 3β-ol，13）、豆甾-3,6-二酮（stigmastan-3,6-dione，14）、α-波菜甾酮（α-spinasterone，15）、blumenol A（16）、4,5-dihydroblumenol（17）和去氢催吐萝芙木醇（dehydrovomifoliol，18）。其中化合物1～8为木脂素类化合物，化合物9～12为三萜类化合物，化合物13～15为甾体类化合物，16～18为倍半萜类化合物。所有化合物均为首次从山橙属植物中分离得到。

1 仪器与材料

Finnigan LCQ Advantange MAX 质谱仪，美国Thermo Fisher Scientific；Bruker AV-400型超导核磁共振仪，德国Bruker公司；中低压制备色谱，瑞士Buchi公司；Agilent1200分析型高效液相色谱仪，美国Agilent Technologies有限公司；Thermo Fisher UltiMate 3000制备型高效液相色谱仪，美国Thermo Fisher Scientific公司；Waters XBridge C18分析型色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）和Waters XBridge C18制备型色谱柱（250 mm×20 mm，5 μm），美国Waters公司；薄层硅胶GF254和柱色谱硅胶，青岛海洋化工厂；Sephadex LH-20凝胶，美国Amersham Blosclences公司；ODS色谱材料（C18，10～40 μm），德国Merck公司；YOKO-ZX紫外分析暗箱，武汉药科新技术开发有限公司；N-1001型旋转蒸发仪，日本EYELA公司；4001N型电子天平，上海民桥精密科技仪器有限公司；所用试剂均为西陇化工股份有限公司的色谱纯或者分析纯试剂。

山橙茎于2019年6月采集于海南省霸王岭国家森林公园，经海南师范大学南药资源产业化关键技术研究海南省工程研究中心付艳辉研究员鉴定为夹竹桃科山橙属植物山橙Champ. ex Benth.的茎，凭证标本（HNMESU20190618）保存于海南师范大学热带药用资源化学教育部重点实验室植物标本室。

