儿童主侧不合的疑难交叉配血原因分析

陈见南，占刘英，陈学军，尹明伟，徐 军，金小波

浙江大学医学院附属儿童医院/国家儿童健康与疾病临床医学研究中心实验检验中心输血科，浙江杭州 310052

输血是临床治疗的一种常见手段，输血的安全也成为人们高度重视的问题。输血前做交叉配血试验和对献血员与受血者的血型进行复核是保证输血安全的重要手段，交叉配血的主侧结果尤其应该引起医务人员的重视。既往有研究报道，血清不规则抗体是引起成年人交叉配血困难的主要原因之一[1-3]。除此之外，ABO血型亚型也是不可忽视的一大影响因素[4]。儿童是特殊的群体，儿童患者的疑难交叉配血有其自身的特点。本研究通过收集本院近两年中发现的儿童主侧不相合的交叉配血病例，对其进行进一步血型鉴定、不规则抗体筛查及鉴定、交叉配血试验，分析其形成的原因及输血策略,旨在保障儿科临床科学、合理、安全、有效用血。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取本院2018-2019年儿童交叉配血中发现的主侧不合的疑难交叉配血病例77例，其中男44例、女33例；年龄1～28 d 35例，>28 d至1岁6例，>1～3岁12例，>3～7岁 14例，>7～14岁10例；新生儿溶血35例、血液病15例、自身免疫性贫血4例、系统性红斑狼疮1例、先天性心脏病4例、肿瘤5例、消化系统疾病6例、神经系统疾病3例、呼吸系统疾病2例、肾脏疾病2例。交叉配血不合患儿的性别、年龄、疾病分布见表1。

1.2方法 血型鉴定采用微柱凝胶法和试管法进行，仪器与试剂包括ABO反定型红细胞、单克隆抗-A、抗-B、抗-A1、抗-D血清(上海血液生物医药有限责任公司)；ABO血型正反定型鉴定卡、DiaMed ID-Incubator 37 SⅡ离心机(瑞士达亚美公司)。抗体筛查和鉴定采用微柱凝胶法和抗球蛋白试管法进行，试剂与仪器包括抗人球蛋白抗Cd3检测试剂盒、抗人球蛋白抗C3d抗-IgG检测试剂盒、抗体筛查谱细胞、单克隆抗-A1、抗-H、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e、抗-P1、抗-M、抗-N血清(上海血液生物医药有限责任公司)，抗人球蛋白卡(抗-IgG+C3d)、DiaMed ID-Incubator 37 SⅠ孵育器、DiaMed ID-Incubator 37 SⅡ离心机(瑞士达亚美公司)。所有操作均按照《全国临床检验操作规程》[5]进行。

1.3统计学处理 采用Excel软件记录和分析数据。

2 结 果

2.1不规则抗体鉴定结果与检出率的比较 77例主侧不合交叉配血患儿中，检测出不规则抗体者占92.2%(71/77)，其中同种抗体占81.7%(58/71)，具体分布情况见表2；检测出自身抗体者占检测出不规则抗体者的18.3%(13/71)，其中冷自身抗体3例，占23.1%(3/13)，温自身抗体占76.9%(10/13)。

表2 不规则抗体鉴定结果与检出率的比较(n=6)

2.3疑难血型导致交叉配血不合的情况 77例主侧不合的交叉配血中，血型不符者占7.8%(6/77)，其中亚型占66.7%(4/6)，造血干细胞占33.3%(2/6)。在血型不符导致的疑难交叉配血中，ABO亚型是主要原因，见表3。

表3 血型不符导致疑难交叉配血原因分析

3 讨 论

在临床工作中，经常会遇见交叉配血主侧不合的情况，如何通过合理的检测手段来为患者提供相配的血液进行输注是工作中的难点。本研究对近两年交叉配血主侧不合的各年龄阶段的患儿分成5个年龄段进行统计，发现日龄1～28 d的患儿所占比例最高，为45.5%。

有许多因素可以引起交叉配血主侧不相合，不规则抗体的存在是其中的一个重要因素。在本研究中，不规则抗体包括同种抗体与自身抗体。同种抗体占不规则抗体的81.7%，其主要是Rh血型系统抗体，占所有同种抗体的55.2%(32/58)，其分布比例由高到低依次为抗-E、抗-D、抗-E合并抗-c、抗-D合并抗-C、抗-C，这与相关文献报道基本相似[7-9]。抗-E已成为Rh血型系统中检出率最高的抗体。这表明对于需要多次输血的患者，进行Rh表型检测，可以有效地排除Rh抗体引起的主侧不合交叉配血。MNS血型系统抗体在所有不规则抗体中排第二位，占37.9%，主要为抗-M。除去Rh血型系统与MNS血型系统以外，还检测出抗-Jka与抗-Lea各1例，其分别属于Kidd血型系统与Lewis血型系统。

在本次调查中，还有2例抗体未检测出特异性，可能的原因有：(1)遗传的变异，如抗-Bga、-Kna、-McCa、-Sla、-Yka、-Csa和-JMH，具有看不出特异性的模糊的反应格局是这些抗体的特征；(2)未列入抗原谱的抗原，标本可能与试剂制造商提供的抗原谱上没有常规列出的抗原发生反应，如Ytb；(3)标本可能与大多数或全部O型红细胞反应，但不会与自身ABO血型红细胞反应，如抗-H、抗-IH或抗-LebH；(4)可能含有多种抗体；(5)因合子型、个体间差异、血液储存的影响，抗原表达发生变化；(6)高频抗原的抗体；(7)低频抗原的抗体等[10]。与Rh血型系统抗体、MNS血型系统抗体比较，其他血型系统抗体和未鉴定出特异性抗体所占比例明显较低。

与成人疑难交叉配血相比较，引起儿童交叉配血不合的不规则抗体种类较少，主要是Rh、MNS、Kidd、Lewis等血型系统抗体，故在平时工作中可以重点关注这类抗体。儿童交叉配血不合在不同疾病患儿中的分布也与成年人不同，主要存在于新生儿溶血病与血液病患儿中。

在不规则抗体阳性标本中，还有13例患者存在自身抗体，占18.3%。自身抗体的产生与疾病、药物有关。对于冷自身抗体，可以先在37 ℃预热后进行交叉配血，一般能去除大部分冷凝集素的干扰，若在37 ℃仍具有反应性，一般认为有临床意义[11]。而对于存在温自身抗体的患者而言，其血型鉴定和交叉配血存在一定的困难。如该患者能够耐受贫血，则不建议输血。若是在紧急情况下，可以筛选出主侧凝集程度小于自身凝集程度的O型Rh同型的洗涤红细胞进行输注。

疑难血型也是造成交叉配血主侧不合中的主要原因，占7.8%。其中主要是ABO血型亚型和异基因的造血干细胞移植等导致的。对于前者如要输血可选择同型红细胞或O型洗涤红细胞，异基因的造血干细胞移植患者可选择O型洗涤红细胞输注。

综上所述，临床上如遇交叉配血主侧不合，可通过三步分析法[11]，在排除人为因素的前提下，确定配血不相合的原因，再通过试验选择相配的血液进行输注。