1,6-二磷酸果糖三钠盐提高小鼠缺氧耐受力的试验研究

杜显龙 刘 振

1，6-二磷酸果糖三钠盐，简称FDP，别名1，6-二磷酸果糖，为一种重要的细胞内代谢产物，能直接调节很多代谢途径，尤其对于能量代谢和某些酶活性可发挥重要的调节作用[1]。FDP是细胞内天然存在的一种化合物，是细胞在糖酵解途径中产生的一个重要中间产物，在细胞中通过调节糖代谢中若干酶的活性产生药理作用。FDP为缺氧的组织细胞提供了能量来源，可保护心肌细胞、血管内皮细胞、肝细胞、肾脏、大脑、肺和小肠等免受缺氧的损害，还可以有效地防止某些化学物质和药物引起的心肌和其他组织器官的中毒[2]。本试验以小鼠为研究对象，研究1,6-二磷酸果糖三钠盐对正常小鼠提高缺氧耐受力的影响。根据《保健食品检验与评价技术规范》[3]，对1,6-二磷酸果糖三钠盐进行提高缺氧耐受力功能的动物实验。

1.材料与方法

1.1 样品 1，6-二磷酸果糖三钠盐由某公司提供。人体推荐量为1.0g/(人·日)。

1.2 动物 选用清洁级BALB/c健康雌性小鼠120只，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，实验动物生产许可证号：SCXK(沪)2017—0005。合格证编号：20170005029513。体重19.0～21.9g。

1.3 实验环境条件 试验动物在温度为20～26℃、相对湿度为40%～70%的本中心屏障环境中饲养。

1.4 仪器与试剂 T1000型电子天平、JA-2003型电子天平、250ml磨口瓶、秒表、凡士林、钠石灰、亚硝酸钠。

1.5 方法

1.5.1 剂量设定:根据1，6-二磷酸果糖三钠盐每人每日推荐摄入量为1.0g(按60kg体重计)，设低、中、高三个剂量组即83mg/(kg·bw·d)、167mg/(kg·bw·d)、500mg/(kg·bw·d)，分别相当于人体推荐摄入量5倍、10倍、30倍，另设0mg/(kg·bw·d)对照组以无菌水代替受试物。受试样品用无菌水配制，低、中、高剂量配制浓度分别为8.3mg/ml、16.7mg/ml、50.0mg/ml，按0.1ml/(10g·bw)灌胃。经口每日1次给予小鼠相应浓度的受试样品，连续灌胃1个月后测各项指标。

1.5.2 常压耐缺氧实验:参考《保健食品检验与评价技术规范》。

1.5.3 急性脑缺血性缺氧实验：参考《保健食品检验与评价技术规范》。

1.5.4 亚硝酸钠中毒存活实验：参考《保健食品检验与评价技术规范》。

1.5.5 统计学方法：用SPSS 22.0软件对各实验原始数据进行方差齐性检验，满足方差齐要求的数据资料用单因素方差分析方法中多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理；对非正态分布或方差不齐的数据资料用秩和检验进行统计处理。

2.结果

2.1 1，6-二磷酸果糖三钠盐对小鼠体重的影响 由表1可见，小鼠的初始体重83mg/(kg·bw·d)、167mg/(kg·bw·d)、500mg/(kg·bw·d)组与0mg/(kg·bw·d)组比较，差异无统计学意义，表明小鼠的初始体重在各组间较为均衡。经口给予小鼠不同剂量的1，6-二磷酸果糖三钠盐1个月后，各剂量组体重比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 1，6-二磷酸果糖三钠盐对小鼠体重的影响

2.2 1，6-二磷酸果糖三钠盐对小鼠常压耐缺氧存活时间的影响 由表2可见，小鼠常压耐缺氧实验中500mg/(kg·bw·d)组存活时间长于0mg/(kg·bw·d)组，差异有统计学意义(P<0.05)。

表2 1，6-二磷酸果糖三钠盐对小鼠常压耐缺氧存活时间的影响

2.3 1，6-二磷酸果糖三钠盐对小鼠急性脑缺血性缺氧喘气时间的影响 由表3可见，小鼠急性脑缺血性缺氧实验中500mg/(kg·bw·d)组喘气时间长于0mg/(kg·bw·d)组，差异有统计学意义(P<0.05)。

表3 1，6-二磷酸果糖三钠盐对小鼠急性脑缺血性缺氧喘气时间的影响

2.4 1，6-二磷酸果糖三钠盐对小鼠亚硝酸钠中毒存活时间的影响 由表4可见，小鼠亚硝酸钠中毒存活实验中83mg/(kg·bw·d)、167mg/(kg·bw·d)、500mg/(kg·bw·d)组小鼠亚硝酸钠中毒存活时间与0mg/(kg·bw·d)组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

表4 1，6-二磷酸果糖三钠盐对小鼠亚硝酸钠中毒存活时间的影响

3.小结

3.1 小鼠常压耐缺氧实验 500mg/(kg·bw·d)组存活时间长于0mg/(kg·bw·d)组，差异有统计学意义(P<0.05)，此项为阳性。

3.2 小鼠急性脑缺血性缺氧实验 500mg/(kg·bw·d)组小鼠急性脑缺血性缺氧喘气时间长于0mg/(kg·bw·d)组，差异有统计学意义(P<0.05)。此项为阳性。

3.3 小鼠亚硝酸钠中毒存活实验 83mg/(kg·bw·d)、167mg/(kg·bw·d)、500mg/(kg·bw·d)组小鼠亚硝酸钠中毒存活时间与0mg/(kg·bw·d)组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。此项为阴性。

根据《保健食品检验与评价技术规范》关于提高缺氧耐受力功能试验的结果判定，在本实验条件下1，6-二磷酸果糖三钠盐具有提高缺氧耐受力功能的作用。

4.讨论

FDP是现代医学广泛利用的营养添加剂，体外补充FDP能显著调节人体生理活动过程，改善体内细胞代谢功能，因而在国内外临床上越来越广泛地应用于心脑血管病、糖尿病、肝功能衰竭、烧伤、休克等疾病的急救治疗和预防[4]。

沈勇伟[5]对1，6-二磷酸果糖对提高小鼠运动耐力的研究，结果表明补充FDP可延长小白鼠的游泳时间，增强SDH活性，增加红细胞运氧能力，提高血糖浓度，从而有效提高运动耐力。张春丽[6]在新生儿缺氧缺血性脑病治疗进展中指出，糖碳水化合物是人体的主要能量来源，糖在分解供能过程中先要磷酸化，逐步变为1,6-二磷酸果糖，在缺氧时生成乳酸，在氧供给充足时生成二氧化碳和水，补充1,6-二磷酸果糖治疗新生儿缺氧缺血性脑病有一定的疗效。谢红[7]在1，6-二磷酸果糖对中重度新生儿缺血缺氧性脑病的临床早期干预研究中指出新生儿缺血缺氧性脑病早期加用FDP可获得较常规治疗更好的治疗效果。

近年来研究显示外源性FDP可跨越生物膜(包括血脑屏障)，促进缺血缺氧细胞的代谢及功能恢复。静脉滴注FDP在发挥直接保护新生儿缺血缺氧性脑病(HIE)患儿脑组织的同时，还能改善HIE患儿心肌细胞的代谢，增加心肌收缩力，改善脑组织的血流灌注[8,9]。