2 提取与分离

将阴干的山橙茎14.9 kg粉碎后用90%乙醇室温浸泡提取3次，每次浸泡提取1周，合并提取液，减压浓缩得总浸膏1.56 kg。浸膏加蒸馏水混悬，依次用石油醚和醋酸乙酯进行萃取，减压浓缩后得石油醚萃取部位216.8 g和醋酸乙酯萃取部位486.3 g。石油醚萃取部位（215.0 g）经正相硅胶柱色谱分离，以石油醚-丙酮体系为洗脱剂进行梯度洗脱（95∶5～25∶75），得到7个流分Fr. 1～7。Fr. 2（38.6 g）经反相ODS柱色谱分离，以甲醇-水体系（65∶35～100∶0）为洗脱剂进行梯度洗脱，得到6个亚流分（Fr. 2A～2F）。Fr. 2B（3.7 g）经正相硅胶柱色谱进行分离，以石油醚-醋酸乙酯体系为洗脱剂进行梯度洗脱（95∶5～40∶60），再经制备型高效液相制备（乙腈-水75∶25）得到化合物1（12.3 mg）、2（62.3 mg）、8（42.8 mg）和13（67.5 mg）；Fr. 2C （5.3 g）经正相硅胶柱色谱进行分离，以石油醚-醋酸乙酯（80∶20～30∶70）为洗脱剂进行梯度洗脱，经Sephadex LH-20凝胶柱色谱纯化后，再经制备型高效液相色谱制备（甲醇-水82∶18）得到化合物3（6.7 mg）、7（21.5 mg）、11（23.6 mg）、12（9.2 mg）和18（15.6 mg）；Fr. 3（51.6 g）经反相ODS柱色谱分离，以甲醇-水体系（55∶45～100∶0）为洗脱剂进行梯度洗脱，得到7个亚流分（Fr. 3A～3G）；Fr. 3B（7.2 g）经正相硅胶柱色谱进行分离，以石油醚-醋酸乙酯（75∶25～30∶70）体系为洗脱剂进行梯度洗脱，经Sephadex LH-20凝胶柱色谱纯化后，再经制备型高效液相色谱制备[甲醇-水（68∶32）]得到化合物4（25.8 mg）、5（13.2 mg）、14（7.3 mg）和15（42.1 mg）；Fr. 3C（6.2 g）经硅胶柱色谱分离，以石油醚-丙酮（80∶20～40∶60）为洗脱剂进行梯度洗脱，经Sephadex LH-20凝胶柱色谱纯化后，再经制备型高效液相色谱制备[乙腈-水（58∶32）]得到化合物6（10.6 mg）、9（9.3 mg）、10（33.9 mg）、16（54.8 mg）和17（62.3 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：淡黄色油状物；C22H28O8，ESI-MS/: 421 [M＋H]+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3): 6.52 (1H, s, H-2′), 6.38 (2H, s, H-2, 6), 4.06 (1H, d,= 6.8 Hz, H-7), 3.91 (3H, s, 3′-OCH3), 3.80 (6H, s, 3, 5-OCH3), 3.76 (1H, m, H-9α), 3.72 (1H, m, H-9′α), 3.59 (1H, m, H-9′β), 3.52 (1H, dd,= 11.6, 6.8 Hz, H-9β), 3.29 (3H, s, 5′-OCH3), 2.58 (2H, m, H-7′) 1.88 (1H, m, H-8), 1.69 (1H, m, H-8′)；13C-NMR (100 MHz, CDCl3): 147.0 (C-3), 146.4 (C-3′), 145.7 (C-5′), 138.5 (C-1), 137.2 (C-4′), 133.1 (C-4), 128.9 (C-1′), 125.4 (C-6′), 105.9 (C-2′), 105.7 (C-6), 66.8 (C-9′), 64.0 (C-9), 59.7 (5′-OCH3), 56.6 (3, 5-OCH3), 55.9 (3′-OCH3), 49.6 (C-8), 43.1 (C-7), 40.3 (C-8′), 33.6 (C-7′)。以上波谱数据与文献中报道基本一致[13]，故鉴定化合物1为lyoniresinol。

化合物2：淡黄色油状物；C18H20O3，ESI-MS/: 285 [M＋H]+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3): 7.32 (4H, d,= 7.8 Hz, H-2, 6, 2′, 6′), 6.79 (4H, d,= 7.8 Hz, H-3, 5, 3′, 5′), 2.31 (2H, m, H-8, 8′), 4.48 (2H, d,= 7.8 Hz, H-7, 7′), 0.98 (6H, d,= 7.2 Hz, H-9, 9′)；13C-NMR (100 MHz, CDCl3): 155.3 (C-4, 4′), 134.6 (C-1, 1′), 127.9 (C-2, 6, 2′, 6′), 115.4 (C-3, 5, 3′, 5′), 87.6 (C-7, 7′), 44.8 (C-8, 8′), 13.1 (C-9, 9′)。以上波谱数据与文献中报道基本一致[14]，故鉴定化合物2为4--larreatricin。

化合物3：淡黄色油状物；C18H18O6，ESI-MS/: 331 [M＋H]+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3): 9.78 (1H, s, H-7′), 7.52 (1H, d,= 1.6 Hz, H-6′), 7.39 (1H, d,= 1.6 Hz, H-4′), 6.89 (3H, s, H-2, 4, 6), 5.58 (1H, d,= 7.3 Hz, H-7), 3.98 (2H, m, H-9), 3.87 (3H, s, 3′-OCH3), 3.76 (3H, s, 3-OCH3), 3.69 (1H, m, H-8)；13C-NMR (100 MHz, CDCl3): 191.8 (C-7′), 153.4 (C-4′), 147.8 (C-3), 146.9 (C-5), 144.4 (C-3′), 131.5 (C-1), 131.0 (C-1′), 127.6 (C-5′), 120.7 (C-6′), 118.9 (C-2), 115.5 (C-4), 112.6 (C-2′), 110.7 (C-6), 88.8 (C-7), 62.6 (C-9), 55.8 (3′-OCH3), 55.6 (3-OCH3), 51.9 (C-8)。以上数据与文献中报道基本一致[15]，故鉴定化合物3为curcasinlignan B。

