影响动物疫病实验室检测结果准确性的因素探究

2021-03-28 04:19:14杨柏李金庆
质量安全与检验检测 2021年6期
关键词:移液试剂试剂盒

杨柏 李金庆

(烟台海关技术中心 山东烟台 264000)

1 动物疫病实验室检测概述

动物疫病的实验室检测是动物疫病检测机构依据国家所制定动物防疫的规定以及标准,严格遵循国家所制定相关的法律法规和检验流程与检验标准等,对动物活体及其制品开展的检测活动。在国内对动物疫病的检测中,实验室检测是重要手段,检测人员需要重点关注幼年动物体内的抗体水平及变化情况。同时,需要对养殖环境内部的疫病进行监测,并对动物流行病实施研究和分析。另外,还需要对疫病未来发展的趋势进行预测,若养殖场受到某种病原的侵袭,则检测人员就需要对动物开展血清或PCR检测工作,将检测结果和养殖场动物疫病的实际发生情况、养殖场对动物用药的情况等进行综合分析,并制定科学的检测报告,为养殖企业提供科学建议[1]。

2 影响动物疫病实验室检测结果准确性的因素

2.1 人为影响

在对动物疫病开展实验室检测的过程中,检测人员的专业水平、工作态度和综合素养等,都会对检测结果产生较大影响。例如,部分检测人员在开展血凝抑制试验或酶联免疫吸附试验期间,存在操作失误、实验步骤不完善等情况,就会影响检测结果的准确性。

2.2 仪器设备

在对动物疫病开展实验室的检测期间,需要使用到很多类型仪器和设备,且这些仪器和设备也存在型号、参数与精密度等性能的不同,而它们的性能参数对检测结果的准确性有着直接的影响。如在实验室的检测中往往会用到离心机,其根据用途还可以分作低、中、高速等类型,若对仪器设备的选择中没有结合实际所需合理选用,就可能会导致误差的出现,且同样的离心机也可能会因为性能障碍或者维护的不当,而造成偏差值的出现,影响实验室的检测结果。

2.3 实验样本

在对动物开展实验室检测的过程中,需要使用动物样品组织、分泌物或血样等样本。对动物开展血清学实验期间,血清溶血的程度会直接影响到检测结果。在畜禽动物受到细菌或病毒感染后,势必会对动物的不同靶器官造成影响,因为其遭受不同病原微生物的感染,即便样本是从同一动物体内取出,也会呈现出差异性的检测结果。如若动物由于细菌或者病毒而导致其出现呼吸道疾病,此时病原菌在其气管或者肺脏内集中;若动物因为细菌或者病毒导致消化道疾病出现,此时其病原菌则在肠道或者粪便内集中。因此,在取样期间,若没有对动物的不同发病部位情况进行详细了解,会影响到检测结果的准确性[2]。

2.4 实验试剂

在实验室检测中,试剂的使用十分频繁,不同试剂在敏感性和稳定性等方面存在一定差异,即便是同一类试剂,由于生产批次不同,其效果也可能会有差异。同时,如果在对标准溶液等试剂的存放过程中没有做到严格规范,或没有在有效期内及时使用,都会导致其出现失效的情况,从而对检测结果产生影响。另外,在检测期间,如果室内的温度条件发生变化,也可能会使试剂的参数条件出现变化,使检测结果出现误差。

2.5 检测方法

在对动物疫病开展实验室的检测中,同一项目可能存在多种检测方法,而这些不同方法的检测结果可能存在差异性。在开展检测中,应当根据实际的检测需求,合理选择检测方法,如果控制得不够严格,将会影响检测结果的准确性。

2.6 实验环境

环境因素对于动物疫病实验室检测结果的影响主要体现在温度、湿度及实验环境清洁情况等。例如,在进行酶联免疫吸附试验过程中,对于实验室温度有一定要求,如果温度不达标,会影响检测试剂及样品的发挥,减缓反应速度,最终对实验室检测结果造成影响。如果实验室环境遭受污染,也会影响到检测结果的准确性[3]。

3 动物疫病实验室检测结果准确性影响因素的控制

3.1 对实验人员加强培训

在对动物疫病开展实验室的检测中,为避免人为因素对检测结果造成影响,需要加强对实验人员的培训。应当做好培训制度的制定,对实验检测人员定期开展知识、技能和职业培训活动,帮助检测人员掌握各项操作要领和规范,保持良好的工作责任心与工作态度。同时,为切实确保对检测人员的培训能够取得良好的效果,还需要将培训工作与考核工作相结合,对检测人员的知识、技能和责任意识等实施全面的监督与评价,促进检测人员综合素养的全面提升,为实验室的准确检测奠定基础,全方位地实现实验室检测水平的提升。

3.2 对实验室的检测流程严格规范

在对动物疫病开展实验室检测的过程中,一定要做好对检测流程的规范和检测标准的明确,确保检测流程的规范性,并做好对器材设备的性能检查和维护工作。同时,要做好实验方法的合理选择,避免实验方法的不合理或不规范影响到检测结果[4]。另外,还需要对实验中产生的废料、废液等进行及时处理,避免对实验过程产生影响。