化合物4：淡黄色油状物；C20H22O7，ESI-MS/: 375 [M＋H]+；1H-NMR (400 MHz, DMSO-6): 7.58 (1H, s, H-6′), 7.46 (1H, s, H-2′), 6.89 (1H, s, H-2), 6.78 (1H, s, H-4), 6.78 (1H, s, H-6), 5.61 (1H, d,= 7.0 Hz, H-7), 3.85 (3H, s, 3-OCH3), 3.81 (2H, t,= 7.0 Hz, H-9′), 3.76 (3H, s, 3′-OCH3), 3.69 (2H, m, H-9), 3.56 (1H, m, H-8), 3.10 (1H, t,= 7.0 Hz, H-8′)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-6): 197.2 (C-7′), 151.9 (C-4′), 147.7 (C-3), 146.8 (C-5), 143.5 (C-3′), 131.7 (C-1), 130.9 (C-5′), 129.8 (C-2′), 118.8 (C-6′), 118.4 (C-6), 115.5 (C-4), 112.0 (C-1′), 110.5 (C-2), 88.6 (C-7), 62.8 (C-9), 56.9 (C-9′), 55.8 (3-OCH3), 55.5 (3′-OCH3), 52.4 (C-8), 41.2 (C-8′)。以上波谱数据与文献报道基本一致[16]，故鉴定化合物4为pinnatifidanin C I。

化合物5：淡黄色油状物；C20H24O7，ESI-MS/: 377 [M＋H]+；1H-NMR (400 MHz, CD3OD): 7.12 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2′), 7.03 (1H, d,= 8.2 Hz, H-5′), 6.99 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2), 6.88 (1H, dd,= 8.2, 2.0 Hz, H-6′), 6.84 (1H, dd,= 8.2, 2.0 Hz, H-6), 6.77 (1H, d,= 8.2 Hz, H-5), 6.49 (1H, d,= 16.3 Hz, H-7′), 6.26 (1H, dt,= 16.3, 5.8 Hz, H-8′), 4.91 (1H, d,= 2.8 Hz, H-7), 4.32 (1H, m, H-8), 4.18 (2H, dd,= 5.8, 1.6 Hz, H-9′), 3.87 (3H, s, 3-OCH3), 3.79 (3H, s, 3′-OCH3), 3.72 (1H, dd,= 12.0, 3.8 Hz, H-9α), 3.47 (1H, dd,= 12.0, 5.8 Hz, H-9β)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD): 152.0 (C-3′), 149.3 (C-4′), 149.0 (C-3), 147.3 (C-4), 133.9 (C-1), 133.3 (C-1′), 131.5 (C-8′), 128.8 (C-7′), 120.9 (C-6′), 120.8 (C-6), 119.0 (C-5′), 116.1 (C-5), 111.9 (C-2), 111.4 (C-2′), 87.2 (C-8), 73.9 (C-7), 63.8 (C-9′), 62.1 (C-9), 56.8 (3-OCH3), 56.3 (3′-OCH3)。以上波谱数据与文献报道基本一致[17]，故鉴定化合物5为- guaiacylglycerol-8--4′-(coniferyl alcohol) ether。

化合物6：淡黄色油状物；C18H20O6，ESI-MS/: 333 [M＋H]+；1H-NMR (400 MHz, DMSO-6): 9.06 (1H, s, 4-OH), 6.90 (2H, s, H-2, 5), 6.76 (2H, s, H-6, 6′), 6.57 (1H, s, H-3′), 5.41 (1H, d,= 6.8 Hz, H-7), 5.06 (1H, s, 9-OH), 3.76 (3H, s, 3-OCH3), 3.72 (1H, m, H-9), 3.71 (3H, s, 1′-OCH3), 3.67 (3H, m, H-9), 3.66 (3H, s, 2′-OCH3), 3.60 (1H, m, H-8)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-6): 153.6 (C-4′), 149.7 (C-2′), 147.6 (C-3), 146.3 (C-4), 142.9 (C-1′), 133.0 (C-1), 118.5 (C-2), 118.1 (C-5′), 115.4 (C-5), 109.9 (C-6), 109.7 (C-6′), 94.9 (C-3′), 87.0 (C-7), 63.5 (C-9), 56.7 (1′-OCH3), 55.8 (2′-OCH3), 55.5 (3-OCH3), 52.9 (C-8)。以上波谱数据与文献报道基本一致[18]，故鉴定化合物6为cephafortin B。

化合物7：淡黄色油状物；C20H22O7，ESI-MS/: 375 [M＋H]+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3): 6.86 (1H, brs, H-2), 6.84 (1H, brs, H-2′), 6.81 (1H, overlapped, H-5), 6.80 (1H, overlapped, H-5′), 6.75 (1H, overlapped, H-6′), 6.73 (1H, overlapped, H-6), 4.49 (1H, d,= 7.6 Hz, H-7), 4.12 (1H, m, H-9′β), 4.07 (1H, m, H-7′), 4.02 (1H, m, H-9′α), 3.93 (3H, s, 3-OCH3), 3.90 (3H, s, 3′-OCH3) 3.29 (2H, m, H-9), 2.57 (1H, m, H-8′), 1.98 (1H, m, H-8)；13C-NMR (100 MHz, CDCl3): 199.1 (C-7), 151.4 (C-4), 147.4 (C-3), 147.2 (C-4′), 146.0 (C-3′), 132.9 (C-1′), 129.6 (C-1), 124.0 (C-6), 120.6 (C-6′), 114.4 (C-5′), 114.2 (C-5), 110.8 (C-2), 109.6 (C-2′), 84.3 (C-7′), 70.9 (C-9), 62.1 (C-9′), 56.2 (3-OCH3), 55.8 (3′-OCH3), 52.3 (C-8′), 50.0 (C-8)。以上波谱数据与文献报道基本一致[19]，故鉴定化合物7为vladinol D。

化合物8：淡黄色油状物；C22H28O8，ESI-MS/: 421 [M＋H]+；1H-NMR (400 MHz, DMSO-6): 6.53 (2H, brs, H-2′, 6′), 6.39 (2H, brs, H-2, 6), 4.67 (1H, d,= 6.0 Hz, H-7′), 3.91 (1H, t,= 7.3 Hz, H-9α), 3.73 (12H, s, 3, 3′, 5, 5′-OCH3), 3.68 (1H, m, H-9′α), 3.58 (1H, t,= 7.3 Hz, H-9′β), 3.51 (1H, m, H-9β), 2.79 (1H, dd,= 12.8, 4.8 Hz, H-7α), 2.60 (1H, m, H-8), 2.38 (1H, t,= 12.8 Hz, H-7β), 2.18 (1H, m, H-8′)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-6): 148.1 (C-3, 5), 147.9 (C-3′, 5′), 134.6 (C-4′), 133.9 (C-1′), 133.7 (C-4), 131.0 (C-1), 106.1 (C-2, 6), 103.3 (C-2′, 6′), 82.0 (C-7′), 71.9 (C-9), 56.0 (3, 3′, 5, 5′-OCH3), 58.8 (C-9′), 52.5 (C-8′), 42.1 (C-8), 32.8 (C-7)。以上波谱数据与文献报道基本一致[20]，故鉴定化合物8为tripterygiol。