3.3 加大对实验室内硬件设施的建设

为确保实验室的检测工作能够有序和有效的开展,需要有良好的实验硬件条件作为支撑,需要加大实验室硬件设施的建设,根据实验室的具体情况做好对实验室的科学规划,积极引进先进的硬件设备和技术,明确实验室人员的职能,实现精细化分工,确保实验室的检测工作能够高质高效完成。

3.4 做好实验样本良好处理

为避免实验样本对检测结果造成影响,需要做好实验样本的处理工作,在对实验样本进行采样时,一定要严格依据要求,规范开展采样工作,准确采样、科学储存,为实验室的检测奠定良好基础[5]。

3.5 对实验试剂正确选用

做好对实验试剂合理选择,是保证实验结果准确性的必要条件。在对实验试剂选择中,要与检测项目的需求相结合,对实验试剂进行合理选择和有效验证,避免因为试剂原因而导致检测结果出现误差。

3.6 对实验环境严格控制

在对动物疫病开展实验室检测的过程中,需要做好对温度、湿度等环境条件的控制,保证最佳的检测条件,同时还需要做好对仪器、设备的清洁工作,避免卫生条件不达标而影响检测结果。

4 污染处理措施

4.1 轻度污染处理措施

对于离心机转子、八联管板、PCR板,可通过50%的84消毒液进行30 min的浸泡,注意进行多次重复。对于操作台面,可先通过酒精进行擦拭,之后用30%的84消毒液进行多次重复擦拭。每次实验前后,都要运用酒精擦拭离心机、移液枪和操作台面。在实验室管理中,每天要通过30%的84消毒水对地面进行1~2次的擦拭。要对实验室做好通风管理,并适当运用紫外线灯照射方式处理污染。运用上述方法,通常情况下7 d即可基本消除污染。

4.2 中度、重度污染处理措施

一方面,要对污染源头进行有效评估,重点是评估试剂盒污染、环境污染以及器材污染,特别是离心机与移液枪。首先,要准备一组新的试剂盒、耗材、离心机、移液枪。其次,要在新的环境下使用原来的试剂和新的移液枪配2个阴性对照,而后上机扩增,若未发生污染,则代表试剂盒未出现污染问题;若发生污染,则代表试剂盒已被污染。之后,在原来的环境下运用新的试剂盒和新的移液枪配2个阴性对照,之后上机扩增,若未发生污染,则代表环境未受到污染;若出现污染,则代表环境已受污染。最后,在新的环境下运用新的试剂盒和原来的移液枪配2个阴性对照,之后上机扩增,若未发生污染,则代表移液枪未受污染;若存在污染,则代表移液枪已被污染。

另一方面,要注意对不同污染进行针对性处理。首先,要对器材污染进行有效处理。在移液枪污染处理中,要在移液枪未带有枪头的情况下吸取酒精,使枪柄部分完全浸泡于酒精当中,使其中的有机物充分溶解。之后,在移液枪未带有枪头的情况下吸取清水,重复多次,以完全洗掉有机物和酒精,进而使用未带有枪头的移液枪吸取50%的84消毒液,重复多次,同步停留至少30 min,后用未带有枪头的移液枪吸取清水,将所吸取清水视作样品展开检测,结合检测结果,评估是否已消除污染。对于八联管板架和离心板架,应当先完全浸泡在酒精中,之后通过清水洗净,后浸泡于30%的84消毒水中,浸泡时间至少30 min,而后用清水洗净,重复多次。针对离心机污染,可先通过酒精擦拭,后用清水擦拭多次,将转子浸泡于50%的84消毒液当中,后用清水洗净,经过充分晾晒,通过棉签采集离心机拭子并检测,结合结果评估污染解除与否。其次,要处理试剂盒污染,主要是将污染试剂盒封存,使用中使用新试剂盒。最后,要处理环境污染。具体是每天用30%的84消毒液对操作台面进行2~3次擦拭,结合实际情况适当增减擦拭次数。对于设备门把手、外部区域、门窗把手,可通过10%的84消毒液进行2~3次擦拭。实验所产生的垃圾但凡可浸泡在消毒水中,均选择浸泡处理,否则进行无害化处理。地面处理中,使用50%的84消毒液沾湿拖把,而后反复拖地,每天拖2次。实验室若有紫外线设备,将紫外线灯开启,照射约30 min,注意每天都要长时间的对实验室内进行紫外线照射消毒。实验室环境应当适度通风,使气溶胶蓄积逐步降低,若通风条件不佳,可选择风扇进行机械通风。环境污染处理后,采集环境样品展开检测,结合检测结果评估污染消除与否。

5 结论

综上所述,动物疫病实验室检测是实现动物疫病有效预防与控制的重要手段,但在其检测中还常受诸多因素的影响,导致检测结果不准确,为避免此类情况的出现,需要相关部门和人员全面了解其影响因素,并采取有效措施,确保检测工作的有序和有效开展,提高检测质量。

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