化合物9：白色无定形粉末；C30H48O5，ESI-MS/: 489 [M＋H]+；1H-NMR (400 MHz, C5D5N): 5.21 (1H, t,= 2.8 Hz, H-12), 3.80 (1H, dt,= 11.2, 3.8 Hz, H-2β), 3.18 (1H, d,= 2.3 Hz, H-3β), 1.22 (3H, s, 27-CH3), 1.08 (3H, s, 29-CH3), 0.89 (3H, s, 23-CH3), 0.86 (3H, s, 26-CH3), 0.79 (3H, d,= 6.8 Hz, 30-CH3), 0.68 (3H, s, 25-CH3), 0.58 (3H, s, 24-CH3)；13C-NMR (100 MHz, C5D5N): 182.8 (C-28), 140.5 (C-13), 130.0 (C-12), 80.1 (C-3), 73.9 (C-19), 67.3 (C-2), 55.4 (C-18), 50.0 (C-5), 49.1 (C-17), 48.3 (C-9), 43.2 (C-20), 43.0 (C-1), 42.8 (C-14), 41.6 (C-8), 39.7 (C-22), 39.5 (C-10), 38.0 (C-4), 34.5 (C-7), 30.0 (C-15), 29.5 (C-23), 27.8 (C-21), 27.4 (C-29), 26.9 (C-16), 25.2 (C-27), 25.0 (C-11), 22.9 (C-24), 20.0 (C-6), 17.9 (C-26), 17.2 (C-30), 16.8 (C-25)。以上波谱数据与文献报道基本一致[21]，故鉴定化合物9为蔷薇酸。

化合物10：白色无定形粉末；C30H48O2，ESI-MS/: 441 [M＋H]+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3): 9.48 (1H, brs, H-30), 6.19 (1H, brs, H-29α), 5.88 (1H, brs, H-29β), 3.21 (1H, dd,= 11.2, 4.8 Hz, H-3), 1.00, 0.95, 0.90, 0.81, 0.77, 0.69 (3H×6, s, CH3×6)；13C-NMR (100 MHz, CDCl3): 195.1 (C-30), 156.9 (C-20), 133.0 (C-29), 78.9 (C-3), 54.8 (C-5), 51.2 (C-18), 50.1 (C-9), 42.9 (C-17), 42.7 (C-14), 40.8 (C-8), 40.0 (C-22), 39.2 (C-4), 38.9 (C-1), 37.9 (C-13), 37.0 (C-10), 36.6 (C-19), 35.4 (C-16), 34.3 (C-7), 32.9 (C-21), 28.0 (C-23), 27.8 (C-12), 27.4 (C-15), 27.3 (C-2), 21.0 (C-11), 18.8 (C-6), 17.9 (C-28), 16.0 (C-25), 15.6 (C-26), 15.1 (C-24), 13.9 (C-27)。以上波谱数据与文献报道基本一致[22]，故鉴定化合物10为30-醛基羽扇豆醇。

化合物11：白色无定形粉末；C30H50O2，ESI-MS/: 443 [M＋H]+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3): 5.19 (1H, t,= 3.9 Hz, H-12), 3.51 (1H, d,= 10.8 Hz, H-18α), 3.19 (1H, m, H-3), 3.15 (1H, d,= 10.8 Hz, H-18β), 1.19, 0.99, 0.95, 0.92, 0.88, 0.85, 0.77 (3H×7, s, CH3×7)；13C-NMR (100 MHz, CDCl3): 143.9 (C-13), 122.0 (C-12), 78.9 (C-3), 70.1 (C-28), 54.8 (C-5), 47.4 (C-17), 47.1 (C-9), 46.6 (C-19), 42.3 (C-18), 41.8 (C-14), 40.2 (C-8), 38.9 (C-4), 38.5 (C-1), 37.0 (C-10), 33.9 (C-21), 32.9 (C-29), 32.5 (C-7), 31.0 (C-22), 30.8 (C-20), 27.9 (C-23), 27.2 (C-2), 26.0 (C-27), 25.2 (C-15), 24.0 (C-11), 23.5 (C-30), 21.9 (C-16), 18.2 (C-6), 17.0 (C-26), 15.8 (C-24), 15.4 (C-25)。以上波谱数据与文献报道基本一致[23]，故鉴定化合物11为古柯二醇。

化合物12：白色无定形粉末；C30H48O，ESI-MS/: 425 [M＋H]+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3): 5.38 (1H, t,= 3.9 Hz, H-12), 1.19, 1.11, 1.09, 1.03, 0.99, 0.96, 0.90, 0.85 (3H×8, s, CH3×8)；13C-NMR (100 MHz, CDCl3): 217.9 (C-3), 145.8 (C-13), 122.0 (C-12), 56.2 (C-5), 48.0 (C-4), 47.5 (C-18), 46.9 (C-9), 46.7 (C-19), 42.0 (C-14), 39.9 (C-8), 39.1 (C-1), 37.4 (C-22), 37.0 (C-10), 34.5 (C-21), 34.1 (C-2), 33.8 (C-29), 32.7 (C-17), 32.3 (C-7), 31.0 (C-20), 29.2 (C-28), 26.9 (C-16 ), 26.6 (C-23), 26.4 (C-15), 26.0 (C-27), 24.1 (C-11), 23.9 (C-30), 21.6 (C-24), 20.2 (C-6), 17.7 (C-26), 15.8 (C-25)。以上波谱数据与文献报道基本一致[24]，故鉴定化合物12为β-香树酯酮。

化合物13：白色无定形粉末；C29H50O，ESI-MS/: 415 [M＋H]+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3): 5.18 (1H, m, H-7), 3.59 (1H, m, H-3), 1.00 (3H, d,= 7.2 Hz, H-21), 0.88 (3H, t,= 7.2 Hz, H-29), 0.83 (3H, d,= 7.2 Hz, H-26), 0.79 (3H, d,= 7.2 Hz, H-27), 0.76 (3H, s, H-19), 0.58 (3H, s, H-18)；13C-NMR (100 MHz, CDCl3): 139.9 (C-8), 117.6 (C-7), 70.9 (C-3), 55.9 (C-17), 55.0 (C-14), 50.0 (C-9), 46.1 (C-24), 43.3 (C-13), 40.7 (C-5), 40.0 (C-12), 37.9 (C-4), 37.1 (C-1), 36.8 (C-20), 35.0 (C-10), 33.9 (C-22), 31.4 (C-2), 30.1 (C-6), 28.9 (C-25), 28.0 (C-16), 25.9 (C-23), 23.0 (C-15), 22.8 (C-28), 21.6 (C-11), 20.0 (C-27), 18.9 (C-26), 18.3 (C-21), 12.4 (C-19), 12.1 (C-29), 11.6 (C-18)。以上波谱数据与文献报道基本一致[25]，故鉴定化合物13为豆甾-7-烯-3β-醇。

化合物14：白色无定形粉末；C29H48O2，ESI-MS/: 429 [M＋H]+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3):1.02 (3H, s, H-19), 0.89 (3H, d,= 6.6 Hz, H-21), 0.80～0.84 (3H×3, m, H-26, 27, 29), 0.68 (3H, s, H-18)；13C-NMR (100 MHz, CDCl3): 210.9 (C-3), 208.8 (C-6), 57.0 (C-5), 56.1 (C-17), 56.0 (C-14), 53.2 (C-9), 46.0 (C-7), 45.2 (C-24), 43.2 (C-13), 41.1 (C-10), 38.9 (C-2), 38.2 (C-12), 38.0 (C-1), 37.0 (C-8), 35.8 (C-20), 35.1 (C-4), 33.3 (C-22), 29.3 (C-25), 27.9 (C-16), 26.1 (C-23), 24.2 (C-15), 23.2 (C-28), 21.5 (C-11), 19.9 (C-26), 19.2 (C-27), 18.7 (C-21), 12.4 (C-18), 11.9 (C-19), 11.7 (C-29)。以上波谱数据与文献报道基本一致[26]，故鉴定化合物14为豆甾-3,6-二酮。

化合物15：白色无定形粉末；C29H46O，ESI-MS/: 411 [M＋H]+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3):: 5.17 (1H, brs, H-7), 5.18 (1H, dd,= 15.2, 8.2 Hz, H-22), 5.02 (1H, dd,= 15.2, 8.2 Hz, H-23), 1.06 (3H, d,= 7.0 Hz, H-21), 1.02 (3H, s, H-19), 0.91 (3H, d,= 7.0 Hz, H-27), 0.85 (3H, d,= 7.0 Hz, H-26), 0.81 (3H, t,= 7.0 Hz, H-29), 0.60 (3H, s, H-18)；13C-NMR (100 MHz, CDCl3): 212.0 (C-3), 140.3 (C-8), 138.3 (C-22), 130.4 (C-23), 117.0 (C-7), 56.0 (C-17), 55.1 (C-14), 51.1 (C-24), 49.0 (C-9), 44.4 (C-4), 43.3 (C-13), 42.7 (C-5), 40.8 (C-20), 39.9 (C-12), 39.0 (C-1), 37.9 (C-2), 34.4 (C-10), 32.0 (C-25), 30.0 (C-6), 28.9 (C-16), 25.5 (C-28), 22.9 (C-15), 21.8 (C-11), 21.6 (C-27), 21.4 (C-21), 20.2 (C-26), 12.9 (C-19), 12.3 (C-29), 11.9 (C-18)。以上波谱数据与文献报道基本一致[27]，故鉴定化合物15为α-波菜甾酮。

化合物16：无色油状物；C13H20O3，ESI-MS/: 225 [M＋H]+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3): 5.92 (1H, s, H-4), 5.81 (1H, d,= 15.8, 6.0 Hz, H-8), 5.69 (1H, d,= 15.8 Hz, H-7), 4.37 (1H, m, H-9), 2.41 (1H, d,= 17.2 Hz, H-2α), 2.14 (1H, d,= 17.2 Hz, H-2β), 1.88 (3H, d,= 1.2 Hz, H-13), 1.25 (3H, d,= 7.0 Hz, H-10), 0.99 (3H, s, H-12), 0.95 (3H, s, H-11)；13C-NMR (100 MHz, CDCl3): 199.0 (C-3), 164.1 (C-5), 135.9 (C-8), 128.8 (C-7), 127.0 (C-4), 79.2 (C-6), 67.9 (C-9), 49.9 (C-2), 41.4 (C-1), 24.2 (C-10), 23.9 (C-12), 22.9 (C-11), 19.3 (C-13)。以上波谱数据与文献报道基本一致[28]，故鉴定化合物16为blumenol A。

化合物17：无色油状物；C13H22O3，ESI-MS/: 227 [M＋H]+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3): 5.81 (1H, dd,= 16.0, 6.0 Hz, H-8), 5.72 (1H, d,= 16.0 Hz, H-7), 4.39 (1H, m, H-9), 2.79 (1H, d,= 14.2 Hz, H-2α), 2.41 (1H, d,= 12.8 Hz, H-4α), 2.25 (1H, m, H-5), 2.18 (1H, d,= 12.8 Hz, H-4β), 1.87 (1H, d,= 14.2 Hz, H-2β), 1.29 (3H, d,= 6.8 Hz, H-10), 1.00 (3H, s, H-12), 0.97 (3H, s, H-11), 0.90 (3H, d,= 6.8 Hz, H-13)；13C-NMR (100 MHz, CDCl3): 211.2 (C-3), 135.2 (C-8), 131.9 (C-7), 77.2 (C-6), 68.4 (C-9), 51.7 (C-2), 45.4 (C-4), 42.8 (C-1), 36.6 (C-5), 24.9 (C-12), 24.6 (C-11), 23.9 (C-10), 15.8 (C-13)。以上波谱数据与文献报道基本一致[29]，故鉴定化合物17为4,5-dihydroblumenol A。

化合物18：无色油状物；C13H18O3，ESI-MS/: 223 [M＋H]+；1H-NMR (400 MHz, DMSO-d): 7.01 (1H, d,= 16.3 Hz, H-7), 6.28 (1H, d,= 16.3 Hz, H-8), 5.91 (1H, s, H-4), 2.66 (1H, d,=17.2 Hz, H-2α), 2.28 (3H, s, H-10), 2.21 (1H, d,= 17.2 Hz, H-2β), 1.79 (3H, s, H-11), 1.01 (3H, s, H-12), 0.93 (3H, s, H-13)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d): 197.9 (C-3), 197.0 (C-9), 161.7 (C-5), 146.9 (C-7), 130.3 (C-8), 126.6 (C-4), 77.9 (C-6), 49.3 (C-2), 40.9 (C-1), 27.3 (C-10), 23.9 (C-12), 22.9 (C-13), 18.3 (C-11)。以上波谱数据与文献报道基本一致[30]，故鉴定化合物18为催吐萝芙木醇。

4 讨论

本研究综合运用多种现代色谱分离技术和波谱鉴定方法对夹竹桃科山橙属植物山橙茎的90%乙醇提取物中的非生物碱类化学成分进行了系统研究，从中分离鉴定了18个化合物，包括8个木脂素类化合物，4个三萜类化合物，3个甾体类化合物以及3个倍半萜类化合物，所有化合物均为首次从山橙属植物中分离得到。本研究丰富了山橙作为民间药用植物的药效物质基础，同时可为山橙这种民间药用植物资源的合理开发与利用提供重要科学依据。

利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突

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Non-alkaloid constituents from stems of

LI Yu-jie1, 2, 3, LI Juan2, 3, XIE Lan2, 3, ZHOU Jun-yu2, 3, LI Qiu-xuan2, 3, LIU Yan-ping2, 3, FU Yan-hui1, 2, 3

1. School of Pharmacy, Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou 350122, China 2. Engineering Research Center for Industrialization of Southern Medicinal Plants Resources of Hainan Province, Hainan Normal University, Haikou 571158, China 3. Key Laboratory of Tropical Medicinal Resource Chemistry of Ministry of Education, Hainan Normal University, Haikou 571158, China

To study the non-alkaloid constituents from the stems of Shancheng ().The non-alkaloid constituents from the stems ofwere separated and purified by silica gel, ODS, Sephadex LH-20 gel column chromatographies and preparative HPLC. Their structures were identified by physicochemical properties, spectroscopic analysis, as well as the comparisons with the data reported in literature.A total of 18 compounds were isolated from the petroleum ether extract of the 90% ethanol extract of the stems of, which were identified as lyoniresinol (1), 4--larreatricin (2), curcasinlignan B (3), pinnatifidanin C I (4),-guaiacylglycerol-8--4′-(coniferyl alcohol) ether (5), cephafortin B (6), vladinol D (7), tripterygiol (8), euscaphic acid (9), 30-oxo-lupeol (10), erythrodiol (11), β-amyrenone (12), stigmast-7-en-3β-ol (13), stigmastan-3, 6-dione (14), α-spinasterone (15), blumenol A (16), 4, 5-dihydroblumenol (17) and dehydrovomifoliol (18). Among these isolated compounds, compounds 18 are lignans, compounds 9—12 are triterpenoids, compounds 13—15 are steroids, and 16—18 are sesquiterpenes.All compounds are isolated from the genusfor the first time.

Champ. ex Benth.; lignans; triterpenes; steroids; sesquiterpenes;30-oxo-lupeol; erythrodiol;β-amyrenone; dehydrovomifoliol

R284.1

A

0253 - 2670(2021)07 - 1884 - 07

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.07.004

2020-12-27

国家自然科学基金资助项目（21662011）；国家级大学生创新创业训练计划项目（202011658003，202011658012）；海南省级大学生创新创业训练计划项目（S202011658009，S202011658029）；海口市重点研发计划项目（2020054）

李玉洁，女，在读硕士，主要从事活性天然产物的发现与应用研究工作。E-mail: 1847225741@163.com

刘艳萍，研究员，主要从事天然活性物质的发现及其作用机制研究工作。E-mail: liuyanpinghs@163.com

付艳辉，研究员，博士生导师，主要从事天然活性物质的发现与应用研究工作。E-mail: fuyanhui80@163.com

[责任编辑 王文倩]